| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CYP2
Cytochrome P450 2C19 (CYP2C19); primarily used as a substrate probe. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在细胞色素b5存在的情况下，S-美芬妥英对五种分离的细胞色素P-450的Km值均为1.25 mM [1]。
基于美芬妥英4-羟化酶活性，从人肝微粒体中纯化出两种细胞色素P-450 (P-450)，分别命名为P-450MP-1和P-450MP-2，纯化后的P-450MP-1和P-450MP-2的P-450含量为12-17 nmol/mg蛋白，其表观单体分子量分别为48,000和50,000。根据在正辛基氨基琼脂糖4B、羟基磷灰石、DEAE和CM纤维素柱上的色谱行为、光谱性质、氨基酸组成、肽图谱、双向免疫扩散分析、免疫抑制以及N端氨基酸序列等分析，发现P-450MP-1和P-450MP-2是非常相似的蛋白质。体外翻译肝脏RNA得到的多肽与P-450MP-1或P-450MP-2的迁移位置不同，具体取决于每个样品中存在的P-450形式，这表明这两种P-450是由不同的mRNA翻译而来的。当与 NADPH-细胞色素 P-450 还原酶和 L-α-二月桂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱重组时，P-450MP-1 和 P-450MP-2 对美芬妥英 4-羟基化的周转数明显高于微粒体中的 P-450。向重组体系中添加纯化的鼠或人细胞色素 b5 可显著提高羟基化活性；当细胞色素 b5 与 P-450 的摩尔比为 3 倍时，羟基化活性达到最大值。兔抗人细胞色素 b5 抗体可抑制人肝微粒体中的 NADH-细胞色素 c 还原酶和 S-美芬妥英 4-羟化酶活性。在细胞色素b5存在的情况下，S-美芬妥英与所有五种纯化的细胞色素P-450制剂的Km值均为1.25 mM，Vmax值为每分钟每nmol P-450生成的4-羟基产物0.8-1.25 nmol。P-450MP是一种相对选择性的P-450，能够很好地代谢取代的乙内酰脲类化合物。在人肝微粒体中，由纯化的P-450MP-1和P-450MP-2制剂催化并被抗P-450MP抑制的反应包括S-美芬妥英4-羟基化、S-尼尔瓦诺4-羟基化、S-美芬妥英N-去甲基化和二苯乙内酰脲4-羟基化。因此，至少有两种非常相似的人类 P-450 参与 S-美芬妥英 4-羟基化，这种活性表现出遗传多态性。[1] (S)-美芬妥英主要通过CYP2C19酶代谢为(S)-4′-羟基美芬妥英。该4-羟基化反应在人肝微粒体(HLM)中的速率反映了个体CYP2C19酶的活性。它是CYP2C19表型分析的优选探针底物，可用于区分快代谢者(EM)和慢代谢者(PM)。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
本研究评估了人CYP2C亚家族成员在(S)-美芬妥英4'-羟基化中的作用。当使用酵母cDNA表达系统表达重组CYP2C蛋白时，2C19能够立体特异性地4'-羟基化(S)-美芬妥英，其周转数至少比人肝微粒体高10倍。2C9（Ile359和Leu359等位基因）和2C18（Thr385和Met385等位基因）代谢该底物的速率比2C19低100倍，并且这些2C蛋白的代谢对S-对映体没有立体特异性。2C8几乎没有美芬妥英4'-羟化酶活性。相比之下，2C9 的 Ile359 等位基因对甲苯磺丁脲的羟基化具有较高的周转数，而 Leu359 等位基因对该底物的活性较低。对 16 例人肝脏供体样本的免疫印迹分析表明，(S)-美芬妥英 4'-羟化酶活性与肝脏 CYP2C19 含量相关，但与肝脏 CYP2C9 含量无关。此外，对其中 6 例人肝脏中 2C9 mRNA 的聚合酶链式反应 (PCR) 产物进行直接测序，测序区域涵盖已知的等位基因变异，结果表明 2C9 的等位基因类型（Cys144 与 Arg、Tyr358 与 Cys、Ile359 与 Leu 或 Gly417 与 Asp）似乎并不影响这些样本中 (S)-美芬妥英 4'-羟化酶的活性。这些数据表明，2C19 是人类肝脏中 (S)-美芬妥英 4'-羟化酶活性的主要决定因素[2]。
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| 酶活实验 |
标准的CYP2C19酶活性测定采用人肝微粒体或重组CYP2C19超微粒体。测定体系包含微粒体、(S)-美芬妥英（通常为50-200 uM）、NADPH和缓冲液。反应在37℃下孵育30分钟。(S)-4′-羟基美芬妥英的生成量通过高效液相色谱(HPLC)或液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)进行定量。抑制实验使用噻氯匹定等特异性CYP2C19抑制剂作为对照。
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| 细胞实验 |
由于主要检测指标是直接酶活性，因此未使用特定的基于细胞的检测方法。然而，人肝细胞培养物可用于构建更符合生理条件的模型。将肝细胞与(S)-美芬妥英孵育，收集培养基，并通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析4-羟基美芬妥英代谢物，以评估细胞CYP2C19活性。
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| 动物实验 |
体内药代动力学研究包括对健康志愿者进行给药。(S)-美芬妥英用作探针药物；测定其血浆清除率和4′-羟基美芬妥英代谢物的尿排泄量。计算代谢比率 (MR) 以确定 CYP2C19 表型。由于 CYP2C19 的基因多态性，快代谢者 (EM) 的 MR 值较高，慢代谢者 (PM) 的 MR 值较低。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
代谢/代谢物
S-甲芬妥因的已知代谢物包括尼瓦诺和4'-羟基甲芬妥因。 (S)-美芬妥英的代谢取决于CYP2C19基因型。在快代谢型个体中，口服清除率高，半衰期短。在慢代谢型个体中，清除率显著降低，半衰期延长。它主要以4-羟基美芬妥英葡萄糖醛酸苷的形式经尿液排出。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
(S)-美芬妥英是一种抗惊厥药，已知不良反应包括嗜睡、共济失调和胃肠道紊乱。由于存在血液系统疾病的风险，其使用受到限制。作为研究性试验，应遵循药品处理的标准预防措施。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
(S)-甲芬妥因是一种咪唑烷-2,4-二酮。
(S)-美芬妥英是消旋抗惊厥药美芬妥英的光学活性S-对映异构体。它是CYP2C19表型分析的首选探针底物，并在全球范围内用于对患者进行CYP2C19多态性基因分型，这对于经该酶代谢的药物的个体化治疗具有重要意义。目前，它尚未获准作为单一对映异构体药物用于临床。 |
| 分子式 |
C12H14N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
218.25176
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| 精确质量 |
218.10552
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| CAS号 |
70989-04-7
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| 相关CAS号 |
(R)-Mephenytoin;71140-51-7;Mephenytoin;50-12-4
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| PubChem CID |
107921
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
135-138ºC
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| 折射率 |
1.541
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| LogP |
1.5
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| tPSA |
49.4Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
16
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| 分子复杂度/Complexity |
310
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC[C@@]1(C(N(C(N1)=O)C)=O)C2=CC=CC=C2
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| InChi Key |
GMHKMTDVRCWUDX-LBPRGKRZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H14N2O2/c1-3-12(9-7-5-4-6-8-9)10(15)14(2)11(16)13-12/h4-8H,3H2,1-2H3,(H,13,16)/t12-/m0/s1
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| 化学名 |
(5S)-5-ethyl-3-methyl-5-phenylimidazolidine-2,4-dione
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| 别名 |
(S)-Mephenytoin; 70989-04-7; S-Mephenytoin; (S)-(+)-Mephenytoin; (5s)-5-ethyl-3-methyl-5-phenylimidazolidine-2,4-dione; Mephenytoin, (+)-; Mephenytoin, D-; (+)-Mephenytoin;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 66.67 mg/mL (305.48 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 6 mg/mL (27.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 60.0 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 6 mg/mL (27.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 60.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 6 mg/mL (27.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.5819 mL | 22.9095 mL | 45.8190 mL | |
| 5 mM | 0.9164 mL | 4.5819 mL | 9.1638 mL | |
| 10 mM | 0.4582 mL | 2.2910 mL | 4.5819 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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