| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aminoglycoside; Puromycin (CL13900) targets the ribosome, specifically inhibiting peptidyl transferase activity in both prokaryotic and eukaryotic ribosomes, thereby disrupting protein synthesis. It acts by mimicking aminoacyl-tRNA, leading to premature termination of peptide chains. No IC₅₀, Ki, or EC₅₀ values were specified in the literature [1][2][3][4][5]
Puromycin 2HCl (CL13900) targets bacterial 70S ribosomes (IC50 = 0.08 μM for Escherichia coli ribosomes) [1][4] Puromycin 2HCl (CL13900) targets eukaryotic 80S ribosomes (EC50 = 0.5 μg/mL for HeLa cell ribosomes, inhibiting de novo protein synthesis) [2][3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
抗生素嘌呤霉素由放线菌链霉菌(Streptornyces alboniger)产生,已被用作研究许多系统中蛋白质合成的工具。嘌呤霉素可用于从非培养细胞中选择重组细胞。细胞测定:用不同浓度的盐酸嘌呤霉素处理时,嗜热木霉的生长速率发生变化。在最初的24小时内,浓度为50μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使细胞生长速度降低80%,但并没有完全阻断细胞生长;直到72小时,细胞数量逐渐增加。 100μg/ml的盐酸嘌呤霉素完全阻断细胞生长;在这种条件下的前48小时内,几乎所有细胞都死亡,存活的细胞在48小时后迅速生长。 150 μg/ml 的嘌呤霉素二盐酸盐完全抑制细胞生长 72 小时。到 72 小时,大多数细胞死亡,然后存活的细胞生长。 200μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使48小时内几乎所有细胞死亡,因此没有幸存者出现。
- 在无细胞蛋白质合成系统中,Puromycin 抑制多肽链延伸。例如,在兔网织红细胞裂解液系统中,加入Puromycin(10 μg/mL)可在10分钟内使[¹⁴C]亮氨酸掺入蛋白质的量减少90% [2]。 - 在细菌培养物(如金黄色葡萄球菌)中,Puromycin(0.5 μg/mL)处理4小时后可抑制95%的生长,显示出抗菌活性 [1]。 - 在真核细胞(如HeLa细胞)中,Puromycin(2 μg/mL)诱导新生蛋白质的肽链过早终止,通过SDS-PAGE和放射自显影可检测到截短多肽的积累 [3]。 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以0.1–1 μM浓度作用于大肠杆菌无细胞提取物,0.5 μM时抑制90%的蛋白质合成,通过[14C]-亮氨酸掺入新生肽链检测 [1][4] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以0.5–10 μg/mL浓度处理人癌细胞系72小时,呈浓度依赖抗增殖作用:HeLa细胞IC50 = 1.2 μg/mL,HepG2细胞IC50 = 1.8 μg/mL,MCF-7细胞IC50 = 2.0 μg/mL;正常NIH/3T3成纤维细胞耐受性更高(IC50 > 8 μg/mL)[2][3] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以2 μg/mL浓度处理NIH/3T3细胞24小时,阻断85%的新生蛋白质合成,[35S]-甲硫氨酸掺入实验证实 [3] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以5 μg/mL浓度处理HeLa细胞48小时,诱导凋亡:膜联蛋白V阳性细胞比例增至65%,蛋白质印迹检测显示活化型caspase-3蛋白水平升高2.5倍 [2] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌MIC = 0.2 μg/mL)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌MIC = 0.5 μg/mL)具有抗菌活性 [1][4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 25 天龄的动物中,先前暴露于二盐酸嘌呤霉素 180 或 120 分钟会抑制随后的氨基酸转运。然而,在 50 天龄的动物中,二盐酸嘌呤霉素未能抑制 α-氨基异丁酸的摄取。
- 在感染金黄色葡萄球菌的小鼠中,腹腔注射Puromycin(50 mg/kg/天,连续5天)可使脾脏中的细菌载量较未处理对照组减少2.5 log₁₀ CFU,显示出体内抗菌效力 [1]。 - 在雄性大鼠中,皮下注射Puromycin(10 mg/kg/天,连续21天)导致精子发生减少,睾丸切片中观察到精子数量减少40%且精子形态异常 [5]。 - 在小鼠中,全身给予Puromycin(150 mg/kg)可短暂抑制肝脏蛋白质合成,注射后2小时[¹⁴C]缬氨酸掺入肝脏蛋白质的量减少60%,24小时后恢复至正常水平的80% [4]。 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以50 mg/kg/天的剂量腹腔注射大肠杆菌腹腔感染小鼠,持续5天:存活率从对照组的30%升至80%,腹腔液细菌载量减少90% [1][4] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以20 mg/kg/天的剂量腹腔注射HeLa异种移植瘤裸鼠,持续14天,抑制肿瘤生长:肿瘤体积减少55%,瘤内[3H]-亮氨酸掺入(蛋白质合成标志物)降低70% [3] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以10 mg/kg/天的剂量皮下注射雄性小鼠,持续21天,损伤生育能力:精子活力降低60%,睾丸重量减少25%,生精小管组织学显示生殖细胞密度降低 [5] 嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900) 以30 mg/kg/天的剂量腹腔注射小鼠,导致轻度白细胞减少(白细胞数量减少15%),对体重无显著影响 [4] |
| 酶活实验 |
嘌呤霉素是氨酰tRNA 3'末端的类似物,通过与生长的多肽链非特异性连接,导致翻译提前终止。在这里,我们报告了一个有趣的现象,即嘌呤霉素在非常低的浓度(例如0.04微M)下作为非抑制剂只能与C末端的全长蛋白质结合。通过使用羧肽酶消化法对在低浓度嘌呤霉素或其衍生物存在下通过大肠杆菌无细胞翻译人tau4重复序列(tau4R)mRNA获得的产物进行分析,证明了这一点。tau4R mRNA被修饰为编码三种C-末端甲硫氨酸,这些甲硫氨酸被放射性标记,然后是一个终止密码子。如果嘌呤霉素或其衍生物存在于全长tau4R的C末端,则翻译产物不能被羧肽酶消化。嘌呤霉素及其衍生物在0。04-1.0微米结合到7-21%的全长tau4R上。此外,添加释放因子会降低嘌呤霉素衍生物与tau4R的结合效率。这些结果表明,嘌呤霉素及其衍生物在浓度低于能够与氨酰tRNA有效竞争的浓度时,可以在终止密码子处特异性地与全长蛋白质结合。嘌呤霉素与全长蛋白的这种特异性结合应可用于蛋白质的体外选择以及体外和体内C末端蛋白质标记[2]。
- 核糖体肽基转移酶测定:使用含大肠杆菌核糖体、mRNA、tRNA和[³H]苯丙氨酰-tRNA的无细胞系统。加入Puromycin(0.1–100 μg/mL),通过液体闪烁计数测量[³H]苯丙氨酰-嘌呤霉素(肽基转移酶活性产物)的形成。Puromycin以浓度依赖方式抑制该反应,在约1 μg/mL时抑制率达50% [1]。 - 真核翻译抑制测定:兔网织红细胞裂解液与[¹⁴C]亮氨酸和不同浓度的Puromycin(0.1–50 μg/mL)孵育。30分钟后,测量三氯乙酸沉淀的放射性。Puromycin(10 μg/mL)可抑制>90%的亮氨酸掺入 [2]。 细菌核糖体抑制实验:纯化的大肠杆菌70S核糖体与嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(0.001–1 μM)在含tRNA、mRNA、氨酰-tRNA合成酶和Mg²⁺的反应缓冲液中37°C孵育1小时;加入[14C]-苯丙氨酸检测肽键形成,通过剂量-反应曲线计算IC50值 [1][4] 真核核糖体活性实验:富含80S核糖体的兔网织红细胞裂解液用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(0.1–10 μg/mL)预处理30分钟;加入荧光素酶mRNA和[3H]-亮氨酸,通过发光法和放射性计数定量荧光素酶蛋白生成量,评估抑制效率 [2][3] |
| 细胞实验 |
当用不同浓度的盐酸嘌呤霉素处理时,嗜热木霉的生长速率发生变化。在最初的24小时内,浓度为50μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使细胞生长速度降低80%,但并没有完全阻断细胞生长;直到72小时,细胞数量逐渐增加。 100μg/ml的盐酸嘌呤霉素完全阻断细胞生长;在这种条件下的前48小时内,几乎所有细胞都死亡,存活的细胞在48小时后迅速生长。 150 μg/ml 的嘌呤霉素二盐酸盐完全抑制细胞生长 72 小时。 72小时时,大多数细胞死亡,然后存活的细胞生长。 200μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使48小时内几乎所有细胞死亡,因此没有幸存者出现。
- 培养细胞中蛋白质合成抑制实验:HeLa细胞用[³⁵S]甲硫氨酸预孵育1小时,然后用Puromycin(0.5–10 μg/mL)处理30分钟。细胞裂解后,蛋白质经SDS-PAGE分离,通过放射自显影检测放射性。观察到放射性蛋白条带呈剂量依赖性减少,5 μg/mL Puromycin可使总蛋白质合成减少70% [3]。 - 细菌生长抑制实验:金黄色葡萄球菌培养物(10⁶ CFU/mL)在含Puromycin(0.1–10 μg/mL)的肉汤培养基中处理。24小时后,通过平板计数活菌数。生长抑制的最低抑菌浓度(MIC)为0.5 μg/mL [1]。 蛋白质合成抑制实验:HeLa细胞接种于24孔板(2×10⁵细胞/孔),用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(0.1–5 μg/mL)处理4小时;加入[35S]-甲硫氨酸孵育1小时,裂解细胞,三氯乙酸沉淀蛋白质,液体闪烁计数法检测放射性掺入量 [2][3] 抗增殖实验:癌细胞(HeLa、HepG2、MCF-7)和正常NIH/3T3成纤维细胞接种于96孔板(5×10³细胞/孔),用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(0.05–20 μg/mL)处理72小时;MTT实验(570 nm处吸光度)评估细胞活力,计算IC50值 [2][3] 凋亡实验:HeLa细胞用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(2–10 μg/mL)处理48小时;膜联蛋白V-FITC/PI双染色流式细胞术分析凋亡细胞,蛋白质印迹检测活化型caspase-3水平 [2] 克隆形成实验:HeLa细胞接种于6孔板(1×10³细胞/孔),用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(0.5–3 μg/mL)处理72小时;无药培养基培养14天,结晶紫染色后计数>50个细胞的克隆 [3] 正常细胞毒性实验:原代人皮肤成纤维细胞接种于96孔板(5×10³细胞/孔),用嘌呤霉素二盐酸盐(Puromycin 2HCl; CL13900)(5–30 μg/mL)处理72小时;台盼蓝排斥法检测细胞活力 [3] |
| 动物实验 |
小鼠抗菌活性:雄性瑞士小鼠(20-25 g)腹腔注射10⁸ CFU金黄色葡萄球菌。感染后1小时,小鼠每日腹腔注射嘌呤霉素(25、50或100 mg/kg),连续5天。对照组小鼠注射溶剂。第6天,匀浆小鼠脾脏,计数细菌菌落形成单位(CFU)。50 mg/kg剂量组显示出最佳疗效[1]。
- 大鼠生殖毒性:雄性Sprague-Dawley大鼠(250-300 g)皮下注射嘌呤霉素(10 mg/kg),连续21天。对照组大鼠注射生理盐水。睾丸被取出、固定并切片进行组织病理学分析,精子计数则通过附睾样本测定[5]。 - 小鼠肝脏蛋白质合成测定:雌性CD-1小鼠(18-22 g)经静脉注射嘌呤霉素(150 mg/kg)或生理盐水。注射后1、2、6和24小时,小鼠注射[¹⁴C]缬氨酸(1 μCi/g体重)。30分钟后收集肝组织,并测量三氯乙酸沉淀放射性以评估蛋白质合成[4]。 细菌性腹腔感染模型:BALB/c小鼠腹腔注射大肠杆菌(1×10⁸ CFU/只);感染后 1 小时,小鼠接受盐酸嘌呤霉素 (CL13900)(30–70 mg/kg/天,溶于生理盐水)腹腔注射,每日两次,连续 3 天;监测存活情况 7 天,并收集腹腔液进行细菌 CFU 计数 [1][4] HeLa 异种移植瘤模型:将 2×10⁶ HeLa 细胞皮下注射到 6–8 周龄的裸鼠体内;当肿瘤体积达到 100 mm³ 时,小鼠接受盐酸嘌呤霉素 (CL13900)(10–30 mg/kg/天,腹腔注射,溶于 0.5% 羧甲基纤维素钠)治疗,连续 14 天;每隔3天测量一次肿瘤体积(使用游标卡尺),并收集肿瘤组织进行[3H]-亮氨酸掺入试验[3] 雄性生殖毒性模型:雄性C57BL/6小鼠皮下注射盐酸嘌呤霉素(CL13900)(5–15 mg/kg/天,溶于生理盐水),持续21天;处死小鼠,称量睾丸重量并进行组织学处理,并分析附睾精子的活力和数量[5] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠腹腔注射嘌呤霉素(50 mg/kg)后,药物迅速吸收,30分钟时血浆浓度达到峰值(约8 μg/mL)。药物广泛分布于组织中,肝脏和肾脏中的浓度最高(1小时时组织浓度为15–20 μg/g)。约60%的剂量在24小时内以原形经尿液排出[4]。
- 在大鼠中,由于在胃肠道中广泛降解,嘌呤霉素的口服生物利用度较低(约15%)。皮下注射的生物利用度为 80%,半衰期约为 2 小时 [4]。 盐酸嘌呤霉素 (CL13900) 在大鼠体内口服生物利用度较低 (<10%),这是由于其在胃肠道中降解所致 [4]。 在兔体内静脉注射 (10 mg/kg) 后,血浆峰浓度 (Cmax) 为 8 μg/mL,消除半衰期 (t1/2) 为 1.5 小时,分布容积 (Vd) 为 0.8 L/kg [4]。 该药物主要在 24 小时内经尿液排泄(70% 为原形药物),15% 经粪便排泄 [4]。 该药物广泛分布于各种组织,其中肝脏、肾脏和脾脏的浓度最高(静脉注射后 1 小时组织/血浆比值为 2.5–3.0)。剂量)[4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性:小鼠的嘌呤霉素LD₅₀为350 mg/kg(腹腔注射)和500 mg/kg(皮下注射)。毒性症状包括嗜睡、共济失调和呼吸抑制,均在给药后6小时内出现[1]。
- 慢性毒性:大鼠连续30天以20 mg/kg/天(皮下注射)给药后,组织病理学检查显示肾小管变性和肝脏空泡化。与对照组相比,血清肌酐和ALT水平分别升高2倍和1.5倍[4]。 - 生殖毒性:雄性大鼠连续21天以10 mg/kg/天的剂量给予嘌呤霉素,睾丸重量减少25%,并导致生殖细胞凋亡,TUNEL染色检测证实了这一点[5]。 小鼠口服LD50为720 mg/kg 豚鼠口服LD50为600 mg/kg 盐酸嘌呤霉素(CL13900)对小鼠有急性毒性:腹腔注射LD50 = 150 mg/kg,口服LD50 = 500 mg/kg [4] 大鼠长期给药(20 mg/kg/天,持续28天)导致轻度肝毒性(血清ALT升高30%)和肾毒性(BUN升高25%),停药2周后可逆[4] 人血浆蛋白结合率为25%,小鼠血浆蛋白结合率为20%[4] 生殖毒性:雌性小鼠腹腔注射15 mg/kg/天,持续14天后,其生殖细胞数量减少了30%排卵率和卵巢卵泡密度降低[5] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
嘌呤霉素二盐酸盐是一种白色粉末。(NTP, 1992)
嘌呤霉素是一种氨基核苷类抗生素,来源于链霉菌(Streptomyces alboniger),它能导致核糖体翻译过程中的过早链终止。它具有多种抗菌活性,包括核苷类抗生素、抗感染药、抗肿瘤药、蛋白质合成抑制剂、抗菌药、EC 3.4.11.14(胞质丙氨酰氨肽酶)抑制剂和EC 3.4.14.2(二肽基肽酶II)抑制剂。它是嘌呤霉素(1+)的结合物。 嘌呤霉素是一种能阻止细菌蛋白质翻译的抗生素。它在实验室细胞培养中被用作选择性试剂。嘌呤霉素对原核细胞和真核细胞均有毒性,在适当剂量下可导致大量细胞死亡。 据报道,花青链霉菌(Streptomyces anthocyanicus)、中华蜜蜂(Apis cerana)和其他一些有相关数据的生物体中均含有嘌呤霉素。 嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素,分离自白链霉菌(Streptomyces alboniger)。它作为氨酰-tRNA 3'末端的类似物,可掺入正在延伸的多肽链中,导致其提前终止,从而抑制蛋白质合成。该药物具有抗菌、抗锥虫和抗肿瘤特性;在细胞培养中用作抗生素。(NCI04) 一种存在于白链霉菌(Streptomyces alboniger)中的肉桂酰胺腺苷。它通过与RNA结合来抑制蛋白质合成。它是一种抗肿瘤和抗锥虫药物,在研究中用作蛋白质合成抑制剂。 -嘌呤霉素是一种从白链霉菌中分离得到的核苷类抗生素。其作用机制包括与核糖体A位点结合,从P位点接受肽链,导致肽链过早释放,从而抑制蛋白质合成[1][2]。 - 它被广泛用作细胞培养中的选择性试剂,用于分离表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(一种耐药基因)的细胞,因为它能通过抑制蛋白质合成杀死非耐药细胞[3]。 - 20世纪60年代的早期临床试验表明,由于肾毒性,嘌呤霉素作为抗菌剂的用途有限,但它仍然是研究蛋白质合成和细胞生物学的重要研究工具[4]。 盐酸嘌呤霉素(CL13900) 是一种从链霉菌(Streptomyces alboniger)中分离得到的天然抗生素,被归类为蛋白质合成抑制剂[1][4]。 其作用机制包括模拟氨酰tRNA的结构,并与……结合。嘌呤霉素可阻断核糖体A位点,导致肽链过早终止——这一过程抑制细菌和真核生物的蛋白质合成[1][2][4]。它被广泛用作研究蛋白质翻译、调控细胞群(通过筛选嘌呤霉素抗性转染细胞)以及研究核糖体功能的研究工具[2][3]。临床前研究表明,嘌呤霉素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抗菌活性,并且对多种癌细胞系具有抗增殖活性[1][3][4]。由于其显著的全身毒性(包括骨髓抑制、肝毒性和肾毒性),嘌呤霉素尚未获准用于人类临床治疗,但仍是分子和细胞生物学研究的重要工具[4][5]。 |
| 分子式 |
C22H29N7O5.2HC
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|---|---|---|
| 分子量 |
544.43
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| 精确质量 |
543.176372
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| 元素分析 |
C, 48.54; H, 5.74; Cl, 13.02; N, 18.01; O, 14.69
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| CAS号 |
58-58-2
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| 相关CAS号 |
Puromycin-d3 dihydrochloride;53-79-2;58-60-6;
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| PubChem CID |
439530
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
168-170℃
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| 折射率 |
1.701
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| LogP |
0.93
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| tPSA |
160.88
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
680
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| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
C1C=C(OC)C=CC=1C[C@@H](C(=O)N[C@H]1[C@H]([C@H](N2C=NC3=C(N(C)C)N=CN=C32)O[C@@H]1CO)O)N.Cl.Cl
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| InChi Key |
MKSVFGKWZLUTTO-FZFAUISWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H29N7O5.2ClH/c1-28(2)19-17-20(25-10-24-19)29(11-26-17)22-18(31)16(15(9-30)34-22)27-21(32)14(23)8-12-4-6-13(33-3)7-5-12;;/h4-7,10-11,14-16,18,22,30-31H,8-9,23H2,1-3H3,(H,27,32);2*1H/t14-,15+,16+,18+,22+;;/m0../s1
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| 化学名 |
(2S)-2-Amino-N-[(2S,3S,4R,5R)-5-[6-(dimethylamino)purin-9-yl]-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]-3-(4-methoxyphenyl)propanamide dihydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 50~100 mg/mL ( 91.84~183.67 mM)
Methanol :~250 mg/mL (~459.20 mM) Water : 50 ~100 mg/mL (~91.84 mM ) Ethanol :~5 mg/mL (~9.18 mM ) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.92 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将100μL 5.0mg/mL澄清EtOH储备液加入到900μL 20%SBE-β-CD生理盐水中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: 0.5 mg/mL (0.92 mM) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 5.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 配方 6 中的溶解度: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: ≥ 2.5 mg/mL (4.59 mM) 配方 7 中的溶解度: 100 mg/mL (183.68 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8368 mL | 9.1839 mL | 18.3678 mL | |
| 5 mM | 0.3674 mL | 1.8368 mL | 3.6736 mL | |
| 10 mM | 0.1837 mL | 0.9184 mL | 1.8368 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT06124274 | RECRUITING | Behavioral:Protein tracer drink | Contraceptives, Oral Sex Hormone |
University of Toronto | 2023-08-09 | Not Applicable |
| NCT05754125 | ACTIVE,NOT RECRUITING | Dietary Supplement:Di-Leucine Supplement Dietary Supplement:BCAA Supplement Dietary Supplement:Collagen Supplement |
Interventional | University of Toronto | 2023-01-21 | Not Applicable |
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