| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
TRPC3 (IC50 = 0.49 uM)
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Pyr3是一种先前提出的TRPC3选择性抑制剂，以类似的效力抑制Orai1-和TRPC3介导的Ca2+进入和电流以及肥大细胞活化。相比之下，与TRPC3介导的Ca2+进入相比，Pyr6抑制Orai1介导的钙进入的效力高出37倍，并能有效抑制肥大细胞活化。新型吡唑Pyr10对TRPC3介导的反应显示出显著的选择性（18倍），Pyr10选择性阻断TRPC3通道几乎不影响肥大细胞活化[1]
吡唑衍生物Pyr6和Pyr10能够区分TRPC和Orai介导的Ca2+进入，并可作为分析潜在Ca2+通道细胞功能的有用工具[1]。 |
| 酶活实验 |
为了表征TRPC通道的Pyr6和Pyr10选择性，使用了n末端GFP标记的小鼠TRPC6、n末端YFP标记的TRPC5（Schindl等人，2008）和c末端YFP标签的TRPC4beta（Graziani等人，2010）。
|
| 细胞实验 |
电生理学[1]
从硼硅酸盐玻璃毛细管（电阻3-5MΩ）中拔出贴片移液管。使用List EPC7膜片钳放大器在室温下记录电流。信号在3和10 kHz下进行低通滤波，并用5 kHz进行数字化。对于HEK293细胞，电压钳协议（电压从-130到+80 mV斜坡，保持电势0 mV）由pClamp软件控制。细胞外溶液（ECS）含有（以mM计）140 NaCl、2 CaCl2、2 MgCl2、10葡萄糖，用NaOH将pH值调节至7.4。移液管溶液（ICS）含有（以mM计）120甲烷磺酸铯、20 CsCl、15 HEPES、5 MgCl2、3 EGTA，用CsOH将pH值调节至7.3。为了激活TRPC3通道，用100μM卡巴胆碱或100μM 1-油酰基-2-乙酰基-sn-甘油（OAG）攻击当前的细胞。对于RBL-2H3细胞CRAC测量，Derler等人（2009）修改了标准方案和缓冲液。简而言之，在1秒内施加从-90 mV到+90 mV的电压斜坡（保持电势+30 mV），并由pClamp软件控制。ECS在pH 7.4下含有（以mM计）130 NaCl、5 CsCl、1 MgCl2、10 HEPES、10葡萄糖、20 CaCl2。ICS由3.5 MgCl2、145甲烷磺酸铯、8 NaCl、10 HEPES、20 EGTA组成，pH值为7.2。如Muik等人（2008）所述，在表达STIM1和Orai1的HEK-293细胞中进行了重建CRAC孔的实验。ECS在pH 7.4下含有（以mM计）145 NaCl、5 CsCl、1 MgCl2、10 HEPES、10葡萄糖、10 CaCl2。ICS由3.5 MgCl2、145甲烷磺酸铯、8 NaCl、10 HEPES、20 EGTA组成，pH值为7.2。为了测量无二价条件下的钠电流，使用了Bergsmann等人（2011）的方案和缓冲液。如果实验中没有另行提及，则将细胞预孵育3分钟，并在3μM Pyr2、Pyr3、Pyr6或Pyr10存在下进行测量。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
观察到的Pyr6和Pyr10的选择性表明，这些化合物可能有助于识别和分析天然组织中TRPC和Orai介导的电导。我们在RBL-2H3肥大细胞和表达STIM1/Orai1的HEK293细胞中获得的结果与以下概念相符：在这两种细胞系统中，储存操纵型Ca2+内流是通过相同的通道发生的，这些通道的特征是对Pyr6的敏感性明显高于对Pyr10的敏感性。相比之下，TRPC3同源孔结构对Pyr10高度敏感，但对Pyr6的敏感性较弱。重要的是，对 Pyr6 和 Pyr10 抑制其他 TRPC 亚型（如 TRPC4、5 和 6）同源通道的抑制作用进行测试，结果显示其对这些通道的抑制效力较低（IC50 > 10 μM），表明 Pyr10 具有显著的 TRPC 亚型选择性（见补充信息图 S3）。[1] 我们认为 Pyr6 和 Pyr10 对吡唑的敏感性是 Orai1 介导的 Ca2+ 内流的特征。由于 RBL-2H3 细胞表达包括 TRPC3 在内的 TRPC 基因（Ma 等，2008），我们的结果可能表明 TRPC3 不参与肥大细胞中由储存操纵的 Ca2+ 内流。然而，我们不能排除含有TRPC3的通道复合物在局部Ca2+信号事件中的作用。这些局部Ca2+信号事件无法通过整体细胞Ca2+变化检测到，但可能对某些下游信号通路至关重要，正如最近报道的心脏TRPC3（Poteser等人，2011）。我们发现NFAT易位对Pyr6高度敏感，但对Pyr10不敏感，这与Kar等人（2011）最近提出的观点一致，即在RBL-2H3细胞中，NFAT主要通过CRAC/Orai Ca2+内流通路进行调控。值得注意的是，吡唑类化合物最初被认为是NFAT信号传导的有效抑制剂，其作用机制尚不明确，位于Ca2+信号传导的下游（Djuric等人，2000；Trevillyan等人，2001）。本文报道了Pyr6和Pyr10的抑制作用与其作为CRAC/Orai1抑制剂的功效密切相关。Pyr6抑制肥大细胞脱颗粒的能力强于Pyr10，这一观察结果证实了Orai通道是RBL-2H3细胞胞吐作用中Ca2+的主要来源（Ma et al., 2008）。与之前的报道一致，Pyr6被发现能高效抑制免疫细胞的转录激活和细胞因子的产生（Ishikawa et al., 2003; Birsan et al., 2004; Shirakawa et al., 2010; Law et al., 2011），凸显了该化学结构在开发高效免疫调节剂方面的潜在价值（Chen et al., 2002; Zitt et al., 2004）[1]。
|
| 分子式 |
C17H9F7N4O
|
|---|---|
| 分子量 |
418.27
|
| 精确质量 |
418.066
|
| 元素分析 |
C, 48.82; H, 2.17; F, 31.79; N, 13.40; O, 3.82
|
| CAS号 |
245747-08-4
|
| PubChem CID |
10598093
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
368.4±42.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
176.6±27.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.8 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.551
|
| LogP |
3.1
|
| tPSA |
59.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
577
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
XZIQSOZOLJJMFN-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H9F7N4O/c18-12-8-25-6-5-11(12)15(29)26-9-1-3-10(4-2-9)28-14(17(22,23)24)7-13(27-28)16(19,20)21/h1-8H,(H,26,29)
|
| 化学名 |
N-[4-[3,5-bis(trifluoromethyl)pyrazol-1-yl]phenyl]-3-fluoropyridine-4-carboxamide
|
| 别名 |
Pyr 6; Pyr-6; N-(4-(3,5-Bis(trifluoromethyl)-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)-3-fluoroisonicotinamide; CHEMBL101896; N-[4-[3,5-bis(trifluoromethyl)pyrazol-1-yl]phenyl]-3-fluoropyridine-4-carboxamide; N-{4-[3,5-bis(trifluoromethyl)-1h-pyrazol-1-yl]phenyl}-3-fluoroisonicotinamide; N-{4-[3,5-bis(trifluoromethyl)pyrazol-1-yl]phenyl}-3-fluoropyridine-4-carboxamide; XZIQSOZOLJJMFN-UHFFFAOYSA-N; Pyr6
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~239.08 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (23.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (23.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (23.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3908 mL | 11.9540 mL | 23.9080 mL | |
| 5 mM | 0.4782 mL | 2.3908 mL | 4.7816 mL | |
| 10 mM | 0.2391 mL | 1.1954 mL | 2.3908 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
