PLK1 (IC50 = 9 nM); PLK2 (IC50 = 260 nM); PDGFR (IC50 = 18 nM); Src (IC50 = 155 nM); BCR-ABL (IC50 = 32 nM); Cdk1 (IC50 = 260 nM); Flt1 (IC50 = 42 nM); Fyn (IC50 = 182 nM)

体外活性：Rigosertib 是 PLK1 的非 ATP 竞争性抑制剂，IC50 为 9 nM。 Rigosertib 还表现出对 PLK2、PDGFR、Flt1、BCR-ABL、Fyn、Src 和 CDK1 的抑制作用，IC50 为 18-260 nM。 Rigosertib 对 94 种不同的肿瘤细胞系显示出细胞杀伤活性，IC50 为 50-250 nM，包括 BT27、MCF-7、DU145、PC3、U87、A549、H187、RF1、HCT15、SW480 和 KB 细胞。而在正常细胞（例如 HFL、PrEC、HMEC 和 HUVEC）中，Rigosertib 的作用很小或没有作用，除非其浓度大于 5-10 μM。在 HeLa 细胞中，Rigosertib (100-250 nM) 会诱导纺锤体异常和细胞凋亡。 Rigosertib 还抑制多种耐药肿瘤细胞系，包括 MES-SA、MES-SA/DX5a、CEM 和 CEM/C2a，IC50 为 50-100 nM。在 DU145 细胞中，Rigosertib (0.25-5 μM) 可阻断 G2/M 期的细胞周期进展，导致含有 subG1 DNA 含量的细胞积累，并激活细胞凋亡途径。在 A549 细胞中，Rigosertib (50 nM-0.5 μM) 会导致活力丧失和 caspase 3/7 激活。在最近的一项研究中，Rigosertib 可诱导慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 细胞凋亡，但对 T 细胞或正常 B 细胞没有毒性。 Rigosertib 还消除滤泡树突状细胞对 CLL 细胞的促生存作用，并减少 SDF-1 诱导的白血病细胞迁移。激酶测定：将重组 PLK1 (10 ng) 与不同浓度的 Rigosertib 在 15 µL 反应混合物（50 mM HEPES、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、2 mM 二硫苏糖醇、0.01% NP-40 [pH 7.5]）中孵育，室温下 30 分钟。激酶反应在 30 °C 下进行 20 分钟，体积为 20 µL（15 µL 酶 + 抑制剂、2 µL 1 mM ATP）、2 µL γ32P-ATP (40 µCi) 和 1 µL 重组 Cdc25C（100 ng）或酪蛋白（1 μg）底物。在 20 µL 2× Laemmli 缓冲液中煮沸 2 分钟终止反应。磷酸化底物通过 18% SDS-PAGE 分离。将凝胶干燥并暴露于 X 射线胶片 3-10 分钟。细胞测定：细胞（许多肿瘤细胞系，包括 BT20、MCF-7、DU145、PC3、U87、A549、H187、RF1、HCT15、HeLa 和 Raji 细胞）在补充有 10% 的 DMEM 或 RPMI 中生长胎牛血清和1单位/mL青霉素-链霉素溶液。将肿瘤细胞以 1 × 105 个细胞/mL/孔的密度接种到六孔培养皿中，24 小时后添加不同浓度的 Rigosertib。处理 96 小时后，从重复孔中测定细胞计数。活细胞总数通过台盼蓝排除法测定。

在 Bel-7402、MCF-7 和 MIA-PaCa 细胞的小鼠异种移植模型中，Rigosertib (250 mg/kg) 显着抑制肿瘤生长。 Rigosertib (200 mg/kg) 在 BT20 细胞的小鼠异种移植模型中显示出对肿瘤生长的抑制作用。

将重组 PLK1 (10 ng) 与不同浓度的 rigosertib 在 15 µL 反应混合物（50 mM HEPES、10 mM MgCl₂、1 mM EDTA、2 mM 二硫苏糖醇）中在室温下孵育 30 分钟，0.01% NP-40 [pH 7.5]）。 20 µL（15 µL 酶 + 抑制剂、2 µL 1 mM ATP）、2 µL γ³²P-ATP (40 µCi) 和 1 µL 重组 Cdc25C (100 ng) 或酪蛋白 (1 μg）底物用于激酶反应，在 30°C 下进行 20 分钟。在 20 µL 2× Laemmli 缓冲液中煮沸 2 分钟，结束反应。 18% SDS-PAGE 用于分离磷酸化底物。干燥后，将凝胶暴露在 X 射线胶片下三到十分钟。

一天后，将不同浓度的 Rigosertib 添加到含有 1×10⁵ 细胞/mL/孔的已铺板肿瘤细胞的六孔培养皿中。处理96小时后，从重复的孔中获得细胞计数。通过使用台盼蓝排除法，可以找到活细胞的总数。

Bel-7402 tumor models: subcutaneous injection of 1 × 10⁷ Bel-7402 tumor cells is given to twenty female athymic (NCR-nu/nu) nude mice. Ten to fourteen days later, when the tumor volumes reach 200–250 mm, the mice are divided into four groups, each of which has tumors of the same volume. Alternatively, NSC 266046 (100 mg/kg) and rigosertib (ON01910, 250 mg/kg) can be given intraperitonially on different days. Using traceable digital vernier calipers, tumor measurements are performed twice a week. During every measurement, body weight is calculated. Signs of toxicity in the animals are monitored.

[1]. Cancer Cell . 2005 Mar;7(3):275-86.

[2]. J Med Chem . 2011 Sep 22;54(18):6254-76.

[3]. Clin Cancer Res . 2012 Apr 1;18(7):1979-91.

C₂₁H₂₅NO₈S

451.49

451.13

C, 55.87; H, 5.58; N, 3.10; O, 28.35; S, 7.10

592542-59-1

Rigosertib sodium;592542-60-4;(E/Z)-Rigosertib sodium;1225497-78-8

Solid powder

COC1=C(C=C(C=C1)CS(=O)(=O)/C=C/C2=C(C=C(C=C2OC)OC)OC)NCC(=O)O

OWBFCJROIKNMGD-BQYQJAHWSA-N

InChI=1S/C21H25NO8S/c1-27-15-10-19(29-3)16(20(11-15)30-4)7-8-31(25,26)13-14-5-6-18(28-2)17(9-14)22-12-21(23)24/h5-11,22H,12-13H2,1-4H3,(H,23,24)/b8-7+

2-[2-methoxy-5-[[(E)-2-(2,4,6-trimethoxyphenyl)ethenyl]sulfonylmethyl]anilino]acetic acid

ON-01910; ON01910; ON 01910; brand name: Estybon

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Solubility in Formulation 1: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL.
Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution.

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Solubility in Formulation 2: 2.5 mg/mL (5.54 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), suspension solution; with ultrasonication.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly.
Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution.

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Solubility in Formulation 3: ≥ 2.5 mg/mL (5.54 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly..

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Solubility in Formulation 4: Saline: 30 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。