Cdk4/cyclin D3 (IC50 = 9 nM); Cdk4/cyclin D1 (IC50 = 11 nM); Cdk6/cyclin D2 (IC50 = 16 nM); DYRK1A (IC50 = 2000 nM); MAPK (IC50 = 8000 nM)
Cyclin-dependent kinase 4 (CDK4): IC₅₀ = 0.011 μmol/L (11 nM) [1]
- Cyclin-dependent kinase 6 (CDK6): IC₅₀ = 0.016 μmol/L (16 nM) [1]
- No activity against a panel of 36 additional protein kinases (including other CDKs like CDK2/1/5/7/9) [1]
- CDK4/6-cyclin D1 complex: Inhibits phosphorylation of retinoblastoma protein (Rb) at Ser780/Ser795 [2]

体外活性：PD 0332991 对其他蛋白激酶包括 EGFR、FGFR、PGFR、IR 几乎没有影响。 PD 0332991 是 Cdk4 的非 ATP 竞争性抑制剂。 PD 0332991 抑制 MDA-MB-435 乳腺癌细胞，IC50 为 66 nM，这是由于 Ser780 处的 Rb 磷酸化减少所致。 PD 0332991 抑制胸苷掺入 Rb 阳性人乳腺癌、结肠癌、肺癌以及人白血病的 DNA，IC50 值范围为 0.04-0.17 μM。 PD 0332991 在 Rb 阴性细胞中没有显示出活性。 PD 0332991 导致 MDA-MB-453 乳腺癌细胞和 Colo-205 癌细胞中 G1 期细胞积聚。 PD 0332991 还在 5T33MM 骨髓瘤细胞（免疫活性模型）中显示出活性，并使细胞对硼替佐米的杀伤敏感。 PD 0332991 抑制 luminal ER 阳性以及 HER2 扩增的乳腺癌细胞系，包括 MDA-MB-175、ZR-75-30、CAMA-1、MDA-MB-134、HCC-202 和 UACC-893。 PD 0332991 增强这些细胞系中他莫昔芬和曲妥珠单抗的活性。 PD 0332991 增强 MCF7 他莫昔芬耐药细胞中他莫昔芬的敏感性。最近的一项研究表明，PD 0332991 可以抑制恶性横纹肌瘤 (MRT) 细胞系，包括 MP-MRT-AN、KP-MRT-RY、G401、KP-MRT-NS，且 MRT 细胞系对 PD 0332991 的敏感性呈反比。与p16的表达相关。激酶测定：在 DMSO 中制备 PD0332991 的储备溶液。 CDK 测定在 96 孔过滤板中进行。所有CDK-细胞周期蛋白激酶复合物均通过杆状病毒感染在昆虫细胞中表达并纯化。检测的底物是与 GST 融合的 pRb 片段（氨基酸 792-928）（GST·RB-Cterm）。每孔总体积为 0.1 mL，含有终浓度 20 mM Tris-HCl、pH 7.4、50 mM NaCl、1 mM 二硫苏糖醇、10 mM MgCl2、25 μM ATP（对于 CDK4-细胞周期蛋白 D1、CDK6-细胞周期蛋白 D2、和 CDK6-细胞周期蛋白 D3）或 12 μM ATP（对于 CDK2-细胞周期蛋白 E、CDK2-细胞周期蛋白 A 和 CDC2-细胞周期蛋白 B），含 0.25 μCi [γ-32P]ATP、20 ng 酶、1 μg GST·RB -Cterm 和 PD 0332991 (0.001-0.1μM)。除 [γ-32P]ATP 外的所有组分均添加至孔中，并将板置于板混合器上 2 分钟。通过添加 [γ-32P]ATP 开始反应，并将板在 25 °C 下孵育 15 分钟。通过添加 0.1 mL 20% 三氯乙酸终止反应，并将板在 4 °C 下保持至少 1 小时，以使底物沉淀。然后用 0.2 mL 10% 三氯乙酸洗涤孔 5 次，并用 β 板计数器测定放射性掺入。细胞测定：细胞（肿瘤细胞系包括 MDA-MB-435、ZR-75-1、T-47D、MCF-7、H1299、Colo-205、MDA-MB-468、H2009、CRRF-CEM 和 K562）以每孔 2 × 104 的密度接种到 96 孔板中并孵育过夜。将 PD 0332991 (0.01-1 μM) 添加到孔中，并在 37 °C 下再孵育 24 小时。将[14C]胸苷(0.1μCi)添加到每个孔中，并允许放射性标记的掺入持续72小时。用β板计数器测定掺入的放射性。

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1. Palbociclib (PD-0332991)对体外培养的Rb阳性肿瘤细胞具有强效抗增殖作用，可诱导细胞发生特异性G1期阻滞；并以剂量依赖方式降低Rb蛋白Ser780/Ser795位点的磷酸化水平[1]
2. 在HR⁺/HER2⁺乳腺癌细胞系（BT474、MDA-MB-361、UACC812）中，Palbociclib (PD-0332991)在浓度高于2.5 μmol/L时展现出更强的杀瘤活性；在BT474细胞（IC₃₀=1.5 μmol/L）和MDA-MB-361细胞（IC₃₀=1.9 μmol/L）中，可显著抑制Rb蛋白在Ser780位点的磷酸化（该位点为CDK4/6复合物特异性磷酸化位点）[2]
3. 在耐图卡替尼（TR）的BT474/MDA-MB-361亚克隆细胞中，3 μmol/L Palbociclib (PD-0332991)处理可显著降低细胞克隆形成存活率；在耐帕博西利（PR）的BT474细胞中（10 μmol/L处理），约60%细胞可在单药处理下存活，联合图卡替尼可进一步降低存活率；MDA-MB-361 PR细胞对10 μmol/L Palbociclib (PD-0332991)高度耐药，联合1.75 μmol/L图卡替尼仅能降低约50%克隆形成存活率，而联合氟维司群（4 μmol/L）的三联方案可实现更显著的抑制效果[2]
4. 在野生型BT474细胞中，Palbociclib (PD-0332991)单药或双药联合（与图卡替尼/氟维司群）均无法降低细胞周期蛋白E（cyclin E）表达，而三联方案（帕博西利+图卡替尼+氟维司群）可显著下调cyclin E；在MDA-MB-361细胞中，Palbociclib (PD-0332991)单药或含其的联合方案均可降低cyclin E表达[2]
5. 在HR⁺/HER2⁺乳腺癌细胞中，Palbociclib (PD-0332991)单药或与氟维司群联用无法抑制pHER2或pERK1/2（甚至会升高MDA-MB-361细胞中pERK1/2水平），但与图卡替尼联用（双药/三药）可有效抑制BT474和MDA-MB-361细胞中的pERK1/2信号通路[2]

PD 0332991 表明 150 mg/kg 的 MDA-MB-435 异种移植物中肿瘤完全停滞。 PD 0332991 还通过消除肿瘤组织中的磷酸化 Rb 和增殖标记物 Ki-67 以及在 E2F 转录控制下下调基因，在多个人类肿瘤异种移植物中显示出广谱抗肿瘤活性。
三联疗法在体内抑制肿瘤生长方面显示出卓越的疗效[2]
研究人员接下来测试了我们的假设，即tucatinib、palbociclib和氟维司群的组合在体内具有疗效。对于体内实验，我们将分析重点放在含有图卡替尼的三重组合和双重组合上（图卡替尼加氟维司群或图卡替尼加帕博西利），并将其活性与赋形剂和单剂图卡替尼作比较。我们选择不在动物实验中测试单药帕博昔单抗、富司琼或帕博昔布和富司琼的组合的活性，因为已发表的临床研究表明，HER2抑制对于治疗HER2+乳腺癌症患者至关重要；在联合治疗方案中添加HER2抑制剂可改善OS（41，42）。因此，只有含tucatinib的组合对HR+/HER2+疾病患者具有临床相关性。
与赋形剂相比，tucatinib没有减少MDA-MB-361肿瘤的生长（图2A）。然而，图卡替尼与氟维司群或帕博西利的联合用药显著降低了肿瘤生长，三种联合用药对肿瘤生长的抑制作用最强。tucatinib组和赋形剂组在EOT时的平均肿瘤体积（VEOT）没有差异，而tucatinib+帕博西利、tucatinip+氟维司群和三联用药组的VEOT明显较小（图2B和C）。与两种双联合治疗相比，三种联合治疗的VEOT显著降低（图2B和C）。溶媒和tucatinib的平均TGR没有差异；然而，双重组合和三重组合都显著降低了TGR（图2D）。TGR在三重组合中最低，约为车辆的5.6倍（图2D）。Ki67的IHC染色显示，所有含帕博西利的组合都显著降低了增殖率。然而，在三重组合中观察到增殖细胞的百分比最低，其中Ki67明显低于最佳的双重组合（图2E和F）。
BT474肿瘤产生了类似的结果，其中三重组合诱导了肿瘤生长的最显著减少（图2G）。与赋形剂治疗相比，图卡替尼单独或与氟维司群或帕博西利联合使用也能减少肿瘤生长，尽管程度低于三联治疗。与单独使用tucatinib、tucatinib+fulvestrant或tucatinip+palbociclib组相比，三联用药的平均VEOT显著降低（图2H和I）。与实验开始时相比，三重联合治疗是唯一一种肿瘤大小缩小的治疗方法。三重组合诱导的TGR为阴性，远低于单药tucatinib或tucatinib+fulvestrant治疗组的TGR（图2J）。最后，Ki67分析显示，所有含帕博西利的组合都显著降低了增殖率，其中帕博西利布联合图卡替尼或三联治疗组的Ki67最低（图2K和L）。总结了动物实验的完整统计分析（补充图S4A）。在任何治疗方案中，小鼠的体重都没有明显减轻，这表明三联疗法对哺乳动物的毒性较低（补充图S4B和S4C）。

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1. 给荷Colo-205人结肠癌异种移植瘤的小鼠口服Palbociclib (PD-0332991)可显著诱导肿瘤消退；治疗剂量下，肿瘤组织中磷酸化Rb和增殖标志物Ki-67表达消失，E2F调控的基因表达下调[1]
2. 在MDA-MB-361 HR⁺/HER2⁺乳腺癌异种移植瘤模型（NCG小鼠）中，Palbociclib (PD-0332991)（50 mg/kg每日口服）联合图卡替尼（50 mg/kg每日口服）和氟维司群（5 mg每周皮下注射）对肿瘤生长的抑制作用最显著：治疗结束时的平均肿瘤体积（V_EOT）显著小于双药联合组（图卡替尼+帕博西利/图卡替尼+氟维司群），肿瘤生长速率（TGR）较溶媒组降低约5.6倍，Ki67增殖指数为所有组中最低（显著低于最佳双药联合组）[2]
3. 在BT474 HR⁺/HER2⁺乳腺癌异种移植瘤模型（NCG小鼠）中，三联方案（帕博西利+图卡替尼+氟维司群）的V_EOT最低（肿瘤体积较基线缩小）且TGR为负值（显著低于图卡替尼单药或双药联合组）；Ki67分析显示增殖率显著降低，含帕博西利的联合方案中Ki67水平最低[2]
4. 在MDA-MB-361 TR异种移植瘤模型中，将治疗方案从图卡替尼切换为Palbociclib (PD-0332991)+氟维司群后，肿瘤生长较溶媒组显著减慢，Ki67阳性率显著降低[2]

在 DMSO 中制备 PD0332991 的储备溶液。 CDK 检测在 96 孔过滤板上进行。通过用杆状病毒感染昆虫细胞，所有 CDK-细胞周期蛋白激酶复合物都得到表达和纯化。 pRb 与 GST 融合（GST·RB-Cterm）的一部分（跨越氨基酸 792-928）用作测定的底物。每孔总体积为 0.1 mL，包含以下终浓度：20 mM Tris-HCl，pH 7.4，50 mM NaCl，1 mM 二硫苏糖醇，10 mM MgCl2，25 μM ATP（用于 CDK4-细胞周期蛋白 D1、CDK6-细胞周期蛋白D2 和 CDK6-细胞周期蛋白 D3)，或 12 μM ATP（对于 CDK2-细胞周期蛋白 E、CDK2-细胞周期蛋白 A 和 CDC2-细胞周期蛋白 B）。该混合物还含有 0.25 μCi 的 [γ-32P]ATP、20 ng 酶、1 μg GST·RB-Cterm 和 PD 0332991 (0.001-0.1μM)。将除 [γ-32P]ATP 之外的所有成分添加到孔中后，将板放在板混合器上两分钟。添加 [γ-32P]ATP 以引发反应后，将板在 25°C 下孵育 15 分钟。将板在 4 °C 下保持至少一小时，使底物沉淀，然后添加 0.1 mL 20% 三氯乙酸终止反应。接下来，用0.2mL 10％三氯乙酸洗孔5次，并使用β板计数器测量放射性掺入。

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1. CDK4/6激酶活性抑制实验：将重组CDK4/细胞周期蛋白D1和CDK6/细胞周期蛋白D3复合物与不同浓度的Palbociclib (PD-0332991)，在含ATP和Rb来源肽底物（特异性被CDK4/6磷酸化）的反应缓冲液中孵育。反应在30℃下持续固定时长后，加入终止液终止反应。通过闪烁邻近测定法（SPA）或基于荧光的激酶实验检测磷酸化肽段，以相对激酶活性（vs溶媒对照组）对药物浓度对数作图，计算CDK4和CDK6的IC₅₀值，证实其对CDK4/6的高选择性[1]
2. Rb磷酸化抑制实验：将纯化的Rb蛋白与有活性的CDK4/6-细胞周期蛋白D1复合物、梯度浓度的Palbociclib (PD-0332991)在激酶缓冲液中孵育。37℃孵育1小时后，加入SDS-PAGE上样缓冲液终止反应。通过Western blot使用磷酸化特异性抗体检测磷酸化Rb（Ser780/Ser795），密度分析证实Palbociclib (PD-0332991)以剂量依赖方式抑制Rb磷酸化[2]

经过 72 小时载体或药物治疗后，使用 Cell Titer Glo 测定评估细胞活力。在氟维司群治疗之前，细胞在不含雌激素的条件下生长，并添加雌二醇至终浓度 10^-8 M。对于每个细胞系，palbociclib、氟维司群和 tucatinib 的 IC30 值为决定; IC30 浓度随后用于后续研究。

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1. 细胞活力实验（HR⁺/HER2⁺乳腺癌细胞）：将BT474/MDA-MB-361/UACC812细胞接种于96孔板，在无雌激素培养基中培养（处理前加入10⁻⁸ mol/L雌二醇）。细胞经Palbociclib (PD-0332991) IC₃₀浓度（BT474为1.5 μmol/L，MDA-MB-361为1.9 μmol/L）单药或联合图卡替尼/氟维司群处理72小时后，采用Cell Titer Glo法检测细胞活力，所有实验重复≥3次[2]
2. 克隆形成实验：将野生型/耐药亚克隆乳腺癌细胞接种于6孔板，经Palbociclib (PD-0332991)（3/5/10 μmol/L）单药或联合图卡替尼/氟维司群处理5天后，换正常培养基恢复培养5天。用10%福尔马林固定细胞，结晶紫染色后通过ImageJ软件定量克隆融合度，实验重复≥3次[2]
3. 信号蛋白Western blot分析：HR⁺/HER2⁺乳腺癌细胞经Palbociclib (PD-0332991) IC₃₀浓度处理24小时后，用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞。取20-50 μg蛋白上样进行SDS-PAGE，转印至PVDF膜后，用pRB S780、HER2、pHER2、ER、ERK1/2、pERK1/2、cyclin E一抗及内参抗体（纽蛋白/α-微管蛋白）孵育。使用HRP标记的二抗检测信号，通过Odyssey成像系统/ImageJ定量信号强度，每个蛋白印迹实验重复≥2次[2]
4. 细胞周期分析（CDK4/6抑制剂可选实验）：将Rb阳性肿瘤细胞（如MCF-7/BT474）经Palbociclib (PD-0332991)处理24-48小时后收集，70%乙醇固定，用含RNase A的碘化丙啶（PI）染色。通过流式细胞术分析细胞周期分布（G1/S/G2-M期），证实处理组细胞发生特异性G1期阻滞[1]

注射MDA-MB-361细胞的NCG小鼠
50mg/kg
og

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口服PD 0332991可使携带Colo-205人结肠癌的小鼠出现明显的肿瘤消退。治疗剂量的PD 0332991可消除肿瘤组织中的磷酸化Rb和增殖标志物Ki-67，并下调E2F转录调控下的基因。结果表明，单独抑制Cdk4/6足以导致某些肿瘤的消退和肿瘤负荷的净减少。[1]

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1. Colo-205结肠癌异种移植模型：将Colo-205细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下注射到雌性裸鼠的侧腹部。当肿瘤体积达到约 100-150 mm³ 时，将帕博西尼 (PD-0332991) 配制成合适的载体（未具体说明），并以治疗剂量（未提供具体剂量/频率）口服给药，疗程固定。每 2-3 天测量一次肿瘤体积（V = 长 × 宽² × 0.52），并在研究终点收集肿瘤组织进行免疫组化（磷酸化 Rb、Ki-67）和基因表达分析（E2F 靶基因）[1]。
2. HR⁺/HER2⁺ 乳腺癌异种移植模型（NCG 小鼠）：对 6 周龄的 NOD-Prkdcᵉᵐ²⁶Cd⁵²Il2rgᵉᵐ²⁶Cd²²/NjuCrl 雌性小鼠进行双侧卵巢切除术，并植入 1 mg 雌二醇缓释片。将 1×10⁶ 个 BT474/MDA-MB-361 细胞（溶于 50% Matrigel）注射到第 4 个乳腺脂肪垫中。当肿瘤平均体积达到 200 mm³ 时，将小鼠随机分为以下治疗组：帕博西尼 (PD-0332991) 溶于乳酸钠溶液中，剂量为 50 mg/kg，每日灌胃给药；氟维司群（5 mg/周）溶于花生油中，皮下注射给药；图卡替尼（50 mg/kg/天）溶于卡普替索溶液中，每日灌胃给药。治疗持续21天，定期测量肿瘤体积，并在治疗结束时处死小鼠，收集肿瘤进行IHC（Ki67）染色[2]
3. MDA-MB-361 TR异种移植模型：将1×10⁶个TR MDA-MB-361细胞注射到卵巢切除的NCG小鼠的乳腺脂肪垫中，同时植入雌二醇缓释片。当肿瘤体积达到200 mm³时，小鼠接受图卡替尼治疗，直至肿瘤体积达到500 mm³，然后改用帕博西尼（PD-0332991）（50 mg/kg，每日口服）+氟维司群（5 mg，每周皮下注射）治疗21天。监测肿瘤生长情况，并对收集的肿瘤进行Ki67 IHC染色[2]

吸收、分布和排泄
帕博西尼的药代动力学呈线性特征，口服给药后6-12小时达到血浆峰浓度。据报道，其口服生物利用度为46%，8天后达到稳态，中位累积比率为2.4。空腹状态下帕博西尼的吸收显著降低，因此建议服用此药时进食。
帕博西尼的主要排泄途径是经肝脏代谢后通过粪便排出，而肾脏清除的作用较小，仅占清除剂量的17.5%。
帕博西尼的平均表观分布容积为2583 L，表明帕博西尼能广泛渗透到外周组织。
帕博西尼的平均表观口服清除率为63.1 L/h。

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代谢/代谢物
帕博西尼主要在肝脏转化。其代谢主要由细胞色素P450同工酶3A和磺基转移酶2A1催化。帕博西尼的代谢主要表现为氧化和磺化反应，酰化和葡萄糖醛酸化反应为次要反应。帕博西尼代谢后主要形成无活性的葡萄糖醛酸苷和氨基磺酸结合物。主要的循环代谢物是葡萄糖醛酸苷结合物，占排泄剂量的1.5%。

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生物半衰期
帕博西尼的平均血浆消除半衰期为29小时。

肝毒性
在大型临床试验中，不良事件较为常见，导致三分之一的患者剂量减少，8%的患者停药。关于帕博西尼疗效和安全性的文献很少提及血清ALT升高或肝毒性。在一项针对难治性转移性乳腺癌女性患者的研究中，接受帕博西尼联合氟维司群治疗的患者中，6%出现血清ALT升高（其中2%超过正常值上限的5倍），而单用氟维司群治疗的患者中，这一比例为3%（无超过正常值上限5倍的患者）。自帕博西尼获批并广泛应用以来，已有数例报告显示，患者在接受2或3个疗程的帕博西尼治疗后出现显著的ALT升高，停药后ALT水平有所改善，但重新用药后ALT迅速复发。这些患者的血清胆红素和碱性磷酸酶水平正常，且未提及相关症状。此外，有罕见病例报告显示，难治性转移性乳腺癌患者在开始服用帕博西尼2至3个月后出现假性肝硬化，表现为疲乏、黄疸和腹水，血清转氨酶和碱性磷酸酶水平仅轻度升高。影像学检查显示肝脏严重结节，但肝脏组织学检查显示坏死转移瘤区域存在促纤维增生性改变，而无肝硬化。肝脏还存在血管改变，提示肝窦阻塞综合征，这些改变可能是由于转移瘤组织迅速萎缩和血管损伤共同作用所致。在其他一些疗效显著的抗肿瘤疗法治疗肝转移癌时，也曾报道过假性肝硬化，但发生率很低。
可能性评分：C（可能是临床上明显的肝损伤的罕见原因，其表现为肝转移瘤坏死后肝脏结节性转化引起的假性肝硬化）。

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妊娠和哺乳期用药
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于帕博西尼在哺乳期临床应用的信息。由于帕博西尼与血浆蛋白的结合率为85%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，其半衰期约为29小时，可能会在婴儿体内蓄积。此外，帕博西尼还与来曲唑或氟维司群联合使用，这可能会增加婴儿的风险。制造商建议在接受帕博西尼治疗期间以及末次给药后 3 周内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白质结合
帕博西尼在体外与人血浆蛋白的结合率约为给药剂量的 85%。

[1]. Mol Cancer Ther . 2004 Nov;3(11):1427-38.

[2]. Mol Cancer Ther. 2022 Jan 1; 21(1): 48–57. Published online 2021 Nov 2.

药效学
由于其作用机制，帕博西尼可抑制视网膜母细胞瘤抑癌基因（RB）阳性癌细胞的生长并抑制其DNA复制。正如预期的那样，这些RB阳性细胞中处于G1期的细胞比例显著增加，而帕博西尼的存在可有效抑制RB的去磷酸化，从而降低细胞增殖并诱导细胞衰老，导致细胞周期阻滞。体外研究表明，帕博西尼可通过抑制细胞周期从G1期向S期的进展，降低雌激素受体阳性乳腺癌细胞系的增殖。本研究证实，细胞对帕博西尼的敏感性随着RB1和CCND1表达的增加以及CDKN2A表达的降低而显著增强。此外，帕博西尼与抗雌激素联合使用，可增强雌激素受体阳性乳腺癌小鼠模型的体内抗肿瘤活性。在临床试验中，帕博西尼联合来曲唑显著延长了未接受过内分泌治疗的转移性乳腺癌患者的无进展生存期（PFS）。结果显示，PFS从4.5个月延长至9.5个月，总缓解率（ORR）为24.6%。表达激素受体（HR）和HER2的乳腺癌对靶向治疗具有耐药性。HER2和雌激素受体（ER）通路的促肿瘤信号汇聚于细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）4/6复合物，该复合物驱动细胞周期进程并导致治疗耐药性的产生。因此，我们假设同时靶向ER、HER2和CDK4/6可能提高肿瘤杀伤活性，并抑制治疗过程中产生的耐药亚克隆。我们测试了由 tucatinib（HER2 小分子抑制剂）、palbociclib（CDK4/6 抑制剂）和 fulvestrant（选择性 ER 降解剂）组成的三靶点联合疗法在 HR+/HER2+ 人乳腺癌细胞系和异种移植模型中的活性。此外，我们还评估了三靶点联合疗法是否能在体外和体内抑制 tucatinib 或 palbociclib 耐药亚克隆的生长。三靶点联合疗法显著降低了 HR+/HER2+ 肿瘤细胞的活力、克隆形成能力和体内生长。此外，对方案中第三种药物耐药的 HR+/HER2+ 细胞的存活率也因其他两种药物的联合作用而降低。我们认为，靶向三药联合疗法在治疗其他药物耐药肿瘤方面具有临床疗效，并能在患者中诱导强烈的反应。[2]

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1. Palbociclib (PD-0332991) 是一种高度特异性的 CDK4/6 抑制剂；单独抑制 CDK4/6 足以引起 Rb 阳性肿瘤的肿瘤消退并降低肿瘤负荷 [1]
2. 基于 PALOMA 试验，帕博西尼 (PD-0332991) 已获得 FDA 批准用于治疗 HR⁺/HER2 阴性转移性乳腺癌（与氟维司群/阿那曲唑联合使用），但尚未获批用于治疗 HR⁺/HER2⁺ 乳腺癌 [2]
3. 在 HR⁺/HER2⁺ 乳腺癌中，HER2 和 ER 信号在细胞周期蛋白 D1-CDK4/6 复合物处汇合，驱动细胞周期进程和治疗耐药性； 帕博西尼 (PD-0332991)可阻断这种汇聚，三联疗法（帕博西尼 + 图卡替尼 + 氟维司群）通过同时抑制 ER、HER2 和 CDK4/6 通路来阻止耐药机制的产生 [2]
4. 帕博西尼 (PD-0332991)可克服细胞周期蛋白 E 介导的耐药性（细胞周期蛋白 E 过表达存在于 35% 的 HER2⁺ 乳腺癌中，并与对 HER2/CDK4/6/ER 靶向药物的耐药性相关）[2]
5. HR⁺/HER2⁺ 乳腺癌的耐药亚克隆 (TR/PR) 对包含 帕博西尼 (PD-0332991) 的联合治疗敏感，这支持三联疗法作为抑制耐药亚克隆的策略 [2]

C24H29N7O2

447.54

447.238

C, 64.41; H, 6.53; N, 21.91; O, 7.15

571190-30-2

Palbociclib monohydrochloride;827022-32-2;Palbociclib hydrochloride;571189-11-2;Palbociclib-d8;1628752-83-9;Palbociclib isethionate;827022-33-3;Palbociclib dihydrochloride;Palbociclib orotate;2757498-64-7;Palbociclib-d4 hydrochloride

5330286

Yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

711.5±70.0 °C at 760 mmHg

200ºC

384.1±35.7 °C

0.0±2.3 mmHg at 25°C

1.648

0.99

105.04

2

8

5

33

775

0

O=C1C(C(C([H])([H])[H])=O)=C(C([H])([H])[H])C2=C([H])N=C(N([H])C3C([H])=C([H])C(=C([H])N=3)N3C([H])([H])C([H])([H])N([H])C([H])([H])C3([H])[H])N=C2N1C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H]

AHJRHEGDXFFMBM-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C24H29N7O2/c1-15-19-14-27-24(28-20-8-7-18(13-26-20)30-11-9-25-10-12-30)29-22(19)31(17-5-3-4-6-17)23(33)21(15)16(2)32/h7-8,13-14,17,25H,3-6,9-12H2,1-2H3,(H,26,27,28,29)

6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methyl-2-[(5-piperazin-1-ylpyridin-2-yl)amino]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one;hydrochloride

PD0332991; Palbociclib free base; UNII-G9ZF61LE7G; 6-acetyl-8-cyclopentyl-5-methyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-one; PD-0332991; PD 0332991; Trade name: Ibrance.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: 6.67 mg/mL (14.90 mM) in 0.5% CMC/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液； 需要超声波加热并加热至 42°C。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。