| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| Other Sizes |
| 靶点 |
Protein synthesis; Puromycin (CL13900) targets the ribosome, specifically inhibiting peptidyl transferase activity in both prokaryotic and eukaryotic ribosomes, thereby disrupting protein synthesis. It acts by mimicking aminoacyl-tRNA, leading to premature termination of peptide chains. No IC₅₀, Ki, or EC₅₀ values were specified in the literature [1][2][3][4][5]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：抗生素嘌呤霉素由放线菌链霉菌（Streptornyces alboniger）产生，已被用作研究许多系统中蛋白质合成的工具。嘌呤霉素可用于从非培养细胞中选择重组细胞。细胞测定：用不同浓度的盐酸嘌呤霉素处理时，嗜热木霉的生长速率发生变化。在最初的24小时内，浓度为50μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使细胞生长速度降低80%，但并没有完全阻断细胞生长；直到72小时，细胞数量逐渐增加。 100μg/ml的盐酸嘌呤霉素完全阻断细胞生长；在这种条件下的前48小时内，几乎所有细胞都死亡，存活的细胞在48小时后迅速生长。 150 μg/ml 的嘌呤霉素二盐酸盐完全抑制细胞生长 72 小时。到 72 小时，大多数细胞死亡，然后存活的细胞生长。 200μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使48小时内几乎所有细胞死亡，因此没有幸存者出现。
- 在无细胞蛋白质合成系统中，Puromycin 抑制多肽链延伸。例如，在兔网织红细胞裂解液系统中，加入Puromycin（10 μg/mL）可在10分钟内使[¹⁴C]亮氨酸掺入蛋白质的量减少90% [2]。 - 在细菌培养物（如金黄色葡萄球菌）中，Puromycin（0.5 μg/mL）处理4小时后可抑制95%的生长，显示出抗菌活性 [1]。 - 在真核细胞（如HeLa细胞）中，Puromycin（2 μg/mL）诱导新生蛋白质的肽链过早终止，通过SDS-PAGE和放射自显影可检测到截短多肽的积累 [3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 25 天龄的动物中，先前暴露于二盐酸嘌呤霉素 180 或 120 分钟会抑制随后的氨基酸转运。然而，在 50 天龄的动物中，二盐酸嘌呤霉素未能抑制 α-氨基异丁酸的摄取。
- 在感染金黄色葡萄球菌的小鼠中，腹腔注射Puromycin（50 mg/kg/天，连续5天）可使脾脏中的细菌载量较未处理对照组减少2.5 log₁₀ CFU，显示出体内抗菌效力 [1]。 - 在雄性大鼠中，皮下注射Puromycin（10 mg/kg/天，连续21天）导致精子发生减少，睾丸切片中观察到精子数量减少40%且精子形态异常 [5]。 - 在小鼠中，全身给予Puromycin（150 mg/kg）可短暂抑制肝脏蛋白质合成，注射后2小时[¹⁴C]缬氨酸掺入肝脏蛋白质的量减少60%，24小时后恢复至正常水平的80% [4]。 |
| 酶活实验 |
- 核糖体肽基转移酶测定：使用含大肠杆菌核糖体、mRNA、tRNA和[³H]苯丙氨酰-tRNA的无细胞系统。加入Puromycin（0.1–100 μg/mL），通过液体闪烁计数测量[³H]苯丙氨酰-嘌呤霉素（肽基转移酶活性产物）的形成。Puromycin以浓度依赖方式抑制该反应，在约1 μg/mL时抑制率达50% [1]。
- 真核翻译抑制测定：兔网织红细胞裂解液与[¹⁴C]亮氨酸和不同浓度的Puromycin（0.1–50 μg/mL）孵育。30分钟后，测量三氯乙酸沉淀的放射性。Puromycin（10 μg/mL）可抑制>90%的亮氨酸掺入 [2]。 嘌呤霉素是氨酰tRNA 3'末端的类似物，通过与生长的多肽链非特异性连接，导致翻译提前终止。在这里，我们报告了一个有趣的现象，即嘌呤霉素在非常低的浓度（例如0.04微M）下作为非抑制剂只能与C末端的全长蛋白质结合。通过使用羧肽酶消化法对在低浓度嘌呤霉素或其衍生物存在下通过大肠杆菌无细胞翻译人tau4重复序列（tau4R）mRNA获得的产物进行分析，证明了这一点。tau4R mRNA被修饰为编码三种C-末端甲硫氨酸，这些甲硫氨酸被放射性标记，然后是一个终止密码子。如果嘌呤霉素或其衍生物存在于全长tau4R的C末端，则翻译产物不能被羧肽酶消化。嘌呤霉素及其衍生物在0。04-1.0微米结合到7-21%的全长tau4R上。此外，添加释放因子会降低嘌呤霉素衍生物与tau4R的结合效率。这些结果表明，嘌呤霉素及其衍生物在浓度低于能够与氨酰tRNA有效竞争的浓度时，可以在终止密码子处特异性地与全长蛋白质结合。嘌呤霉素与全长蛋白的这种特异性结合应可用于蛋白质的体外选择以及体外和体内C末端蛋白质标记[2]。 |
| 细胞实验 |
- 培养细胞中蛋白质合成抑制实验：HeLa细胞用[³⁵S]甲硫氨酸预孵育1小时，然后用Puromycin（0.5–10 μg/mL）处理30分钟。细胞裂解后，蛋白质经SDS-PAGE分离，通过放射自显影检测放射性。观察到放射性蛋白条带呈剂量依赖性减少，5 μg/mL Puromycin可使总蛋白质合成减少70% [3]。
- 细菌生长抑制实验：金黄色葡萄球菌培养物（10⁶ CFU/mL）在含Puromycin（0.1–10 μg/mL）的肉汤培养基中处理。24小时后，通过平板计数活菌数。生长抑制的最低抑菌浓度（MIC）为0.5 μg/mL [1]。 当用不同浓度的盐酸嘌呤霉素处理时，嗜热木霉的生长速率发生变化。在最初的24小时内，浓度为50μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使细胞生长速度降低80%，但并没有完全阻断细胞生长；直到72小时，细胞数量逐渐增加。 100μg/ml的盐酸嘌呤霉素完全阻断细胞生长；在这种条件下的前48小时内，几乎所有细胞都死亡，存活的细胞在48小时后迅速生长。 150 μg/ml 的嘌呤霉素二盐酸盐完全抑制细胞生长 72 小时。 72小时时，大多数细胞死亡，然后存活的细胞生长。 200μg/ml的嘌呤霉素二盐酸盐使48小时内几乎所有细胞死亡，因此没有幸存者出现。 |
| 动物实验 |
小鼠抗菌活性：雄性瑞士小鼠（20-25 g）腹腔注射10⁸ CFU金黄色葡萄球菌。感染后1小时，小鼠每日腹腔注射嘌呤霉素（25、50或100 mg/kg），连续5天。对照组小鼠注射溶剂。第6天，匀浆小鼠脾脏，计数细菌菌落形成单位（CFU）。50 mg/kg剂量组显示出最佳疗效[1]。
- 大鼠生殖毒性：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）皮下注射嘌呤霉素（10 mg/kg），连续21天。对照组大鼠注射生理盐水。睾丸被取出、固定并切片，用于组织病理学分析，并从附睾样本中测定精子计数[5]。 - 小鼠肝脏蛋白质合成测定：雌性CD-1小鼠（18-22 g）经静脉注射嘌呤霉素（150 mg/kg）或生理盐水。注射后1、2、6和24小时，小鼠注射[¹⁴C]缬氨酸（1 μCi/g体重）。30分钟后收集肝组织，并测量三氯乙酸沉淀放射性以评估蛋白质合成[4]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠腹腔注射嘌呤霉素（50 mg/kg）后，吸收迅速，30 分钟血浆浓度达峰（约 8 μg/mL）。嘌呤霉素广泛分布于组织中，肝脏和肾脏中的浓度最高（1 小时时组织浓度为 15–20 μg/g）。约 60% 的剂量在 24 小时内以原形经尿液排出 [4]。
- 在大鼠中，由于在胃肠道内广泛降解，嘌呤霉素的口服生物利用度较低（约 15%）。皮下给药的生物利用度为 80%，半衰期约为 2 小时 [4]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠的嘌呤霉素LD₅₀为350 mg/kg（腹腔注射）和500 mg/kg（皮下注射）。毒性症状包括嗜睡、共济失调和呼吸抑制，均在给药后6小时内出现[1]。
- 慢性毒性：大鼠连续30天以20 mg/kg/天（皮下注射）给药后，组织病理学检查显示肾小管变性和肝脏空泡化。与对照组相比，血清肌酐和ALT水平分别升高2倍和1.5倍[4]。 - 生殖毒性：雄性大鼠连续21天以10 mg/kg/天的剂量给予嘌呤霉素，睾丸重量减少25%，并导致生殖细胞凋亡，TUNEL染色检测证实了这一点[5]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
嘌呤霉素二盐酸盐是一种白色粉末。(NTP, 1992)
嘌呤霉素是一种氨基核苷类抗生素，来源于链霉菌（Streptomyces alboniger），它能导致核糖体翻译过程中的过早链终止。它具有核苷类抗生素、抗感染剂、抗肿瘤剂、蛋白质合成抑制剂、抗菌剂、EC 3.4.11.14（胞质丙氨酰氨肽酶）抑制剂和EC 3.4.14.2（二肽基肽酶II）抑制剂等多种抗菌活性。它是嘌呤霉素(1+)的结合物。 嘌呤霉素是一种能阻止细菌蛋白质翻译的抗生素。它在实验室细胞培养中被用作选择性试剂。嘌呤霉素对原核细胞和真核细胞均有毒性，在适当剂量下可导致大量细胞死亡。 据报道，嘌呤霉素存在于花青链霉菌（Streptomyces anthocyanicus）、中华蜜蜂（Apis cerana）以及其他有相关数据的生物体中。 嘌呤霉素是一种氨基糖苷类抗生素，分离自白链霉菌（Streptomyces alboniger）。它作为氨酰-tRNA 3'末端的类似物，可掺入正在延伸的多肽链中，导致其提前终止，从而抑制蛋白质合成。该药物具有抗菌、抗锥虫和抗肿瘤特性；在细胞培养中用作抗生素。(NCI04) 一种存在于白链霉菌（Streptomyces alboniger）中的肉桂酰胺腺苷。它通过与RNA结合来抑制蛋白质合成。嘌呤霉素是一种抗肿瘤和抗锥虫药物，在研究中被用作蛋白质合成抑制剂。 - 嘌呤霉素是一种从白链霉菌（Streptomyces alboniger）中分离得到的核苷类抗生素。其作用机制包括与核糖体的A位点结合，从P位点接受肽链，导致肽链过早释放，从而抑制蛋白质合成[1][2]。 - 嘌呤霉素广泛用作细胞培养中的选择性试剂，用于分离表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶（一种耐药基因）的细胞，因为它能通过抑制蛋白质合成杀死非耐药细胞[3]。 - 20世纪60年代的早期临床试验表明，由于肾毒性，嘌呤霉素作为抗菌药物的用途有限，但它仍然是研究蛋白质合成和细胞生物学的重要研究工具[4]。 |
| 分子式 |
C22H29N7O5
|
|---|---|
| 分子量 |
471.52
|
| 精确质量 |
471.223
|
| 元素分析 |
C, 56.04; H, 6.20; N, 20.79; O, 16.97
|
| CAS号 |
53-79-2
|
| 相关CAS号 |
53-79-2;58-58-2;58-60-6;53-79-2;Puromycin hydrochloride
|
| PubChem CID |
439530
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 熔点 |
175.5-177ºC
|
| 折射率 |
1.701
|
| LogP |
0.93
|
| tPSA |
160.88
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
680
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
OC[C@@H]1[C@@H](NC([C@@H](N)CC2=CC=C(OC)C=C2)=O)[C@H]([C@H](N3C=NC4=C3N=CN=C4N(C)C)O1)O
|
| InChi Key |
RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H29N7O5/c1-28(2)19-17-20(25-10-24-19)29(11-26-17)22-18(31)16(15(9-30)34-22)27-21(32)14(23)8-12-4-6-13(33-3)7-5-12/h4-7,10-11,14-16,18,22,30-31H,8-9,23H2,1-3H3,(H,27,32)/t14-,15+,16+,18+,22+/m0/s1
|
| 化学名 |
Adenosine, 3'-(((2S)-2-amino-3-(4-methoxyphenyl)-1-oxopropyl)amino)-3'-deoxy-N,N-dimethyl- InChi Key
|
| 别名 |
Puromycin; Puromycine; NSC-3055; NSC3055; Stylomycin; Puromicina; Puromycine; Puromycinum; Stillomycin; P-638; NSC 3055
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1208 mL | 10.6040 mL | 21.2080 mL | |
| 5 mM | 0.4242 mL | 2.1208 mL | 4.2416 mL | |
| 10 mM | 0.2121 mL | 1.0604 mL | 2.1208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT06124274 | RECRUITING | Behavioral:Protein tracer drink | Contraceptives, Oral Sex Hormone |
University of Toronto | 2023-08-09 | Not Applicable |
| NCT05754125 | ACTIVE,NOT RECRUITING | Dietary Supplement:Di-Leucine Supplement Dietary Supplement:BCAA Supplement Dietary Supplement:Collagen Supplement |
Interventional | University of Toronto | 2023-01-21 | Not Applicable |
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
