DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)

别名: 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl; UNII-DFD3H4VGDH; DFD3H4VGDH; 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (free radical); EINECS 217-591-8; Hydrazyl, 2,2-diphenyl-1-picryl-; NSC 12562; ...; 1898-66-4; 2,2-联苯基-1-苦基肼基(free radical);1,1-二苯基-2-苦基肼;A,A二苯基Β苦基肼基游离基;1,1-二苯-2-苦肼基;2,2-二苯基-1-苦基肼
目录号: V64169 纯度: ≥98%
DPPH(2,2-二苯基-1-三硝基苯肼)是一种稳定的自由基,可用于测量抗氧化剂的自由基清除活性。
DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) CAS号: 1898-66-4
产品类别: Others 12
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规格 价格 库存 数量
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纯度: =99.66%

纯度: =99.2%

产品描述
DPPH(2,2-二苯基-1-三硝基苯肼)是一种稳定的自由基,可用于测量抗氧化剂的自由基清除活性。 DPPH中氮原子的奇数电子通过吸收抗氧化剂中的氢原子被还原成相应的肼。 DPPH方法可用于水性和非极性有机溶剂,并可用于检查亲水性和亲脂性抗氧化剂。
是一种稳定的深色自由基化合物,在分析化学领域应用广泛。其主要用途是作为试剂,用于评估各种物质(如植物提取物和纯化合物)的自由基清除活性(即抗氧化能力)。当DPPH从抗氧化剂中获得一个氢原子或电子时,其颜色会从深紫色变为淡黄色,这一特性构成了广泛使用的DPPH检测法的理论基础。
生物活性&实验参考方法
靶点
Free radicals (scavenges DPPH• radicals via hydrogen donation)[1]
As a chemical reagent, DPPH does not have a biological "target" in the context of drug discovery. It acts as a stable, synthetic free radical (radical nitrogen center) that serves as a substrate or probe for measuring the hydrogen-donating or electron-donating capacity of antioxidant compounds .
体外研究 (In Vitro)
抗氧化活性:乙醇溶液中的DPPH(0.1 mM)用于评估植物提取物和纯化合物的自由基清除能力。通过测量517 nm处的吸光度变化监测反应,吸光度下降表明自由基清除活性。该方法在不同样品基质中验证了重复性和灵敏度[1]
由于DPPH具有奇数个电子,因此在517 nm处表现出强吸收带。溶液呈现深紫色,吸收随着电子对消失而消失。随后的脱色是相对于吸收的电子量而言的化学计量的。在相关吸收范围内,0.5 mM 的酒精溶液呈现出强烈的颜色,并遵循朗伯-比尔定律 [1]。 DPPH 测定是一种快速、简单、经济且流行的方法,可用于测量物质提供氢或清除自由基的能力,以及评估食品的抗氧化活性。此外,在复杂的生物系统中,它可用于定量液体或固体样品类型中的抗氧化剂。使用这种简单且用户友好的方法可以确定水果和蔬菜汁的总抗氧化能力和自由基清除活性。小麦籽粒和麸皮、蔬菜、共轭亚油酸、草药、食用种子油和面粉在各种溶剂体系(例如乙醇、丙酮水溶液、甲醇、含水乙醇和苯)中的氧化均已得到有效研究该测定。抗氧化剂的特性。橄榄油、水果、果汁和葡萄酒中的抗氧化剂包括半胱氨酸、谷胱甘肽、抗坏血酸、生育酚和多羟基芳香族化合物,可以使用这种简单的方法轻松测量[1]。
DPPH检测法是一种用于评估抗氧化剂自由基清除能力的体外化学方法。在该检测中,将DPPH溶解于合适的溶剂(通常是甲醇或乙醇),并在特定波长(515-517 nm)下测定其吸光度。当加入具有抗氧化活性的样品时,样品会还原DPPH自由基,导致吸光度下降,其下降程度与样品的浓度成正比。抗氧化能力通常以半数抑制浓度(IC₅₀)或Trolox等效抗氧化能力(TEAC)来表示。
体内研究 (In Vivo)
DPPPH本身不是治疗剂,不用于体内治疗。它仅限于实验室试剂,其用途严格限定在体外和离体的化学分析中,以测量其他物质的抗氧化潜力。涉及活体生物的体内研究会间接使用DPPH,仅用于在动物模型中进行测试之前,表征某提取物的抗氧化特性。
酶活实验
DPPH自由基清除实验:将DPPH(0.1 mM乙醇溶液)与样品提取物或化合物混合,避光孵育30分钟后,于517 nm测定吸光度。抗氧化活性以相对于无样品对照组的吸光度下降百分比计算[1]
DPPH自由基清除实验是一种标准的无细胞比色分析方案。
通用方案: 将DPPH工作液(例如0.1 mM)溶于合适的有机溶剂(如甲醇)中。
反应: 将待测化合物或提取物的样品与DPPH溶液混合。反应混合物在室温下避光孵育设定的时间(通常为30-60分钟)。
检测: 孵育后,使用分光光度计或酶标仪在515-517 nm波长处测定吸光度的下降值。吸光度越低,表明自由基清除活性越高。
对照: 通常使用抗坏血酸、丁基羟基甲苯(BHT)或Trolox作为阳性对照。阴性对照为DPPH溶液与用于溶解待测样品的溶剂的混合物。
计算: 使用公式计算自由基清除活性百分比:[(A_对照 – A_样品) / A_对照] × 100。然后从浓度对抑制百分比的图中确定IC₅₀值。
细胞实验
DPPH不用于活细胞实验。然而,DPPH检测法常与细胞抗氧化活性(CAA)检测法进行比较或配合使用。CAA检测通常使用人细胞系(如HepG2肝癌细胞)和荧光探针(如DCFH-DA)。细胞装载探针后,用待测样品和自由基引发剂(如ABAP)处理。随时间监测荧光,细胞内的抗氧化剂会淬灭荧光。化学DPPH检测的结果并不总是与CAA检测的结果相关,因为后者考虑了生物利用度和膜通透性等因素。
动物实验
DPPH不会被用于动物给药。它纯粹是一种分析工具。提及DPPH的动物研究,是利用它在体外预先筛选某种物质的抗氧化活性,然后再在动物疾病模型(如氧化应激模型)中评估该物质的功效。不存在向动物“给予DPPH”的标准方案。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
2735032 小鼠静脉注射LD50为1800微克/千克,美国陆军军备研究与发展司令部化学系统实验室,NIOSH交换化学品,NX#06207
DPPH是一种仅供研究使用的化学试剂,不可供人类食用。根据安全数据,DPPH可引起皮肤和呼吸道致敏。在处理该化合物时,应遵守标准实验室安全规范,包括佩戴手套、护目镜并在通风橱内操作。它没有用于治疗用途的明确毒理学特征,因为它不是药物。
参考文献

[1]. Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay. J Food Sci Technol. 2011 Aug;48(4):412-22.

其他信息
方法学发展:DPPH 测定法经过优化,提高了准确度和精密度,并提出了反应条件标准化的建议(例如,溶剂选择、孵育时间和波长选择)。该方法已被证明能有效定量食品、植物和生物样品中的抗氧化活性[1]
- 作用机制:DPPH 是一种稳定的自由基,它从抗氧化剂中接受一个电子或氢原子,形成非自由基 DPPH-H。颜色褪色程度(从紫色到黄色)与抗氧化能力相关[1]
- 应用:广泛应用于食品科学、药理学和化妆品领域,用于筛选天然抗氧化剂、评估膳食补充剂以及评估生物系统中的氧化应激[1]
DPPH检测法是最受欢迎、快速且低成本的用于初步筛选天然产物和合成化合物中抗氧化活性的方法之一。然而,其结果在本质上是化学反应性的,并不一定能反映化合物在活细胞或生物体内的生物活性。反应机制可涉及氢原子转移(HAT)或单电子转移(SET),具体取决于抗氧化剂的结构和反应条件。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C18H12N5O6
分子量
394.32
精确质量
394.078
CAS号
1898-66-4
PubChem CID
2735032
外观&性状
Brown to black solid powder
熔点
136-138ºC
LogP
5.97
tPSA
140.7
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
549
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC=C(C=C1)N(C2=CC=CC=C2)[N]C3=C(C=C(C=C3[N+](=O)[O-])[N+](=O)[O-])[N+](=O)[O-]
InChi Key
HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C18H12N5O6/c24-21(25)15-11-16(22(26)27)18(17(12-15)23(28)29)19-20(13-7-3-1-4-8-13)14-9-5-2-6-10-14/h1-12H
化学名
1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (free radical)
别名
2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl; UNII-DFD3H4VGDH; DFD3H4VGDH; 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (free radical); EINECS 217-591-8; Hydrazyl, 2,2-diphenyl-1-picryl-; NSC 12562; ...; 1898-66-4;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Note: 本产品见光不稳定,请避光条件下使用和储存
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 25 mg/mL (63.40 mM)
Ethanol: 1 mg/mL (2.54 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.5360 mL 12.6801 mL 25.3601 mL
5 mM 0.5072 mL 2.5360 mL 5.0720 mL
10 mM 0.2536 mL 1.2680 mL 2.5360 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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