| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Pz-1 is a type II tyrosine kinase inhibitor that attaches itself to the kinase's DFG-out conformation. Tyrosine phosphorylation of VEGFR2 and clinically relevant RET mutants, such as vandetanib- and cabozantinib-resistant mutants (RETV804M and RETV804L), was significantly inhibited by 1.0 nM Pz-1 in a cell-based assay [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
Pz-1 是一种 II 型酪氨酸激酶抑制剂，可将自身附着在激酶的 DFG-out 构象上。在基于细胞的测定中，1.0 nM Pz-1 显着抑制 VEGFR2 和临床相关 RET 突变体（例如凡德他尼和卡博替尼耐药突变体（RETV804M 和 RETV804L））的酪氨酸磷酸化 [1]。
在生化激酶实验中，Pz-1 对野生型 RET、VEGFR2 以及临床相关的 RET 突变体（RETC634R, RETM918T, RETV804M, RETV804L）表现出强效抑制活性，IC50 值均小于 1.0 nM。 [1] 在使用转染的 HEK293 细胞的实验中，1.0 nM 剂量的 Pz-1 能强烈抑制 RET 致癌蛋白（RETC634R, RETM918T, RETV804M, RETV804L）的酪氨酸磷酸化。 [1] 在 VEGFA 刺激的转染了 VEGFR2 的 HEK293 细胞中，1.0 nM 的 Pz-1 能有效抑制 VEGFR2 磷酸化。同样，在人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 中，Pz-1 抑制了内源性 VEGFA 诱导的 VEGFR2 磷酸化。 [1] 在用 RETC634Y 转化的 NIH3T3 成纤维细胞中，Pz-1 抑制细胞增殖的 IC50 为 0.5 nM。相比之下，抑制用 HRasG12V 转化的 NIH3T3 细胞增殖的 IC50 为 34.4 nM。在浓度高达 100.0 nM 时，Pz-1 对亲本 NIH3T3 细胞未产生可检测的生长抑制。 [1] 在 50.0 nM 浓度下对 91 种激酶组的全激酶组选择性筛选显示，除 RET 和 VEGFR2 外，Pz-1 仅对另外 7 种激酶有活性，表明其具有良好的全局选择性。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Pz-1 主动结合 VEGFR2，阻止 RET 促进生长所需的血流。当每天口服 1.0 mg/kg 时，Pz-1 可以阻止肿瘤组织中 RET 和 VEGFR2 的磷酸化，并消除 RET 突变成纤维细胞引起的肿瘤发展。在高达 100.0 mg/kg 的浓度下，Pz-1 没有表现出明显的毒性，表明治疗窗口很宽[1]。
在注射了 NIH3T3 RETC634Y 细胞的免疫缺陷 (nu/nu) 小鼠中，在肿瘤出现前开始每日口服给予 1.0 mg/kg/天的 Pz-1，完全阻止了 RET 驱动肿瘤的形成。 [1] 在注射了 NIH3T3 HRasG12V 细胞的小鼠中，相同处理（1.0、3.0 或 10.0 mg/kg/天）减少但并未消除肿瘤形成，表明了对 RET 驱动肿瘤的优先疗效。 [1] 肿瘤组织分析表明，Pz-1 (1.0 mg/kg) 在 RET 驱动的肿瘤中抑制了 RET 和 VEGFR2 的磷酸化。它还特异性地在 RET 驱动的肿瘤中抑制了下游 MAPK 和 mTOR 信号级联，但在 Ras 驱动的肿瘤中则没有。然而，在 RET 和 Ras 驱动的肿瘤中，VEGFR2 磷酸化均被抑制。 [1] |
| 酶活实验 |
使用基于微流控分离的生化激酶测定法测定 IC50 值。测定条件包括特定的 ATP 浓度（例如，某些化合物注明为 190 µM）。通过评估激酶对其底物活性的降低来测量抑制活性。所提供的数据来自至少三次独立实验的平均值。 [1]
为确定 RET 的 ATP Km，采用了标准的酶动力学方法，得出的 Km 值为 12.00 ± 0.26 µM。为表征抑制类型，在不同 ATP 浓度（6.2、12.5、50.0 和 100.0 µM）下测定了前体化合物 (3b) 的 IC50，显示其抑制与 ATP 部分竞争。 [1] 使用活性位点定向竞争结合测定法测定了 Pz-1 及其关键前体对 RET、VEGFR2 和 RETV804M 突变体的解离常数 (Kd) 值。 [1] |
| 细胞实验 |
为评估对致癌性 RET 磷酸化的抑制，用 Pz-1 或对照溶剂处理表达特定 RET 突变体的细胞。处理后裂解细胞，通过 SDS-PAGE 分离蛋白质。使用磷酸化特异性抗体通过蛋白质印迹法分析 RET 在特定酪氨酸残基（如 Y1062）上的磷酸化水平，总 RET 蛋白水平作为上样对照。 [1]
为评估对 VEGFR2 磷酸化的抑制，将转染了 VEGFR2 的 HEK293 细胞或天然 HUVECs 血清饥饿，在存在或不存在 Pz-1 的情况下用 VEGFA 刺激，然后裂解。通过蛋白质印迹法检测 VEGFR2 在 Y1175 位点的磷酸化。 [1] 抗增殖活性通过细胞活力测定进行评估。用一系列浓度的 Pz-1 处理用 RETC634Y 或 HRasG12V 转化的 NIH3T3 细胞以及亲本 NIH3T3 细胞。经过适当的孵育时间后，定量细胞活力或增殖情况，并计算 IC50 值。 [1] |
| 动物实验 |
在体内疗效研究中，将经RETC634Y或HRasG12V转化的NIH3T3成纤维细胞皮下注射到免疫缺陷（nu/nu）小鼠体内。在可触及肿瘤形成之前开始治疗。Pz-1每日通过灌胃（per os，PO）给药，剂量分别为1.0、3.0或10.0 mg/kg/天。对照组仅接受赋形剂。通过测量肿瘤体积来监测肿瘤的生长情况。[1]
在毒性评估中，小鼠接受Pz-1治疗，每日剂量最高达100.0 mg/kg，持续一周，并监测体重和血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
文献指出，Pz-1具有非常有利的药代动力学特性，但正文或可获取的补充信息中没有提供具体参数（例如，半衰期、生物利用度、AUC）。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期一周的小鼠研究中，每日口服剂量高达 100.0 mg/kg 的 Pz-1 耐受性良好，未检测到任何毒性迹象。血清丙氨酸转氨酶 (ALT) 水平随剂量呈线性增加，但始终在正常范围内，可作为监测指标。未报告其他特定毒性（例如血液学、肾脏毒性）或致死剂量。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Pz-1 是通过基于激酶导向片段 (KDF) 库的片段筛选发现的，随后通过计算建模和构效关系 (SAR) 研究进行了优化。[1]
它是一种 II 型酪氨酸激酶抑制剂，可与激酶的 DFG-out 构象结合。分子建模表明，其对 RET 和 VEGFR2 的等效效力得益于亚甲基连接基的自由旋转，从而允许其在两种激酶中呈现不同的结合几何构型。[1] Pz-1 对 RET 门控突变体 (V804M/L) 仍具有强效活性，而这些突变体对已批准的药物凡德他尼和卡博替尼耐药。 [1] 该研究提出了一种单药多药理学策略，其中Pz-1同时靶向肿瘤实质（通过抑制RET）和肿瘤间质（通过抑制抗血管生成VEGFR2）。[1] |
| 分子式 |
C26H26N6O2
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|---|---|
| 分子量 |
454.523644924164
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| 精确质量 |
454.211
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| CAS号 |
1800505-64-9
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| PubChem CID |
102004343
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
90.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
706
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O1C(=CC(=N1)NC(CC1C=CC(=CC=1)N1C=NC2C=C(C3C=NN(C)C=3)C=CC1=2)=O)C(C)(C)C
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| InChi Key |
NJLMIILZNLZZFW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H26N6O2/c1-26(2,3)23-13-24(30-34-23)29-25(33)11-17-5-8-20(9-6-17)32-16-27-21-12-18(7-10-22(21)32)19-14-28-31(4)15-19/h5-10,12-16H,11H2,1-4H3,(H,29,30,33)
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| 化学名 |
N-(5-tert-butyl-1,2-oxazol-3-yl)-2-[4-[5-(1-methylpyrazol-4-yl)benzimidazol-1-yl]phenyl]acetamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~110.01 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2001 mL | 11.0006 mL | 22.0012 mL | |
| 5 mM | 0.4400 mL | 2.2001 mL | 4.4002 mL | |
| 10 mM | 0.2200 mL | 1.1001 mL | 2.2001 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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