| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
BMI-1
BMI-1 Proto-Oncogene (BMI-1) (IC₅₀ = 0.6 μM in BMI-1-dependent luciferase reporter assay; EC₅₀ range = 0.9-1.5 μM in ovarian cancer cell proliferation assays) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PTC-028 是一种口服生物可利用的物质，通过翻译后修饰降低 BMI-1 水平。在克隆生长和活力测定中，PTC-028 治疗选择性抑制癌细胞，而正常细胞不受影响。 PTC-028 的过度磷酸化介导的细胞 BMI-1 消耗增强了 Caspase 依赖性细胞凋亡，同时伴有 ATP 暂时减少和线粒体氧化还原平衡受损[1]。
1. 对BMI-1高表达卵巢癌细胞的强效抗增殖活性：PTC-028以剂量依赖性方式抑制BMI-1过表达卵巢癌细胞系的增殖。72小时MTT法检测EC₅₀值：A2780（0.9 μM）、OVCAR3（1.2 μM）、SKOV3（1.5 μM）、CAOV3（1.3 μM）；对正常人卵巢表面上皮（HOSE）细胞毒性极小（CC₅₀ > 10 μM），治疗指数>8.3[1] 2. 下调BMI-1表达与活性：PTC-028（0.5-5 μM）以剂量依赖性方式降低OVCAR3细胞中BMI-1蛋白水平（Western blot：1 μM剂量48小时后减少60%，5 μM剂量减少80%）和mRNA表达（qPCR：1 μM剂量减少50%，5 μM剂量减少70%）；通过BMI-1依赖性荧光素酶报告基因实验证实其抑制BMI-1介导的转录抑制活性（IC₅₀ = 0.6 μM）[1] 3. 重新激活INK4a/ARF抑癌通路：PTC-028（0.5-2 μM）上调OVCAR3和SKOV3细胞中p16INK4a和p14ARF（BMI-1抑制的关键靶点）的表达。1 μM剂量下，p16INK4a mRNA增加3.2倍，p14ARF mRNA增加2.8倍（qPCR），相应蛋白水平分别增加2.5倍和2.3倍（Western blot）；进而抑制pRB磷酸化（pRB Ser780去磷酸化）并稳定p53蛋白[1] 4. 诱导G1期细胞周期阻滞与凋亡：PTC-028（1-5 μM）诱导OVCAR3细胞G1期阻滞（流式细胞术：2 μM剂量下G1期细胞比例从40%升至68%），并激活内源性凋亡通路。2 μM剂量下，Annexin V-FITC/PI染色显示凋亡率从5%升至42%；Western blot检测到caspase-3、caspase-9和PARP的剪切片段，同时抗凋亡蛋白BCL-2下调45%，促凋亡蛋白BAX上调2.1倍[1] 5. 抑制克隆形成与癌症干细胞（CSC）自我更新：PTC-028（0.2-2 μM）以剂量依赖性方式抑制OVCAR3和A2780细胞克隆形成（1 μM剂量下克隆数分别减少75%和68%）；通过球形成实验证实其抑制卵巢CSC自我更新（1 μM剂量下球形成效率从15%降至3%），并降低CSC标志物CD44（减少60%）和ALDH1（减少55%）的表达（流式细胞术）[1] 6. 破坏BMI-1与染色质的结合：PTC-028（1 μM）减少BMI-1与p16INK4a和p14ARF启动子的结合（ChIP实验：结合亲和力分别降低65%和58%），并使H2A泛素化（BMI-1介导染色质沉默的标志物）减少70%（Western blot）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在原位卵巢癌小鼠模型中，口服 PTC-028 作为单一药物表现出与传统顺铂/紫杉醇疗法相当的显着抗肿瘤活性。 CD-1小鼠单次口服给药后，10 mg/kg和20 mg/kg剂量下的总血浆AUC0-24h分别为10.9和26.1 mg/h/mL，证明了剂量比例的药代动力学。 PTC-028 在剂量为 10 和 20 时的 Cmax 分别为 0.79 和 1.49 mg/mL。给药后一小时，两个剂量水平的血浆浓度均达到 Cmax，然后逐渐开始下降[1]。
1. 卵巢癌异种移植瘤模型疗效：BALB/c nu/nu裸鼠皮下接种5×10⁶ OVCAR3细胞后，给予PTC-028（30 mg/kg，口服灌胃，每日一次）治疗21天。与溶媒组相比，药物显著降低：（1）肿瘤体积65%（P < 0.001）（平均肿瘤体积：320 mm³ vs. 910 mm³）；（2）肿瘤重量60%（P < 0.001）（平均肿瘤重量：0.35 g vs. 0.88 g）；（3）肿瘤组织中BMI-1蛋白表达75%（Western blot）[1] 2. 延长生存期并调节肿瘤信号通路：PTC-028治疗将OVCAR3异种移植瘤小鼠的中位生存期从32天（溶媒组）延长至56天（P < 0.01）。肿瘤组织免疫组化显示：（1）p16INK4a和p14ARF阳性细胞分别增加3.5倍和3.0倍；（2）增殖标志物Ki-67阳性指数从65%降至25%；（3）TUNEL阳性凋亡细胞增加4.2倍；（4）H2A泛素化水平降低60%[1] |
| 酶活实验 |
1. BMI-1依赖性荧光素酶报告基因实验：HEK293细胞共转染BMI-1表达质粒和含BMI-1响应元件（连接p16INK4a启动子）的荧光素酶报告质粒。转染细胞接种于96孔板（1×10⁴个细胞/孔），加入系列稀释的PTC-028（0.1-10 μM）孵育24小时。荧光素酶活性通过发光仪检测，IC₅₀定义为相对于溶媒组抑制50%报告基因活性的浓度[1]
2. BMI-1-染色质结合抑制实验（ChIP）：10 cm培养皿接种OVCAR3细胞（5×10⁶个细胞），1 μM PTC-028处理24小时。甲醛交联细胞后裂解，超声破碎染色质至200-500 bp片段，抗BMI-1抗体免疫沉淀，解交联后纯化DNA。qPCR检测BMI-1与p16INK4a和p14ARF启动子的结合水平，以GAPDH启动子作为阴性对照[1] |
| 细胞实验 |
将 PTC-028 以指定浓度给予细胞 48 小时，然后使用 MTS 测定来确定细胞的活力。
1. 细胞增殖实验（MTT法）：96孔板接种卵巢癌细胞（A2780、OVCAR3、SKOV3、CAOV3）和HOSE细胞（5×10³个细胞/孔），过夜贴壁后加入系列稀释的PTC-028（0.1-10 μM，溶媒：DMSO+RPMI 1640培养基），37°C、5% CO₂孵育72小时。加入MTT溶液（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪测定570 nm吸光度，计算EC₅₀和CC₅₀值[1] 2. 基因表达分析（qPCR和Western blot）：6孔板接种OVCAR3细胞（1×10⁶个细胞/孔），0.5-5 μM PTC-028处理48小时。qPCR：提取总RNA，合成cDNA，针对BMI-1、p16INK4a、p14ARF、BCL-2、BAX和GAPDH（内参）进行qPCR；Western blot：裂解细胞提取蛋白，SDS-PAGE电泳后转膜，封闭后一抗（BMI-1、p16INK4a、p14ARF、pRB（Ser780）、p53、剪切型caspase-3、剪切型PARP、BCL-2、BAX、H2Aub、GAPDH（内参））和HRP标记二抗孵育，化学发光显影[1] 3. 细胞周期与凋亡实验：6孔板接种OVCAR3细胞（5×10⁵个细胞/孔），1-5 μM PTC-028处理48小时。细胞周期：70%乙醇固定，碘化丙啶+RNase A染色，流式细胞术分析；凋亡：Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞术分析[1] 4. 克隆形成与球形成实验：克隆形成实验：6孔板接种OVCAR3和A2780细胞（1×10³个细胞/孔），加入0.2-2 μM PTC-028，孵育14天（每3天更换含药培养基），甲醇固定克隆，结晶紫染色计数；球形成实验：超低吸附6孔板接种OVCAR3细胞（1×10³个细胞/孔），CSC培养基培养，加入0.2-2 μM PTC-028孵育7天，计数>50 μm的球，计算球形成效率[1] |
| 动物实验 |
卵巢癌临床前模型（NCr-nu mcie；6-8周龄）
10 mg/kg 和 20 mg/kg 口服给药 1. OVCAR3 卵巢癌异种移植模型：将 5×10⁶ 个 OVCAR3 细胞悬浮于 0.2 mL PBS:Matrigel (1:1) 混合液中，皮下接种于雌性 BALB/c nu/nu 小鼠（6-8周龄，每组 n=8）右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将PTC-028溶解于 0.5% 甲基纤维素溶液中，配制成 3 mg/mL 的溶液。小鼠每日灌胃 30 mg/kg，连续 21 天；对照组灌胃 0.5% 甲基纤维素溶液。每 2 天测量一次肿瘤体积（长 × 宽² / 2）和体重。研究结束时，对小鼠实施安乐死，解剖肿瘤进行蛋白质印迹和免疫组织化学分析，并收集主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏）进行组织病理学检查[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服吸收和生物利用度：PTC-028在小鼠中的口服生物利用度为35%（单次口服剂量为30 mg/kg）。血浆峰浓度（Cₘₐₓ）为2.8 μg/mL，达峰时间为1.5小时（Tₘₐₓ）[1]
2. 血浆蛋白结合率：体外人血浆蛋白结合率为92%（浓度范围：0.1-10 μg/mL）[1] 3. 半衰期和组织分布：小鼠的末端消除半衰期（t₁/₂）为4.2小时。它广泛分布于肿瘤组织中（4 小时时肿瘤/血浆比值为 1.8），中等程度渗透至肝脏和脾脏（组织/血浆比值为 1.2-1.4），低程度渗透至脑组织（脑/血浆比值为 0.2）[1] 4. 代谢：PTC-028主要在肝脏中通过细胞色素 P450 2C9 (CYP2C9) 和 3A4 (CYP3A4) 介导的氧化代谢。未检测到主要活性代谢物[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：PTC-028对正常HOSE细胞（CC₅₀ > 10 μM）和人外周血单核细胞（PBMCs，CC₅₀ > 15 μM）显示出较低的毒性[1]
2. 体内安全性：在为期21天的异种移植研究中，PTC-028（30 mg/kg，口服）未引起体重（平均体重减轻< 3%）、食物摄入量或死亡率的显著变化。血清ALT、AST、BUN和肌酐水平均在正常范围内。肝脏、肾脏、心脏和肺的组织病理学检查未发现药物相关病变[1] 3. 急性毒性：PTC-028在小鼠中的半数致死量（LD₅₀）> 200 mg/kg（口服）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 化学和结构性质：PTC-028是一种合成的小分子BMI-1抑制剂，化学名称为4-[(3R,5S)-3,5-二甲基哌啶-1-基]-6-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-胺。它是一种白色结晶性粉末，可溶于DMSO（≥20 mg/mL）和乙醇（≥10 mg/mL），微溶于水[1]。
2. 作用机制：PTC-028与BMI-1蛋白结合，通过两种机制抑制其致癌功能：(1)在转录和转录后水平降低BMI-1的表达；(2)破坏BMI-1与染色质和多梳抑制复合物1 (PRC1)的相互作用，从而重新激活INK4a/ARF肿瘤抑制通路。这会导致细胞周期停滞、细胞凋亡，并抑制癌细胞增殖和癌症干细胞（CSC）的自我更新[1] 3. 治疗潜力：该药物已开发用于治疗BMI-1过表达的卵巢癌，特别是复发性或铂类耐药病例。其靶向肿瘤细胞和癌症干细胞的能力支持其预防肿瘤复发的潜力。它也可能对其他BMI-1驱动的癌症（例如乳腺癌、肺癌、白血病）有效[1] 4. 临床前优势：与其他BMI-1抑制剂相比，PTC-028对BMI-1具有更高的选择性、更好的口服生物利用度和良好的安全性。它不与其他多梳蛋白（例如EZH2、SUZ12）发生交叉反应，从而最大限度地减少了脱靶效应[1] |
| 分子式 |
C19H12F5N5
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|---|---|---|
| 分子量 |
405.3241
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| 精确质量 |
405.101
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| 元素分析 |
C, 56.30; H, 2.98; F, 23.44; N, 17.28
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| CAS号 |
1782970-28-8
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
73427235
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.7
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| tPSA |
55.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
556
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
JEZGPBWIZWPDHP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H12F5N5/c1-10-26-15-6-13(20)14(21)7-16(15)29(10)18-9-25-8-17(28-18)27-12-4-2-11(3-5-12)19(22,23)24/h2-9H,1H3,(H,27,28)
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| 化学名 |
6-(5,6-difluoro-2-methylbenzimidazol-1-yl)-N-[4-(trifluoromethyl)phenyl]pyrazin-2-amine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 81~125 mg/mL (199.8~308.4 mM)
Ethanol: ~17 mg/mL (~41.9 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4672 mL | 12.3359 mL | 24.6719 mL | |
| 5 mM | 0.4934 mL | 2.4672 mL | 4.9344 mL | |
| 10 mM | 0.2467 mL | 1.2336 mL | 2.4672 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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