CFTR/cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
(R)-Olacaftor specifically targets the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) protein. As a CFTR modulator, it is designed to bind to the defective CFTR protein and modify its function. In the context of CF research, (R)-Olacaftor is used as a tool to study the correction or potentiation of CFTR activity..

提供的搜索结果中并未详细列出(R)-Olacaftor的具体体外活性数据，例如EC50或IC50值。然而，它被归类为CFTR调节剂，在囊性纤维化（CF）研究中具有良好的应用前景，表明其有望对CFTR蛋白产生生物活性，可能作为一种校正剂改善其加工和转运，或作为一种增强剂增强其通道功能。

下一代矫正剂 Olacaftor (VX-440) 在一项 2 期试验中进行了评估。该试验为随机、双盲、安慰剂和活性对照研究，旨在评估 VX-440 与 tezacaftor 和 ivacaftor 三联疗法在携带 F508del 突变杂合子和 MF CFTR 突变（不太可能对 tezacaftor 和/或 ivacaftor 治疗产生反应）的 CF 患者（F508del-MF）或携带 F508del 突变纯合子的 CF 患者中的安全性和耐受性（ClinicalTrials.gov 标识符：NCT02951195）[https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7088950/]。

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所提供的搜索结果中未提供 (R)-Olacaftor 的具体体内活性数据。其母体化合物 Olacaftor（作为联合疗法的一部分）已在临床前研究中进行过评估。鉴于 (R)-Olacaftor 是 R-对映体，其体内疗效的评估方法与其他 CFTR 调节剂类似：通过测量囊性纤维化动物模型（例如表达人 F508del-CFTR 突变的 CFTR 基因敲除小鼠）中 CFTR 依赖性氯离子转运的改善情况。

搜索结果中未找到针对 (R)-Olacaftor 的特定无细胞酶/受体结合实验方案。作为一种 CFTR 调节剂，其活性通常通过基于细胞的检测方法来评估，这些方法可以测量 CFTR 蛋白的加工和氯离子通道的功能。对于分离系统，研究人员可以使用放射性标记的 CFTR 调节剂和重组到脂质体中的纯化 CFTR 蛋白进行结合实验，但这是一种高度专业化且具有挑战性的方案。因此，评估该化合物的标准方法是通过细胞实验。

评估 CFTR 调节剂（如 (R)-Olacaftor）的标准体外细胞检测方法是使用稳定转染了人 F508del-CFTR 突变（囊性纤维化最常见的致病基因）的 Fischer 大鼠甲状腺 (FRT) 细胞或原代人支气管上皮 (HBE) 细胞。将细胞接种于 96 孔板中，使其贴壁。然后，用不同浓度的化合物（0.001 uM 至 10 uM）处理细胞 24-48 小时。孵育后，使用基于荧光的酶标仪，通过卤化物敏感的黄色荧光蛋白 (HS-YFP) 猝灭法检测 CFTR 功能。将细胞暴露于碘化物梯度中，并记录荧光衰减速率。根据剂量反应曲线计算 EC50 值。

(R)-Olacaftor 的体内研究方案可能与其他 CFTR 调节剂类似。该方案将采用相关的动物模型，例如 F508del-CFTR 大鼠或表达人 F508del-CFTR 的 CFTR 基因敲除小鼠。化合物将通过灌胃给药，剂量范围为 1-30 mg/kg，通常每日一次，持续 14-28 天。疗效评估将采用 Ussing 室技术（短路电流法）测量肠道中 CFTR 依赖性氯离子分泌。次要终点包括体重增加、生存率的改善，以及对肺和肠道组织进行组织学分析以评估疾病病理的减轻情况。

(R)-奥拉卡托的详细药代动力学 (PK) 数据尚未提供。然而，其母体化合物奥拉卡托是一种口服小分子药物。出于研究目的，(R)-奥拉卡托（分子量 539.66）溶于二甲基亚砜 (DMSO) 中，用于体外实验（100 mg/mL），也可配制成溶剂用于体内研究，例如使用 10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45% 生理盐水。预计该药物将从胃肠道吸收，并在肝脏代谢，可能通过细胞色素 P450 酶（例如 CYP3A4）进行代谢。其终末半衰期取决于代谢速率。

目前尚无(R)-奥拉卡托的具体毒理学数据。CFTR调节剂的标准安全性筛选包括体外MTT试验（针对原代人肝细胞）以评估其总体细胞毒性，以及hERG（人醚-a-go-go相关基因）通道抑制试验以评估其引起心律失常（QT间期延长）的风险。此外，还需进行CYP450（细胞色素P450）抑制试验以评估潜在的药物相互作用。体内方面，需要进行为期14天的大鼠重复给药口服毒性研究，以确定最大耐受剂量（MTD）并识别任何靶器官毒性。

[1]. Modulators of Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator. Patent US20160095858A1.

背景：囊性纤维化（CF）是一种常见的遗传性疾病，会缩短患者的寿命，其病因是囊性纤维化跨膜转运调节因子（CFTR）蛋白的突变。II类CFTR突变F508del是最常见的致病突变（高达90%的CF患者携带该突变）。F508del突变导致CFTR蛋白功能丧失——缺陷蛋白在到达细胞膜之前就被降解，而细胞膜是CFTR蛋白进行跨上皮盐转运所必需的部位。矫正疗法为许多CF患者带来了希望。本综述评估了单一矫正药物（单药疗法）以及矫正药物（最常用的是lumacaftor、tezacaftor、elexacaftor、VX-659、olacaftor (VX-440)或VX-152）与增强剂（例如ivacaftor）的联合疗法（双联疗法和三联疗法）。
目的：评估CFTR矫正剂（联合或不联合增强剂）对携带II类CFTR突变（最常见的是F508del）的任何年龄囊性纤维化患者（pwCF）的临床获益和危害。
检索方法：我们检索了Cochrane囊性纤维化试验注册库（2022年11月28日）、相关文章的参考文献列表以及在线试验注册库（2022年12月3日）。
纳入标准：比较携带II类CFTR突变的囊性纤维化患者使用CFTR矫正剂与对照组的随机对照试验（RCT）（平行设计）。
数据收集与分析：两位作者独立提取数据，评估偏倚风险，并确定证据确定程度（GRADE）；我们联系了研究人员以获取更多数据。
主要结果：我们纳入了 34 项 RCT（4781 名参与者），持续时间从 1 天到 48 周不等；lumacaftor-ivacaftor 研究的两项扩展提供了额外的 96 周安全性数据（1029 名参与者）。我们评估了 8 项单药治疗 RCT（344 名参与者）（4PBA、CPX、lumacaftor、cavsonstat 和 FDL169）、16 项双药 RCT（2627 名参与者）（lumacaftor-ivacaftor 或 tezacaftor-ivacaftor）和 11 项三药 RCT（1804 名参与者）（elexacaftor-tezacaftor-ivacaftor/deutivacaftor；VX-659-tezacaftor-ivacaftor/deutivacaftor；Olaftor (VX-440)-tezacaftor-ivacaftor；VX-152-tezacaftor-ivacaftor）。在21项随机对照试验（RCT）的参与者中，7项试验的参与者携带F508del/F508del基因型，7项试验的参与者携带F508del/最小功能（MF）基因型，1项试验的参与者携带F508del/门控基因型，1项试验的参与者携带F508del/F508del或F508del/残余功能基因型，1项试验的参与者携带F508del/门控基因型或F508del/残余功能基因型，3项试验的参与者携带F508del/F508del或F508del/MF基因型。不同比较组的偏倚风险评估方法各不相同。由于年龄限制（例如，仅限成人）或非标准设计（例如，从单药治疗转为联合治疗），16项RCT的结果可能不适用于所有囊性纤维化患者。单药治疗研究中未观察到死亡或具有临床意义的生活质量 (QoL) 改善。目前尚无充分证据确定其对肺功能的影响。无安慰剂对照的单药治疗随机对照试验 (RCT) 显示，轻度、中度或重度不良事件 (AE) 的发生率存在差异；由于不良事件种类繁多且受试者人数较少（均为 F508del/F508del 突变体），这些事件的临床意义难以评估。在双药治疗方面，tezacaftor-ivacaftor 组发生 1 例死亡（被认为与研究药物无关）。在所有时间点，lumacaftor-ivacaftor 组和 tezacaftor-ivacaftor 组的生活质量评分（呼吸领域）均优于安慰剂组（中等确定性证据）。6 个月时，所有双药治疗组的预测一秒用力呼气容积 (FEV1) 百分比均较安慰剂组有所改善（高至中等确定性证据）。服用lumacaftor-ivacaftor后，更多囊性纤维化患者报告出现早期短暂性呼吸困难（比值比 (OR) 2.05，99% 置信区间 (CI) 1.10 至 3.83；I² = 0%；2 项研究，739 名参与者；高质量证据）。在 120 周（初始研究期和随访期）内，每日两次服用 400 mg lumacaftor-ivacaftor 的患者（80 名参与者）收缩压升高 5.1 mmHg，舒张压升高 4.1 mmHg。在 tezacaftor-ivacaftor 的随机对照试验中未报告这些不良事件。与安慰剂相比，接受伊伐卡托联合其他疗法治疗的囊性纤维化患者急性肺部加重发生率较低（所有证据均为中等确定性）：卢马卡托 600 mg（风险比 (HR) 0.70，95% 置信区间 0.57 至 0.87；I² = 0%；2 项研究，739 名参与者）；卢马卡托 400 mg（HR 0.61，95% 置信区间 0.49 至 0.76；I² = 0%；2 项研究，740 名参与者）；以及特扎卡托（HR 0.64，95% 置信区间 0.46 至 0.89；1 项研究，506 名参与者）。三联疗法：研究中未报告死亡病例（高确定性证据）。所有其他证据的确定性均为低至中等。与对照组相比，三联疗法组患者在六个月时呼吸功能评分可能有所改善，从而提升生活质量（6项研究）。三联疗法可能导致FEV1占预计值的百分比出现更大的相对和绝对变化（所有组合共4项研究）。对于接受elexacaftor-tezacaftor-ivacaftor治疗的F508del/MF患者，FEV1占预计值的百分比绝对变化可能大于安慰剂组（平均差异14.30，95% CI 12.76至15.84；1项研究，403名参与者；中等确凿证据），其他药物组合和基因型也观察到类似结果。三联疗法组和对照组的不良事件发生率差异很小（10项研究）。没有研究报告下一次急性肺部加重发生的时间，但在接受 elexacaftor-tezacaftor-ivacaftor 治疗的 F508del/F508del 患者中，4 周时急性肺部加重的发生率较低（OR 0.17，99% CI 0.06 至 0.45；1 项研究，175 名参与者），24 周时急性肺部加重的发生率也较低（OR 0.29，95% CI 0.14 至 0.60；1 项研究，405 名参与者）；其他三联疗法和基因型组合也观察到了类似的结果。
作者结论：尚无充分证据表明，对于 F508del/F508del 囊性纤维化患者，使用矫正药物进行单药治疗具有临床意义。本综述中的其他数据降低了双联疗法疗效的证据；这些药物不再被视为标准治疗方案。在特殊情况下（例如，无法耐受三联疗法或因年龄原因），使用这些药物可能合适。两种双联疗法（lumacaftor-ivacaftor 和 tezacaftor-ivacaftor）均能轻微改善生活质量和呼吸功能，并降低急性肺部加重的发生率。虽然在生活质量和 FEV1 方面的疗效仍优于双联疗法，但低于我们之前的研究结果。Lumacaftor-ivacaftor 与早期短暂性呼吸困难和长期高血压相关（tezacaftor-ivacaftor 未观察到此现象）。Tezacaftor-ivacaftor 的安全性更好，但缺乏 12 岁以下儿童的数据。在 12 岁以下儿童中，lumacaftor-ivacaftor 显著改善了呼吸功能，且未出现明显的短期安全性问题；然而，在考虑使用lumacaftor-ivacaftor时，应权衡长期成人数据中观察到的高血压和呼吸困难。三联疗法试验数据显示，包括FEV1和生活质量在内的几个关键终点均有所改善。对于携带一个或两个F508del变异的12岁及以上囊性纤维化患者（pwCF），三联疗法（elexacaftor-tezacaftor-ivacaftor/deutivacaftor；VX-659-tezacaftor-ivacaftor/deutivacaftor；Olaftor (VX-440)-tezacaftor-ivacaftor；VX-152-tezacaftor-ivacaftor）的不良事件发生率可能差异不大或无差异（中等确定性证据）。需要对12岁以下儿童和肺部疾病更严重的患者进行进一步的随机对照试验。参考文献：Cochrane Database Syst Rev. 2023年11月20日;11(11):CD010966. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37983082/

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(R)-奥拉卡托 ((R)-VX-440) 是一种研究级化合物，尚未获准用于临床。它是奥拉卡托的对映异构体，奥拉卡托是一种CFTR调节剂，已在临床试验中用于治疗囊性纤维化。该化合物是研究人员研究CFTR调节剂立体特异性药理学以及了解药物与其靶点之间精确分子相互作用的重要工具。它通常储存在-20℃，可溶于DMSO。

C29H34FN3O4S

539.661369800568

539.225

C, 64.54; H, 6.35; F, 3.52; N, 7.79; O, 11.86; S, 5.94

1899111-41-1

Olacaftor;1897384-89-2

130203218

White to light yellow solid powder

6.3

97

1

7

8

38

902

1

S(C1C=CC=CC=1)(NC(C1=CC=C(C2C=C(C=C(C=2)OCC(C)C)F)N=C1N1C[C@H](C)CC1(C)C)=O)(=O)=O

NHOUNZMCSIHKHJ-HXUWFJFHSA-N

InChI=1S/C29H34FN3O4S/c1-19(2)18-37-23-14-21(13-22(30)15-23)26-12-11-25(27(31-26)33-17-20(3)16-29(33,4)5)28(34)32-38(35,36)24-9-7-6-8-10-24/h6-15,19-20H,16-18H2,1-5H3,(H,32,34)/t20-/m1/s1

N-(benzenesulfonyl)-6-[3-fluoro-5-(2-methylpropoxy)phenyl]-2-[(4R)-2,2,4-trimethylpyrrolidin-1-yl]pyridine-3-carboxamide

(R)-Olacaftor; 1899111-41-1; SCHEMBL19097503; (R)-VX-440;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: 250 mg/mL (463.25 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。