Poricoic acid A

别名: 茯苓新酸A;茯苓酸A,茯苓新酸A;茯苓酸APoricoic acid A;甲酸糠酯;茯苓酸F;茯苓酸 A;茯苓酸A
目录号: V33056 纯度: ≥98%
茯苓酸 A 存在于茯苓中,具有抗肿瘤活性。
Poricoic acid A CAS号: 137551-38-3
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
茯苓酸 A 存在于茯苓中,具有抗肿瘤活性。 Poricoic Acid A 通过调节 Gas6/AxlNFκB/Nrf2 轴增强褪黑激素对 AKI 至 CKD 的抑制。
生物活性&实验参考方法
靶点
Poricoic acid A exerts its effects by regulating the Gas6/Axl–NF-κB/Nrf2 signaling axis.[2]
体外研究 (In Vitro)
Poricoic acid A 对人肺腺癌A549细胞具有抑制活性,其半数抑制浓度(IC₅₀)为34.6 µg/mL。[1]
含有 Poricoic acid A 的裂环羊毛脂烷三萜酸混合物对A549和Hela细胞的增殖具有浓度依赖性抑制作用,IC₅₀值分别为65.30 ± 0.33 µg/mL 和 48.09 ± 6.75 µg/mL。[1]

在遭受缺氧/复氧损伤的大鼠肾近端小管上皮细胞中,单独使用 Poricoic acid A (10 µM) 或与褪黑素 (10 µM) 联用,可减轻H/R诱导的损伤。它有助于逆转H/R诱导的上皮细胞标志物E-钙粘蛋白的减少。该化合物单独或联合使用能减弱H/R诱导的NF-κB通路激活(降低p-IκBα和核p65水平),并上调抗氧化Nrf2通路(增加Nrf2及其下游靶点HO-1、过氧化氢酶、GCLC和NQO-1)。联合疗法比单独使用 Poricoic acid A 效果更强。[2]
使用细胞计数试剂盒进行的细胞活力实验表明,Poricoic acid A 在1、10、50和100 µM浓度下处理24小时,对大鼠肾近端小管上皮细胞未引起显著的增殖或细胞毒性作用。[2]
体内研究 (In Vivo)
在大鼠肾缺血再灌注损伤模型中,使用 Poricoic acid A 治疗(10 mg/kg/天,从再灌注后第2天到第13天口服给药)显著降低了IRI后第3天和第14天升高的血清肌酐和尿素水平,表明肾功能改善。它还改善了肾脏组织学损伤,包括第14天时的肾小管扩张、间质炎症和胶原沉积。
在作用机制上,Poricoic acid A 治疗以时间依赖性方式调节Gas6/Axl通路:在急性肾损伤阶段(第3天)上调抗炎的Gas6/Axl信号,在慢性肾病阶段(第14天)下调促纤维化的Gas6/Axl信号。
在AKI阶段,Poricoic acid A 通过抑制NF-κB通路激活(降低p-IκBα、核p65以及炎症标志物MCP-1、COX-2、iNOS、12-LO)和增强Nrf2抗氧化通路(增加Nrf2、HO-1、过氧化氢酶、GCLC、NQO-1)来减轻炎症。它还减少了肾脏中的巨噬细胞(ED-1阳性)和T细胞(CD3阳性)浸润。
在CKD阶段,Poricoic acid A 抑制了肾纤维化,表现为胶原I和III沉积减少,纤维化标志物(胶原I、纤连蛋白、FSP1、α-SMA、波形蛋白、TGF-β1)蛋白水平降低,以及上皮标志物E-钙粘蛋白表达增加。它还通过增加足细胞标志物(nephrin、podocin、podocalyxin、synaptopodin、WT1)和降低desmin表达来保护足细胞免受损伤。
Poricoic acid A 与褪黑素的联合使用比单独使用 Poricoic acid A 显示出更优越的肾脏保护作用。[2]
细胞实验
文献描述了用于评估化合物(包括总酸提取物)的一般细胞毒性实验流程。将人癌细胞系(A549、HepG2、2MIA、Hela、MGC803、MCF-7)以每孔4×10³个细胞的密度接种于96孔板。用待测化合物或无血清培养基处理48小时后,通过加入MTT试剂评估细胞活性。在570 nm处测量吸光度以确定细胞生长抑制情况。[1]

该研究采用了大鼠肾近端小管上皮细胞的缺氧/复氧模型。培养细胞后,将其置于缺氧室(1% O2)中,37°C下缺氧9小时,随后在正常条件下复氧6或12小时。在复氧期间,用 Poricoic acid A (10 µM) 或溶剂处理细胞。处理后,收集细胞用于各种分析。
使用细胞计数试剂盒-8评估细胞活力。将细胞接种于96孔板,用不同浓度的 Poricoic acid A 处理24小时,然后加入试剂盒试剂。在450 nm处测量吸光度。
通过定量实时PCR进行基因表达分析。分离总RNA,逆转录成cDNA,并使用特异性引物和SYBR Green系统进行扩增。
通过蛋白质印迹分析蛋白表达。裂解细胞,通过凝胶电泳分离蛋白质,转膜,并用特异性一抗和二抗孵育。使用化学发光检测系统显影条带。
进行免疫荧光染色。将生长在盖玻片上的细胞固定、透化、封闭,与一抗孵育过夜,然后与荧光二抗和DAPI(用于核染色)孵育。使用共聚焦显微镜采集图像。
对于基因敲低,使用基于脂质的转染试剂将Axl特异性siRNA转染到大鼠肾近端小管上皮细胞中。72小时后,收集细胞用于后续实验以验证Axl的作用。[2]
动物实验
本研究采用大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。雄性Sprague-Dawley大鼠麻醉后,夹闭肾蒂1小时诱导缺血,随后进行再灌注。假手术组大鼠仅行开腹手术,不进行肾蒂夹闭。
大鼠随机分为两组,包括缺血再灌注损伤(IRI)模型组和用Poricoic acid A治疗的IRI组。Poricoic acid A以10 mg/kg/天的剂量,从再灌注后第2天开始,持续至第13天,通过胃内灌注给药。
术后第3天和第14天通过检测血清肌酐和尿素水平评估肾功能。在实验终点(第14天),收集肾脏组织进行组织学分析(苏木精-伊红染色、马松三色染色、苦味酸-天狼星红染色)、免疫组织化学、免疫荧光和分子生物学分析(蛋白质印迹、qPCR)。[2]
参考文献

[1]. Enrichment and separation of antitumor triterpene acids from the epidermis of Poria cocos by pH-zone-refining counter-current chromatography and conventional high-speed counter-current chromatography. J Sep Sci. 2015 Jun;38(11):1977-82.

[2]. Poricoic acid A enhances melatonin inhibition of AKI-to-CKD transition by regulating Gas6/AxlNFκB/Nrf2 axis. Free Radic Biol Med. 2019 Apr;134:484-497.

其他信息
茯苓酸A是从茯苓中分离得到的一种三环三萜类化合物。它是一种真菌代谢产物。它是一种三环三萜类化合物、二羧酸和仲醇。
据报道,黄柏和茯苓中也含有茯苓酸A,并有相关数据。
茯苓酸A是一种开环羊毛甾烷型三萜酸,是茯苓(Schw.) Wolf表皮中发现的主要抗肿瘤成分之一。[1]
茯苓酸A已通过常规高速逆流色谱法(HSCCC)从富集的三萜酸混合物中成功分离得到。从120 mg富集混合物中,得到50 mg纯度为98%的茯苓酸A。[1]
通过将其1H NMR和13C NMR光谱数据与文献值进行比较,证实了茯苓酸A的化学结构。[1]
该研究得出结论,茯苓酸A是茯苓表皮中一种重要的抗肺癌成分,存在于开环羊毛甾烷三萜酸混合物中。[1]

茯苓酸A是从茯苓(Poria cocos Wolf)表层分离得到的主要三萜类化合物。
在本研究中,从茯苓表层提取并纯化了茯苓酸A。植物材料经乙醇提取、分配后,再经多步柱色谱分离(MCI 凝胶、硅胶、RP-18),最后采用半制备型 HPLC 纯化得到纯化合物。
文章中提供了Poricoic acid A的化学结构(图 1A)。
该研究发现受体酪氨酸激酶 Axl 是预防 AKI 向 CKD 转化的潜在治疗靶点,Poricoic acid A 部分通过调节该通路发挥作用。
Poricoic acid A 增强了褪黑素对 AKI 向 CKD 转化的抑制作用,提示二者可能具有协同增效作用。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C31H46O5
分子量
498.6940
精确质量
498.334
CAS号
137551-38-3
PubChem CID
5471851
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
664.0±55.0 °C at 760 mmHg
闪点
369.3±28.0 °C
蒸汽压
0.0±4.6 mmHg at 25°C
折射率
1.554
LogP
7.26
tPSA
94.83
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
10
重原子数目
36
分子复杂度/Complexity
1000
定义原子立体中心数目
7
SMILES
CC(C)C(=C)CC[C@H]([C@H]1[C@@H](C[C@@]2([C@@]1(CC=C3C2=CC[C@H]([C@]3(C)CCC(=O)O)C(=C)C)C)C)O)C(=O)O
InChi Key
KVAQLXUMUVEKGR-SMFZDKLCSA-N
InChi Code
InChI=1S/C31H46O5/c1-18(2)20(5)9-10-21(28(35)36)27-25(32)17-31(8)24-12-11-22(19(3)4)29(6,15-14-26(33)34)23(24)13-16-30(27,31)7/h12-13,18,21-22,25,27,32H,3,5,9-11,14-17H2,1-2,4,6-8H3,(H,33,34)(H,35,36)/t21-,22+,25-,27+,29+,30-,31+/m1/s1
化学名
(2R)-2-[(2R,3R,3aR,6S,7S,9bR)-6-(2-carboxyethyl)-2-hydroxy-3a,6,9b-trimethyl-7-prop-1-en-2-yl-1,2,3,4,7,8-hexahydrocyclopenta[a]naphthalen-3-yl]-6-methyl-5-methylideneheptanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~200.53 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0053 mL 10.0263 mL 20.0525 mL
5 mM 0.4011 mL 2.0053 mL 4.0105 mL
10 mM 0.2005 mL 1.0026 mL 2.0053 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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