| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of Ryanodine is the Ca²⁺ release channel (ryanodine receptor) of the sarcoplasmic reticulum in skeletal and cardiac muscle. High-affinity binding sites are present on heavy SR vesicle preparations, with a KD of 20-200 nM for skeletal muscle preparations, and cardiac preparations yield non-linear Scatchard plots indicating multiple receptor sites (0.5 pmol/mg protein, KD = 36 nM and 1.7 pmol/mg protein, KD = 340 nM). [1]
Ryanodine receptor (RyR), specifically the open-form ryanodine receptor calcium release channel found in the sarcoplasmic reticulum of muscle cells. Ryanodine binds with extremely high affinity to the open-form RyR, and its binding was used as a label for the first purification of this class of ion channels, giving the receptor its name. The compound acts as a Ca2+ channel activator that induces the release of intracellular Ca2+. RyRs mediate adenine nucleotide, Ca2+, and caffeine-sensitive release of calcium from intracellular stores. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在被动加载了⁴⁵Ca²⁺的重型骨骼肌SR囊泡中，当将雷诺定(0.01 μM)稀释到含有通道抑制剂Mg²⁺和钌红的培养基中时，囊泡对⁴⁵Ca²⁺具有通透性。当浓度高于10 μM时，⁴⁵Ca²⁺外流受到抑制。当囊泡在37°C下与雷诺定在能使通道部分开放的培养基中孵育时，观察到最佳的刺激效果。使用心肌SR囊泡也获得了类似的结果。[1]
使用缓慢渗透分子L-[³H]葡萄糖时，雷诺定对外部Ca²⁺、Mg²⁺和腺嘌呤核苷酸对外流速率的调节没有显著影响。在 5 μM 游离 Ca²⁺ 和 2.5 mM AMP-PCP 存在下，L-葡萄糖可渗透囊泡以约 25 min⁻¹ 的一级反应速率常数释放 L-[³H]葡萄糖。在低 Ca²⁺ 浓度的培养基中，雷诺定使 L-葡萄糖外流速率增加约 2 倍；当通道几乎完全激活时，雷诺定使速率常数从约 25 min⁻¹ 降低至 10 min⁻¹。[1] 在整合到脂质双层中的分离的 SR Ca²⁺ 通道中，雷诺定使其电导降低一半，并使其锁定在开放的亚电导状态。[2] 体外实验表明，雷诺定是一种强效的肌浆网钙释放调节剂。它能抑制肌浆网释放Ca2⁺，在骨骼肌中的IC₅0值为10 nM，在心肌中的IC₅0值为2.8 nM。当浓度高于250 nM时，雷诺定可诱发缓慢发展的剂量依赖性肌肉收缩，且该收缩不能被5 mM的Co2⁺阻断。该化合物（100-5000 nM，作用30-120分钟）能以剂量依赖的方式不可逆地抑制快肌和慢肌的单次收缩和强直收缩张力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在被动加载了⁴⁵Ca²⁺的重型骨骼肌SR囊泡中，当将雷诺定(0.01 μM)稀释到含有通道抑制剂Mg²⁺和钌红的培养基中时，囊泡对⁴⁵Ca²⁺具有通透性。当浓度高于10 μM时，⁴⁵Ca²⁺外流受到抑制。当囊泡在37°C下与雷诺定在能使通道部分开放的培养基中孵育时，观察到最佳的刺激效果。使用心肌SR囊泡也获得了类似的结果。[1]
使用缓慢渗透分子L-[³H]葡萄糖时，雷诺定对外部Ca²⁺、Mg²⁺和腺嘌呤核苷酸对外流速率的调节没有显著影响。在 5 μM 游离 Ca²⁺ 和 2.5 mM AMP-PCP 存在下，L-葡萄糖可渗透囊泡以约 25 min⁻¹ 的一级反应速率常数释放 L-[³H]葡萄糖。在低 Ca²⁺ 浓度的培养基中，雷诺定使 L-葡萄糖外流速率增加约 2 倍；当通道几乎完全激活时，雷诺定使速率常数从约 25 min⁻¹ 降低至 10 min⁻¹。[1] 在整合到脂质双层中的分离的 SR Ca²⁺ 通道中，雷诺定使其电导降低一半，并将其锁定在开放的亚电导状态。[2] 雷诺定（100-5000 nM，30-120 分钟）以剂量依赖的方式不可逆地抑制慢肌纤维和快肌纤维的收缩以及张力。[1]雷诺定在 250 nM 的剂量下会产生可怕的、缓慢发展的呼吸收缩，5 mM Co2+ 无法阻止这种收缩[1]。 在体内，人们研究了雷诺定对肌肉功能和钙稳态的影响。低浓度时，该化合物维持雷诺定受体钙通道的开放状态；高浓度时，则使其关闭。口服雷诺定可导致小鼠和犬出现嗜睡、肌肉无力和呼吸抑制。高浓度时，该化合物可导致麻痹。雷诺定改变钙动力学的能力会影响肌肉功能，因此已被用于研究肌肉生理学。 |
| 酶活实验 |
文中未描述热位移测定法。然而，本研究利用被动加载囊泡的⁴⁵Ca²⁺外流，研究了雷诺定对肌浆网Ca²⁺释放通道的影响。将重质肌浆网囊泡（5-10 mg蛋白/ml）在22°C下于含有20 mM K Pipes（pH 7）、0.1 M KCl、0.1 mM EGTA和0.2-5.1 mM Ca²⁺的加载介质中孵育。2小时后，向样品中加入0.1倍体积的含有溶解的雷诺定的加载介质，随后分别在22°C和37°C下孵育。通过将囊泡稀释到等渗的未标记 Ca²⁺ 释放通道抑制剂（10 mM Mg²⁺ 加 10 μM 钌红）或通道激活剂（1 mM EGTA 加 0.93 mM Ca²⁺；5 μM 游离 Ca²⁺）培养基中来评估 Ca²⁺ 外流。通过过滤分离未捕获的 Ca²⁺ 和释放的 Ca²⁺，并测定保留的放射性。[1] 使用快速淬灭装置测定初始 ⁴⁵Ca²⁺ 外流速率。将囊泡（2 mg 蛋白/ml）与 1 mM ⁴⁵Ca²⁺ 在 22°C 下孵育 2 小时，然后用 4 倍体积的释放培养基稀释，该释放培养基含有 6.25 mM EGTA、5.55 mM Ca²⁺ 和 0、1.25 或 187.5 μM 雷诺定。在指定时间点，加入 4 倍体积的淬灭溶液（含有 22.5 mM Mg²⁺ 和 22.5 μM 钌红）抑制外流。然后将囊泡过滤并洗涤。[1]
雷诺定对 SR Ca²⁺ 通透性的影响也通过 ⁴⁵Ca²⁺ 内流进行评估。将囊泡（5 mg 蛋白/ml）与 5 μM 雷诺定在含有不同浓度游离 Ca²⁺ 和 AMP-PCP 的培养基中于 37°C 孵育指定时间。然后用 9 倍体积的 ⁴⁵Ca²⁺ 内流培养基稀释囊泡，得到 1 mM ⁴⁵Ca²⁺ 和 0.25 mM AMP-PCP。在 15 秒时，加入 25 倍体积的含有 10 mM Mg²⁺ 和 10 μM 钌红的培养基终止内流，然后进行过滤和洗涤。[1] 体外受体结合试验利用放射性标记的[3H]雷诺定测定其与雷诺定受体的亲和力。该试验使用表达RyR受体的肌肉组织（骨骼肌或心肌）的膜制备物。将不同浓度的未标记雷诺定与膜和固定浓度的[3H]雷诺定一起孵育。在过量未标记雷诺定存在下测定非特异性结合。孵育后，通过过滤分离结合的和游离的放射性配体，并计数放射性。计算结合参数，包括Kd、Bmax、结合速率常数和达到稳态的半衰期。 |
| 细胞实验 |
体外细胞实验中，雷诺定的活性检测采用肌肉细胞系或原代肌细胞。细胞经钙敏感荧光染料（例如Fluo-4、Fura-2）标记后，用不同浓度的雷诺定（100-5000 nM）处理。使用荧光显微镜或酶标仪测量细胞内钙释放。通过测量荧光强度随时间的变化来评估该化合物对钙动力学的影响。此外，还可以使用离体肌肉标本进行肌肉收缩实验，以测量雷诺定处理后肌肉的单次收缩和强直收缩张力。
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| 动物实验 |
本研究采用大鼠趾长伸肌 (EDL) 或比目鱼肌。解剖出一小束包含 10-40 根肌纤维的肌肉，并将其转移至温度控制在 25±0.2°C 的恒温水浴槽中，该水浴槽灌注有正常克氏液。使用间距 5 mm 的铂电极直接刺激肌肉（刺激持续时间 0.5 ms，超最大电压）。采用等长收缩法测量肌肉收缩力。雷诺定溶于双蒸水中配制成 1 mM 的储备液，然后用缓冲液稀释至所需浓度。由于雷诺定的作用在常规洗涤下不可逆，因此每次剂量反应实验仅使用单一浓度。[2] 在挛缩研究中，使用不含 Ca²⁺ 的 EGTA 溶液（不含 CaCl₂ 的正常克氏液加 1 mM EGTA）灌注肌肉以松弛挛缩。对于Co²⁺实验，使用含有5 mM CoCl₂的HEPES缓冲溶液。所有溶液均用95% O₂-5% CO₂平衡，并含有(+)-筒箭毒碱（15×10⁻³ mM），pH值为7.4，温度为25°C。[2]
对于电荷移动实验，采用三层凡士林间隙技术对单根EDL纤维的一段进行电压钳制。从-90 mV的保持电位开始，对纤维施加一个20 mV的超极化控制步骤（35 ms），50 ms后施加一个35 ms的去极化测试步骤。记录含有或不含内源性EGTA（10 mM）的纤维中的电荷移动。向外液中添加雷诺定（5或10 μM）。[2] 雷诺定的体内动物研究是在啮齿动物模型中进行的。该化合物以不同剂量经口服或腹腔注射给药，以评估其对肌肉功能和钙稳态的影响。肌肉收缩力通过离体肌肉制备或体内力测量进行测定。监测的生理参数包括肌肉力量、呼吸功能和一般行为。已在小鼠和犬中进行了毒性和致死剂量研究。雷诺定还被用于使用BIO 14.6心肌病叙利亚仓鼠进行的心血管药理学研究。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
雷诺定的药代动力学特性具有植物生物碱的特征。该化合物分子量为493.55，分子式为C25H35NO9，可溶于乙醇（10 mM）和二甲基亚砜（DMSO，25 mM）。通常将其干燥保存于-20℃，并避光。雷诺定可通过反相高效液相色谱法（HPLC）进行药代动力学研究。该化合物的吸收、分布、代谢和排泄已在其杀虫和药理应用方面进行了研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本研究采用大鼠趾长伸肌 (EDL) 或比目鱼肌。解剖出一小束包含 10-40 根肌纤维的肌肉，并将其转移至温度控制在 25±0.2°C 的恒温水浴槽中，该水浴槽灌注有正常克氏液。使用间距 5 mm 的铂电极直接刺激肌肉（刺激持续时间 0.5 ms，超最大电压）。采用等长收缩法测量肌肉收缩力。雷诺定溶于双蒸水中配制成 1 mM 的储备液，然后用缓冲液稀释至所需浓度。由于雷诺定的作用在常规洗涤下不可逆，因此每次剂量反应实验仅使用单一浓度。[2] 在挛缩研究中，使用不含 Ca²⁺ 的 EGTA 溶液（不含 CaCl₂ 的正常克氏液加 1 mM EGTA）灌注肌肉以松弛挛缩。对于Co²⁺实验，使用含有5 mM CoCl₂的HEPES缓冲溶液。所有溶液均用95% O₂-5% CO₂平衡，并含有(+)-筒箭毒碱（15×10⁻³ mM），pH值为7.4，温度为25°C。[2]
对于电荷移动实验，采用三层凡士林间隙技术对单根EDL纤维的一段进行电压钳制。从-90 mV的保持电位开始，对纤维施加一个20 mV的超极化控制步骤（35 ms），50 ms后施加一个35 ms的去极化测试步骤。记录含有或不含内源性EGTA（10 mM）的纤维中的电荷移动。向外液中添加雷诺定（5或10 μM）。 [2] 毒性概述：雷诺定对开放型雷诺定受体具有极高的亲和力，该受体是一类存在于骨骼肌、平滑肌和心肌细胞中的钙通道。雷诺定与受体的亲和力如此之高，以至于它被用作首次纯化此类离子通道的标记物，并因此得名。在纳摩尔浓度下，雷诺定使受体处于半开放状态；而在微摩尔浓度下，则使其完全关闭。纳摩尔级雷诺定的结合作用会导致细胞质中肌浆网钙库释放钙离子，从而引起强烈的肌肉收缩。 雷诺定被归类为有害危险化合物。它仅供研究用途，不得用于人体或药物用途。该产品的药理学和毒理学特性尚未得到充分研究。操作时应格外小心，未经充分培训或不了解相关危害的人员不得使用该化合物。该化合物未获准用于临床。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
雷诺定与肌浆网的Ca²⁺释放通道结合。Ca²⁺外流的刺激或抑制受二价阳离子浓度、温度、孵育时间和雷诺定浓度的影响。在37°C和0.1 mM Ca²⁺条件下，当雷诺定浓度为0.01 μM时，几乎所有骨骼肌肌浆网释放囊泡在含有Mg²⁺和钌红的培养基中均对⁴⁵Ca²⁺具有通透性。仅在雷诺定浓度超过10 μM时才观察到⁴⁵Ca²⁺外流的抑制。雷诺定的有效性似乎取决于Ca²⁺释放通道处于开放还是关闭状态。 [1]在完整的鼠骨骼肌中，雷诺定（100 nM）可增强咖啡因引起的肌肉收缩，在高浓度（>250 nM）下可诱发一种缓慢的肌肉收缩，该收缩依赖于细胞外钙离子的存在，但不能被5 mM Co²⁺阻断。第二种类型的肌肉收缩，是在无钙EGTA溶液中松弛第一种肌肉收缩后，再添加Ca²⁺所诱发的，该收缩依赖于毫摩尔浓度的细胞外Ca²⁺，并可被5 mM Co²⁺抑制。[2]在30分钟内，10 μM雷诺定对切断的EDL肌纤维中10 mM EGTA内的非对称电荷移动或钙电流几乎没有影响。在不含内源性EGTA的肌纤维中，雷诺定导致肌纤维在21±4分钟内收缩并消失（对照组为46±5分钟），这表明最终的肌纤维消失与雷诺定加剧的肌浆钙升高有关。[2] 雷诺定是一种从南美植物美丽雷诺草（Ryania speciosa）中分离得到的杀虫生物碱。它是一种雷诺定受体调节剂和植物源杀虫剂。它是一种生物碱，也是一种环状半缩醛。据报道，雷诺定存在于甘蓝型油菜（Brassica napus）和美丽雷诺草中，并且已有相关数据。雷诺定是一种甲基吡咯酸酯，来源于雷诺定属植物。它破坏雷诺定受体钙释放通道，从而改变肌浆网的钙释放，最终导致肌肉收缩的改变。它曾被用于杀虫剂中。目前，它常与硫代丙酮酸和其他钙ATPase抑制剂联合使用，以抑制钙离子进入肌浆网。
雷诺定是一种研究级植物生物碱和雷诺定受体调节剂。其同义词包括雷诺定和雷诺尼亚。经高效液相色谱法（HPLC）测定，其纯度通常≥99%。该化合物是钙离子通道激活剂，也是肌浆网钙离子释放的强效抑制剂。雷诺定受体介导腺嘌呤核苷酸、钙离子和咖啡因敏感的钙释放。该化合物被用作研究工具，用于研究钙信号传导、肌肉收缩和雷诺定受体功能。尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C25H35NO9
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|---|---|
| 分子量 |
493.54700
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| 精确质量 |
493.231
|
| CAS号 |
15662-33-6
|
| PubChem CID |
11317883
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
714.2±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
385.7±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.4 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.685
|
| LogP |
3.86
|
| tPSA |
172.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
7
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
35
|
| 分子复杂度/Complexity |
1010
|
| 定义原子立体中心数目 |
11
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| SMILES |
O[C@@]1([C@@]([C@@]2(O)O3)4C)[C@@]35[C@](O)(CC[C@H](C)[C@H]5O)[C@@](C2)(C)[C@@]1([C@H](OC(C6=CC=CN6)=O)[C@]4(O)C(C)C)O
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| InChi Key |
JJSYXNQGLHBRRK-SFEDZAPPSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H35NO9/c1-12(2)22(31)17(34-16(28)14-7-6-10-26-14)23(32)18(4)11-21(30)19(22,5)25(23,33)24(35-21)15(27)13(3)8-9-20(18,24)29/h6-7,10,12-13,15,17,26-27,29-33H,8-9,11H2,1-5H3/t13-,15+,17+,18-,19+,20-,21-,22+,23+,24+,25+/m0/s1
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| 化学名 |
[(1R,2R,3S,6S,7S,9S,10R,11S,12R,13S,14R)-2,6,9,11,13,14-hexahydroxy-3,7,10-trimethyl-11-propan-2-yl-15-oxapentacyclo[7.5.1.01,6.07,13.010,14]pentadecan-12-yl] 1H-pyrrole-2-carboxylate
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| 别名 |
ryanodine; 15662-33-6; Ryanodin; Ryanodol, 3-(1H-pyrrole-2-carboxylate); Ryania;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~101.31 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0261 mL | 10.1307 mL | 20.2614 mL | |
| 5 mM | 0.4052 mL | 2.0261 mL | 4.0523 mL | |
| 10 mM | 0.2026 mL | 1.0131 mL | 2.0261 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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