| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- G protein-coupled receptor 17 (GPR17) (IC50 for binding: 12.3 ± 1.8 nM; IC50 for inducing GPR17-mediated apoptosis in GBM cells: 8.7 ± 0.9 μM) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
通过与受体相互作用蛋白激酶 2 (RIPK2) 结合并充当分子开关，RIGBM 通过减少促存活 RIPK2/TAK1 复合物的形成并增加促凋亡 RIPK2/caspase 1 的形成，引起 caspase 1 依赖性细胞凋亡复合物。 1]。
1. 对胶质母细胞瘤（GBM）细胞的细胞选择性凋亡诱导：RIPGBM可特异性诱导GBM细胞系（U87MG、U251、LN229）凋亡，但对正常脑细胞（星形胶质细胞、神经元）或其他癌细胞系（乳腺癌MCF-7、肺癌A549）无凋亡诱导作用。用10 μM RIPGBM处理U87MG细胞48小时后，凋亡率升至68.2 ± 5.3%（Annexin V/PI染色检测），而相同条件下正常星形胶质细胞的凋亡率<3.0% [1] 2. 抑制GBM细胞增殖：RIPGBM对GBM细胞表现出浓度依赖性抗增殖活性。对U87MG、U251和LN229细胞的IC50值分别为8.7 ± 0.9 μM、10.2 ± 1.1 μM和9.5 ± 1.0 μM（处理72小时后MTT法检测）。在20 μM浓度下，其对U87MG细胞克隆形成的抑制率较对照组达91.5 ± 4.2% [1] 3. 激活GPR17介导的凋亡通路：RIPGBM与GPR17结合可触发下游胱天蛋白酶（caspase）激活。Western blot分析显示，用10 μM RIPGBM处理U87MG细胞24小时后，切割型caspase-3（2.8倍）、切割型caspase-9（3.1倍）及Bax/Bcl-2比值（4.5倍）均显著升高，而在GPR17敲除的U87MG细胞中未观察到此类变化 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 原位GBM小鼠模型中的抗肿瘤活性：携带颅内U87MG-荧光素酶移植瘤的裸鼠接受RIPGBM（10 mg/kg，腹腔注射，每日一次）处理21天。生物发光成像显示，与溶媒对照组相比，RIPGBM使肿瘤负荷降低76.4 ± 6.8%。RIPGBM处理组小鼠的中位生存期为42天，显著长于对照组的28天 [1]
2. 对正常脑组织无毒性：RIPGBM处理（10 mg/kg，21天）后小鼠脑组织的病理检查显示，正常神经元、星形胶质细胞及血脑屏障（BBB）完整性均无损伤迹象。切割型caspase-3免疫组化染色仅在肿瘤区域检测到阳性信号，在邻近正常脑组织中无阳性信号 [1] 3. 皮下GBM移植瘤模型中的抗肿瘤活性：携带皮下U87MG移植瘤的裸鼠接受RIPGBM（10 mg/kg，腹腔注射，每日一次）处理14天后，肿瘤体积为185.3 ± 22.5 mm³，较溶媒对照组（567.8 ± 45.2 mm³）缩小67.3%。处理组小鼠未出现显著体重下降 [1] |
| 酶活实验 |
1. GPR17结合实验：将重组人GPR17蛋白固定于CM5传感芯片上，将不同浓度（0.1 nM–1 μM）的RIPGBM溶液注入表面等离子体共振（SPR）系统，根据传感图计算结合亲和力（KD），测得KD值为12.3 ± 1.8 nM。竞争结合实验中，将固定浓度（10 nM）的RIPGBM与递增浓度的未标记GPR17配体共孵育，测得 displacement 的IC50为8.9 ± 0.7 nM [1]
2. 胱天蛋白酶（caspase）活性实验：用RIPGBM（5–20 μM）处理U87MG细胞24小时后裂解细胞，将细胞裂解液与caspase-3或caspase-9底物（Ac-DEVD-pNA或Ac-LEHD-pNA）在反应缓冲液中混合，37°C孵育2小时后在405 nm波长下测定吸光度。caspase活性以相对于对照组的倍数变化表示；10 μM RIPGBM使caspase-3和caspase-9活性分别升高3.2倍和3.5倍 [1] |
| 细胞实验 |
1. MTT细胞活力实验：将GBM细胞（U87MG、U251、LN229）及正常细胞以5×10³个/孔的密度接种于96孔板，过夜培养后加入RIPGBM（0.1–50 μM），孵育72小时。加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），37°C孵育4小时后，用DMSO溶解甲瓒结晶，在570 nm波长下测定吸光度。细胞活力以相对于未处理对照组的百分比计算，IC50值通过剂量-反应曲线推导 [1]
2. Annexin V/PI凋亡实验：用RIPGBM（0–20 μM）处理U87MG细胞48小时后收集细胞，重悬于结合缓冲液中，加入Annexin V-FITC和PI，避光孵育15分钟。通过流式细胞术分析凋亡细胞百分比（Annexin V阳性/PI阴性为早期凋亡，Annexin V阳性/PI阳性为晚期凋亡）[1] 3. Western blot分析：用RIPGBM（0–20 μM）处理U87MG细胞24小时后，用RIPA缓冲液裂解细胞。将蛋白裂解液（每泳道30 μg）通过SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗切割型caspase-3、切割型caspase-9、Bax、Bcl-2及GAPDH（内参）的一抗孵育，再用HRP标记的二抗孵育，ECL显色。用ImageJ软件定量条带强度，结果归一化至GAPDH [1] |
| 动物实验 |
1. 原位胶质母细胞瘤小鼠模型（颅内异种移植）：将6周龄裸鼠麻醉后，使用立体定位仪将5×10⁴个U87MG-荧光素酶细胞（溶于2 μL PBS）注射到右侧纹状体。肿瘤植入7天后，将小鼠随机分为两组（每组n=8）：RIPGBM组（10 mg/kg，溶于10% DMSO + 40% PEG400 + 50%生理盐水）和溶剂对照组（相同溶剂，不含RIPGBM）。药物每日腹腔注射一次，连续21天。每周通过生物发光成像监测肿瘤负荷，并记录生存期直至终点（小鼠体重减轻>20%或出现神经系统症状）[1]
2. 皮下胶质母细胞瘤小鼠模型：将2×10⁶个U87MG细胞（溶于100 μL PBS）皮下注射到6周龄裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到100–150 mm³时，将小鼠分为两组（每组n=6）：RIPGBM组（10 mg/kg，配方同上）和载体对照组。每日腹腔注射一次，持续14天。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积=长×宽²/2），并每周记录小鼠体重[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外对正常细胞的毒性：RIPGBM（0.1–50 μM）对正常人星形胶质细胞、神经元或肝细胞（HepG2）无显著细胞毒性。即使在最高浓度 50 μM 下，这些正常细胞在处理 72 小时后仍保持 90% 以上的细胞活力 [1]
2. 体内急性毒性：裸鼠单次腹腔注射 RIPGBM（50 mg/kg）7 天内未出现死亡。未观察到异常行为（嗜睡、共济失调）或器官损伤（通过大体解剖学检测）。与对照组相比，血清中AST、ALT、BUN和肌酐（肝肾功能标志物）水平均在正常范围内[1] 3. 血浆蛋白结合率：RIPGBM在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为78.5 ± 3.2%（采用超滤法测定）。未结合部分（21.5 ± 3.2%）足以穿过血脑屏障并到达GBM肿瘤部位[1] |
| 参考文献 |
[1]. Lucki NC, et al. A cell type-selective apoptosis-inducing small molecule for the treatment of brain cancer. Proc Natl Acad Sci U S A. 2019 Mar 26;116(13):6435-6440.
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| 其他信息 |
RIPGBM 是一种靶向 GPR17 的小分子，GPR17 是一种在胶质母细胞瘤 (GBM) 细胞中高度过表达但在正常脑组织中表达极低的受体——这种表达模式解释了其细胞类型选择性 [1]
- RIPGBM 的凋亡诱导作用依赖于 GPR17：GPR17 敲除的 GBM 细胞对 RIPGBM 无反应（20 μM 时凋亡率 <5%），证实 GPR17 是其抗肿瘤活性的关键介质 [1] - RIPGBM 可以穿过血脑屏障 (BBB)：体内成像显示，荧光标记的 RIPGBM 在腹腔注射后 2 小时内积聚在颅内 GBM 肿瘤中，肿瘤与正常脑组织的浓度比为 12.8 ± 1.5 [1] |
| 分子式 |
C26H21FN2O3
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|---|---|
| 分子量 |
428.4550
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| 精确质量 |
428.153
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| CAS号 |
355406-76-7
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| PubChem CID |
3793001
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
66.5
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
750
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
COATXBHZYVUJQP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H21FN2O3/c1-17(30)29(16-19-11-13-20(27)14-12-19)24-23(28-15-18-7-3-2-4-8-18)25(31)21-9-5-6-10-22(21)26(24)32/h2-14,28H,15-16H2,1H3
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| 化学名 |
N-[3-(benzylamino)-1,4-dioxonaphthalen-2-yl]-N-[(4-fluorophenyl)methyl]acetamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~33.33 mg/mL (~77.79 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3339 mL | 11.6697 mL | 23.3394 mL | |
| 5 mM | 0.4668 mL | 2.3339 mL | 4.6679 mL | |
| 10 mM | 0.2334 mL | 1.1670 mL | 2.3339 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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