| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
γ-Glutamylcysteine synthetase (γ-GCS) / Glutamate-cysteine ligase (GCL) - catalytic subunit (GCLC). IC50 (cell-free enzymatic assay) = 570 nM (95% CI: 429-757 nM). [1][3]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 ZAZ 和 M14 黑色素瘤细胞系中，用 L-丁硫氨酸-(S,R)-suLfoximine (BSO：50 μM) 处理 48 小时，导致 GSH 水平降低 95%，GST 酶活性降低 60%。在这两种细胞系中，GST-π 蛋白和 mRNA 的量均显着减少 [1]。通过不可逆地阻断 g-谷氨酰半胱氨酸合酶（合成糖肽 (GSH) 的谷胱甘肽必需酶），L-丁硫氨酸-(S,R)-磺酰亚胺 (BSO) 会产生细胞氧化应激[2]。在癌细胞中，L-丁硫氨酸-(S,R)-suLfoximine (BSO) 会导致铁死亡[3]。
- 在无细胞酶活性实验中，BSO抑制GCL活性，IC50为570 nM（95% CI: 429-757 nM）。[3] - 在SH-SY5Y细胞中，BSO（0-500 μM）在250 μM浓度下通过MTT法显示80-85%的细胞活力，Annexin-V/PI染色显示100和250 μM处理48小时无显著凋亡增加。[1] - 在ZAZ和M14黑色素瘤细胞系中，BSO（50 μM，96小时）使GSH水平降低约95%。在较低浓度（1-3 μM）下，GSH耗竭不完全，在24-72小时之间有部分恢复。[1] - 在ZAZ和M14细胞中，BSO（50 μM，48-96小时）使GST酶活性降低约2-3倍。Western blot分析显示GST-μ蛋白水平降低，而GST-π表达不受影响。Northern blot分析证实GST-μ mRNA水平降低。[1] - BSO（50 μM，48-96小时）降低ZAZ和M14细胞的DNA合成（³H-TdR掺入）。在ZAZ细胞中观察到细胞毒性效应（96小时细胞计数减少60%），而M14细胞显示细胞静止效应（48-72小时细胞数稳定，96小时增加2倍）。[1] - 在PANC-1胰腺癌细胞中，BSO（100 μM，24小时）降低总谷胱甘肽水平并诱导脂质过氧化。其降低细胞活力的效应被ferrostatin-1、GSHee和NAC减弱，被FAC增强。[3] - 在SW48结肠癌细胞中，BSO诱导的活力降低被NAC减弱但不受ferrostatin-1影响，表明存在铁死亡非依赖性机制。[3] - 在一组癌细胞系中，BSO显示出不同的敏感性。敏感细胞系包括G402（肾，-5.73）、PANC-1（胰腺，-5.33）、RCC4 VHL-/-（肾，-4.777）、786-O（肾，-4.10）、A-498（肾，-4.09）、A2780 CDDP（卵巢，-4.05）和SW48（结肠，-4.04）。耐药细胞系包括HCT-15、SW620、COLO 205、LS 174T、HCT-116、RKO、HT-29、SW480、ACHN和DU 145。[3] - BSO敏感细胞的基础总谷胱甘肽水平低于不敏感细胞（P=0.08）。GCLC蛋白水平与谷胱甘肽水平正相关（r²=0.814，P=0.04），而GSS蛋白水平无相关性（r²=0.021，P=0.82）。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
BSO 增加了发育中小鼠 DNA 缺失的频率。与未治疗的小鼠相比，BSO 治疗在 2 mM 和 20 mM BSO 剂量下，小鼠胎儿的 GSH 水平分别降低了 55% 和 70%。与 BSO 抑制 GSH 合成所必需的 g-GCS 酶的能力一致，用 2 mM BSO 和 20 mM NAC 共同处理可将 GSH 降低至与 2 mM BSO 相当的水平。 BSO 治疗后，半胱氨酸水平下降，与 GSH 类似[2]。
在C57BL/6J pᵘⁿ/pᵘⁿ小鼠中，通过饮水给予BSO（2 mM或20 mM）从交配后0.5天至18.5天，导致70 kb DNA缺失频率呈剂量依赖性增加。2 mM BSO使眼斑增加约30%（7.79 ± 0.45 vs. 对照5.36 ± 0.29，P<0.001），20 mM BSO使眼斑增加约40%（8.78 ± 0.61 vs. 5.36 ± 0.29，P<0.001）。与20 mM NAC联合治疗使缺失频率恢复正常（6.18 ± 0.47 vs. 7.79 ± 0.45，P=0.016）。[2] - 在同一小鼠模型中，BSO治疗（2 mM和20 mM）使胎儿GSH浓度分别降低55%（P<0.01）和70%（P<0.001），半胱氨酸浓度分别降低27%（P<0.05）和55%（P<0.01）。NAC联合治疗恢复了半胱氨酸水平但未恢复GSH水平。[2] - 在异种移植瘤研究中，BSO治疗延长了黑色素瘤小鼠的生存期。[1] - 在一项I期临床试验中，连续输注BSO达到超过500 μM的稳态血清浓度，并将肿瘤谷胱甘肽耗竭至基线水平的10%以下。一名转移性恶性黑色素瘤患者在接受连续输注BSO联合推注美法仑治疗后获得完全缓解。[1] |
| 酶活实验 |
无细胞GCL酶活性实验： 在大肠杆菌中表达N端His标签人GCLM和C端His标签人GCLC，通过Ni-NTA亲和层析和Superdex 200凝胶过滤纯化。BSO（0.1、1、10、100 μM）与酶（各10 nM）预混30分钟，然后加入200 μM ATP、1.2 mM谷氨酸和200 μM半胱氨酸。反应60分钟后，用1%甲酸终止，使用RapidFire300质谱仪和API4000三重四极杆质谱仪测量ATP和γ-谷氨酰半胱氨酸水平。使用XLfit或GraphPad Prism计算IC50。[3]
- GST酶活性实验： 使用1-氯-2,4-二硝基苯和GSH作为底物，按照Habig等人的方法测定细胞上清液中的谷胱甘肽S-转移酶活性。通过分光光度法测量活性。[1] - 谷胱甘肽还原酶实验： 通过分光光度法监测NADPH氧化速率来测定活性。[1] - 谷胱甘肽过氧化物酶实验： 使用Paglia和Valentine的方法，以H₂O₂为底物测量活性。[1] |
| 细胞实验 |
琼脂基础胸腺嘧啶核苷掺入实验： 将肿瘤细胞悬浮在软琼脂中，以每孔20,000个细胞接种在24孔板中，在有或无BSO的情况下培养5天。对于联合用药实验，细胞在BSO中预孵育24小时。在最后48小时用³H-胸腺嘧啶核苷脉冲。将板加热至90°C液化琼脂，将细胞收集到玻璃纤维滤膜上，计数放射性。增殖分数 = 处理组CPM/对照组CPM。[1]
- 细胞活力实验（CellTiter-Glo）： 细胞以每孔1,000-3,000个细胞接种在96孔板中。24小时后加入BSO、GSHee、ferrostatin-1、NAC、顺铂或FAC。3天后使用CellTiter-Glo发光法细胞活力检测试剂盒评估细胞活力。[3] - 总谷胱甘肽测量： 使用GSH/GSSG-Glo检测试剂盒在BSO处理24小时后测定细胞内总谷胱甘肽水平。[3] - 脂质过氧化测量： PANC-1细胞（1 × 10⁶）接种在10 cm培养皿中，用BSO处理24小时，然后与5 μM BODIPY 581/591 C11脂质过氧化传感器孵育30分钟。洗涤后，通过流式细胞术评估脂质过氧化。[3] - GSH测定（改良Tietze法）： 细胞在0.01 M NaPO₄ + 0.005 M EDTA缓冲液（pH 7.5）中冻融三次，在30,000g、4°C离心30分钟。通过测量412 nm处光密度变化率（25°C）测定GSH水平。[1] - Western blotting： 细胞在SDS样品缓冲液中裂解，95°C加热5分钟。蛋白质（3 μg）通过SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，封闭，与一抗（抗-GCLC、抗-GSS、抗-Hsp90）在4°C孵育过夜，然后与HRP标记的二抗孵育。使用LAS-3000检测化学发光。[3] - Northern blotting： 总RNA（50 μg）在琼脂糖-甲醛凝胶上电泳，转移至硝酸纤维素膜，与³²P随机引物标记的GST-μ和GST-π cDNA探针在65°C杂交。[1] - 免疫组织化学： 石蜡包埋组织切片脱蜡，与3% H₂O₂孵育，封闭，与抗GST-π单克隆抗体（1:10）孵育60分钟，然后与LINK和LABEL试剂孵育，DAB显色，苏木精复染。通过光学显微镜确定染色细胞百分比和强度。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57BL/6J pun/pun 小鼠[2]。
剂量： 2mM L-丁硫氨酸-(S,R)-亚砜亚胺 (BSO)、20mM BSO、2mMBSO 和 20mM NAC、20mM NAC 或未添加任何物质的水，从感染后 0.5 天到 18.5 天，持续 18 天。添加药物的水的 pH 值如下：6.88（20mM BSO）；3.37（2mMBSO）；2.65（2mMBSO 加 20mM NAC）；2.58（20mM NAC）。我们实验室使用的普通水的 pH 值约为 4。 给药途径： 饮用水。 实验结果： 未经处理的对照组、2 mM L-丁硫氨酸-(S,R)-亚砜亚胺 (BSO) 处理组和 20 mM BSO 处理组小鼠的平均眼点数（平均值±标准误）分别为 5.36±0.29 (n=46)、7.79±0.45 (n=34) 和 8.78±0.61 (n=32)。与未经处理的小鼠相比，2 mM BSO 处理组的眼点数增加了约 30%，而 20 mM BSO 处理组的眼点数增加了约 40%。 饮水中口服给药（小鼠妊娠研究）： 将妊娠C57BL/6J pᵘⁿ/pᵘⁿ小鼠自由饮用补充有BSO（2 mM或20 mM）的水，单独或与20 mM NAC联合，从交配后0.5天至18.5天。2 mM BSO的每日BSO摄入量约为0.1 g/kg（0.45 mM/kg），20 mM BSO约为1 g/kg（4.5 mM/kg）。后代在20日龄时处死用于眼斑分析，或在妊娠17.5天分离胎儿用于巯基测定。[2] - 小鼠腹腔注射给药： C57BL/6J小鼠腹腔注射BSO（300 mg/kg），每日一次，连续7天，或在D-甘露醇（2.0 M）预处理后进行。[1] - 小鼠静脉注射给药： C57BL/6J或BALB/cByJ小鼠通过尾静脉静脉注射BSO，剂量相当于化合物1的75、115、150、300 mg/kg，每日一次，连续3或7天。[1] - 异种移植瘤研究： 黑色素瘤荷瘤小鼠接受BSO单独或与其他药物联合治疗。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在I期临床试验中，连续输注BSO达到超过500 μM的稳态血清浓度。[1]
- 连续输注BSO将肿瘤谷胱甘肽耗竭至基线水平的10%以下。[1] - 体外IC90时的BSO曲线下面积为3,060 μM × hr，而体内为42,192 μM × hr（体内比体外高13.8倍）。[1] - BSO在培养基中5天孵育期间保持稳定。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在I期临床试验中，BSO通过静脉推注和连续输注给药耐受性良好。[1]
- 在妊娠大鼠中，整个妊娠期通过饮水给予2-6 mM/kg/天的BSO可降低GSH水平，但对后代无致畸效应。[2] - 在小鼠胎儿中，BSO处理（饮水中2 mM和20 mM）导致显著的GSH和半胱氨酸耗竭，但与NAC联合治疗可预防DNA缺失而不恢复GSH水平。[2] - 在正常小鼠中，BSO处理后肝脏切片的组织病理学分析与对照组相比未见明显变化。血清肌酐和肝酶水平保持在正常范围内。[1] - 对新生大鼠给予BSO会导致多器官衰竭和死亡。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
BSO通过L-丁硫氨酸-S-亚磺酰亚胺异构体与活性位点的共价连接，不可逆地抑制γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶，从而选择性抑制GSH合成。[1][2]
- 黑色素瘤细胞对BSO具有独特的敏感性，因为它们依赖GSH来清除黑色素合成过程中产生的反应性邻醌和过氧化物。黑色素瘤标本的BSO敏感性与黑色素含量相关（r=0.63）。[1] - BSO协同增强BCNU对黑色素瘤细胞系和新鲜人黑色素瘤标本的细胞毒性。组合指数在1 μM BSO时为0.7，在3 μM BSO时为0.57。这种协同作用可能部分归因于BSO介导的GST-μ表达下调。[1] - BSO处理导致GST酶活性降低和GST-μ（而非GST-π）在蛋白质和mRNA水平上的选择性下调。[1] - BSO在某些癌细胞（如PANC-1）中诱导铁死亡，其特征为铁依赖性脂质过氧化和被ferrostatin-1减弱。然而，在其他细胞（如SW48）中，BSO诱导的细胞死亡似乎是铁死亡非依赖性的。[3] - GST-π阳性的黑色素瘤标本对BSO的耐药性比GST-π阴性标本高约2倍（P<0.001），对BSO-BCNU联合用药的耐药性高约2.5倍（P<0.02）。[1] - 在结直肠癌患者样本中，约15%（44/284）的肿瘤表现出比匹配正常组织更低的谷胱甘肽水平，表明存在可能从GCL抑制剂治疗中获益的潜在患者人群。[3] |
| 分子式 |
C8H19CLN2O3S
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|---|---|
| 精确质量 |
258.0804913
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| 相关CAS号 |
DL-Buthionine-(S,R)-sulfoximine;5072-26-4;L-Buthionine-(S,R)-sulfoximine;83730-53-4;DL-Buthionine-(S,R)-sulfoximine hydrochloride
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| PubChem CID |
145710356
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
113 Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
284
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| InChi Key |
FMWPIVFRJOQKNQ-QNURJZHJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C8H18N2O3S.ClH/c1-2-3-5-14(10,13)6-4-7(9)8(11)12;/h7,10H,2-6,9H2,1H3,(H,11,12);1H/t7-,14?;/m0./s1
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| 化学名 |
(2S)-2-amino-4-(butylsulfonimidoyl)butanoic acid;hydrochloride
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| 别名 |
L-Buthionine-(S,R)-sulfoximine hydrochloride; L-Buthionine-(S,R)-sulfoximine (hydrochloride); L-BSO (hydrochloride);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~250 mg/mL (~966.11 mM)
H2O :~70 mg/mL (~270.51 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
(1R,3R)-RSL3
LIBX-A403
LIBX-A402
Diplacone
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463611831
