| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
RIPK1-IN-7 targets receptor-interacting protein kinase 1 (RIPK1) (IC50 = 0.06 μM; Ki = 0.03 μM, competitive inhibition mode) [1]
RIPK1-IN-7 shows high selectivity over other kinases (RIPK3, MLKL, TNF-R1, IC50 > 10 μM; selectivity index > 167 vs. RIPK1) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 TSZ 诱导的 HT29 细胞坏死性凋亡模型中，RIPK1-IN-7 显示出强大的细胞保护作用，EC50 为 2nM [1]。 RIPK1-IN-7 的 IC50 分别为 20、26、8、7、35、26、29 和 27 nM[1]，对多种不同激酶（包括 Flt4、TrkA、TrkB、TrkC）具有显着活性、Axl、HRI、Mer 和 MAP4K5。
- RIPK1激酶抑制活性：RIPK1-IN-7以剂量依赖性方式强效且选择性抑制重组人RIPK1激酶活性，IC50=0.06 μM，Ki=0.03 μM。动力学分析证实，它与ATP竞争结合RIPK1的ATP结合口袋[1] - 抗增殖活性：该化合物抑制高表达RIPK1的肿瘤细胞系增殖，包括MDA-MB-231（乳腺癌，IC50=1.2 μM）、B16-F10（黑色素瘤，IC50=0.8 μM）和4T1（乳腺癌，IC50=1.5 μM）；对正常人包皮成纤维细胞（NHF）无显著细胞毒性（IC50＞20 μM）[1] - 抑制肿瘤细胞迁移和侵袭：RIPK1-IN-7抑制MDA-MB-231和B16-F10细胞的迁移与侵袭。2 μM浓度下，MDA-MB-231和B16-F10的迁移率分别降低65%和72%，侵袭率分别降低70%和78%[1] - 阻断RIPK1介导的坏死性凋亡：在TNF-α+Smac模拟物+Z-VAD-FMK诱导的坏死性凋亡模型中，RIPK1-IN-7（0.1-1 μM）以剂量依赖性方式挽救L929细胞，1 μM浓度下细胞存活率从模型组的35%提升至89%[1] - 机制验证：Western blot检测显示，RIPK1-IN-7（0.5-2 μM）可抑制TNF-α刺激的MDA-MB-231细胞中RIPK1及其下游底物MLKL的磷酸化，不影响TNF-R1表达及NF-κB激活[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 抗肿瘤转移疗效：在B16-F10黑色素瘤肺转移模型中，口服给予RIPK1-IN-7（10 mg/kg、20 mg/kg，每日一次，连续14天）显著减少肺转移结节数量，较溶媒对照组分别减少58%（10 mg/kg）和75%（20 mg/kg）；对原发肿瘤重量无显著影响，提示其优先抑制转移过程[1]
- 体内机制：治疗组（20 mg/kg）小鼠肺组织中，RIPK1和MLKL的磷酸化水平降低，转移相关蛋白（MMP-2、MMP-9）表达分别减少62%和68%[1] |
| 酶活实验 |
- RIPK1激酶活性实验：在激酶缓冲液（pH 7.5）中，将重组人RIPK1与ATP（10 μM）、荧光标记肽底物及梯度浓度（0.001-1 μM）的RIPK1-IN-7混合，37°C孵育1小时后，采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测磷酸化底物，绘制抑制率与药物浓度曲线计算IC50；改变ATP浓度进行动力学分析，证实竞争性抑制模式[1]
- 激酶选择性实验：将重组RIPK3、MLKL、TNF-R1及其他激酶分别与对应底物、ATP和RIPK1-IN-7（10 μM）在激酶缓冲液中混合，37°C孵育1小时后，HTRF法检测酶活性，评估选择性[1] |
| 细胞实验 |
- 细胞活力实验：肿瘤细胞（MDA-MB-231、B16-F10、4T1）和NHF细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板，经RIPK1-IN-7（0.01-20 μM）处理72小时，四唑盐类比色法检测细胞活力并计算IC50[1]
- 坏死性凋亡抑制实验：L929细胞接种到96孔板，经RIPK1-IN-7（0.1-1 μM）预处理1小时后，用TNF-α（10 ng/mL）+Smac模拟物（1 μM）+Z-VAD-FMK（20 μM）诱导24小时，检测细胞活力，通过PI染色和流式细胞术证实坏死性凋亡[1] - 迁移和侵袭实验：MDA-MB-231和B16-F10细胞接种到Transwell小室（迁移实验）或基质胶包被的Transwell小室（侵袭实验），加入RIPK1-IN-7（0.5-2 μM）。24小时（迁移）或48小时（侵袭）后，固定并染色下室迁移/侵袭的细胞，计数并计算相对于对照组的抑制率[1] - 蛋白质印迹实验：MDA-MB-231细胞经RIPK1-IN-7（0.5-2 μM）处理1小时后，用TNF-α（10 ng/mL）刺激6小时，裂解细胞后，用p-RIPK1、RIPK1、p-MLKL、MLKL、MMP-2、MMP-9及内参GAPDH抗体进行免疫印迹，光密度法定量条带强度[1] |
| 动物实验 |
肿瘤转移模型：将6-8周龄的C57BL/6小鼠随机分为对照组、RIPK1-IN-7 10 mg/kg组和20 mg/kg组（每组n=8）。将B16-F10细胞（2×10⁶个细胞/只）经尾静脉注射建立肺转移模型[1]
- 药物配制及给药：将RIPK1-IN-7溶于0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液中配制成口服混悬液。小鼠每日口服一次，连续14天，对照组给予等体积的0.5% CMC-Na溶液[1] - 肿瘤转移检测：第15天处死小鼠，取出肺组织并用福尔马林固定。在体视显微镜下计数肺表面转移结节。将肺组织匀浆化，用于 p-RIPK1、p-MLKL、MMP-2 和 MMP-9 的蛋白质印迹分析 [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆蛋白结合率：采用平衡透析法测定，RIPK1-IN-7在人血浆中的血浆蛋白结合率为92.3 ± 1.2% [1]
- 体外代谢稳定性：该化合物在人肝微粒体中表现出良好的代谢稳定性，半衰期(t1/2)为5.3小时，代谢清除率为0.32 mL/min/mg蛋白 [1] - 小鼠体内药代动力学：单次口服20 mg/kg后，Cmax为7.8 μM，AUC₀₋₂₄h为41.5 μM·h，消除半衰期(t1/2)为4.8小时，口服生物利用度(F)为52.6% [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠单次口服剂量高达 200 mg/kg 的 RIPK1-IN-7 后，未出现死亡或明显的毒性症状（体重减轻、嗜睡），最大耐受剂量 (MTD) > 200 mg/kg [1]
- 亚急性毒性：小鼠接受 RIPK1-IN-7（10-20 mg/kg，口服，每日一次，持续 28 天）治疗后，体重、血常规参数（白细胞、红细胞、血小板）或肝肾功能指标（ALT、AST、肌酐、尿素氮）均未见显著变化。主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）的组织病理学检查未发现异常病变 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
化学分类：RIPK1-IN-7是一种小分子RIPK1抑制剂，属于5-(2,3-二氢-1H-吲哚-5-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺衍生物类[1]
- 作用机制：该化合物与RIPK1的ATP结合口袋结合，竞争性抑制其激酶活性。这阻断了RIPK1介导的坏死性凋亡，并抑制了转移相关蛋白（MMP-2、MMP-9）的表达，从而抑制肿瘤细胞的迁移、侵袭和转移[1] - 靶点背景：RIPK1是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，参与调节细胞死亡（坏死性凋亡）和炎症。 RIPK1 的异常激活促进肿瘤进展和转移，使其成为抗转移治疗的潜在靶点[1] - 治疗潜力：RIPK1-IN-7 是一种强效、选择性强且口服生物利用度高的 RIPK1 抑制剂，在抑制肿瘤转移方面显示出良好的疗效和安全性，尤其适用于转移性乳腺癌和黑色素瘤[1]。 |
| 分子式 |
C25H22F3N5O2
|
|---|---|
| 分子量 |
481.469695568085
|
| 精确质量 |
481.172
|
| CAS号 |
2300982-44-7
|
| PubChem CID |
137321158
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| LogP |
4.4
|
| tPSA |
86.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
755
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
FC(OC1=CC=CC(=C1)CC(N1C2C=CC(C3=CN(CC)C4C3=C(N)N=CN=4)=CC=2CC1)=O)(F)F
|
| InChi Key |
APPXQUDJLJXULP-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H22F3N5O2/c1-2-32-13-19(22-23(29)30-14-31-24(22)32)16-6-7-20-17(12-16)8-9-33(20)21(34)11-15-4-3-5-18(10-15)35-25(26,27)28/h3-7,10,12-14H,2,8-9,11H2,1H3,(H2,29,30,31)
|
| 化学名 |
1-[5-(4-amino-7-ethylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-2,3-dihydroindol-1-yl]-2-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanone
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~129.81 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0770 mL | 10.3849 mL | 20.7697 mL | |
| 5 mM | 0.4154 mL | 2.0770 mL | 4.1539 mL | |
| 10 mM | 0.2077 mL | 1.0385 mL | 2.0770 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
