| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
REV-ERBα(EC50 = 0.47 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
SR8278 对 REV-ERBα 转录抑制活性的 EC50 为 0.47μM[1]。 SR8278在结构上与激动剂相似，但在共转染试验中阻断了GSK4112增强REV-ERBα依赖性抑制的能力。此外，GSK4112抑制参与糖异生的REV-ERBα靶基因的表达，而SR8278刺激这些基因的表达。因此，SR8278代表了一种探测REV-ERB功能的独特化学工具，可以作为进一步优化的起点，以开发具有探索昼夜节律和代谢功能能力的REV-ERB拮抗剂[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在 6-OHDA 损伤的小鼠中，SR8278（慢速微注射；20 μg/小鼠）可恢复其昼夜节律的情绪相关行为，并以昼夜节律时间依赖性方式具有抗抑郁和抗焦虑作用 [1]。慢速显微注射（SR8278；20 μg/小鼠）丰富了 REV-ERBα 和 NURR1 识别的 R/N 基序，同时恢复了两种蛋白与酪氨酸羟化酶启动子的结合活性 [1]。
SR8278对REV-ERBα活性的药理学抑制恢复了PD小鼠模型中的昼夜节律情绪相关行为。 SR8278微量注射改变VTA中Rev erbα和Nurr1的剩余DA能神经元特异性转录水平。 SR8278微量注射可恢复黎明时VTA中REV-ERBα和NURR1与TH启动子和TH蛋白水平结合活性的拮抗串扰。 SR8278处理在黎明时诱导REV-ERBα和NURR1结合基序的富集。[3] |
| 酶活实验 |
稳定性[2]
测量了SR8278在血浆中的长期（-80°C下10天）和三次冻融循环稳定性。稳定性表示为不同操作后的浓度与时间零点的浓度。 |
| 细胞实验 |
HEK293细胞在37°C、5%CO2的条件下，在添加了10%胎牛血清的Dulbecco改良Eagles培养基（DMEM）中维持。HepG2细胞在37°C、5%CO2的条件下，在添加了10%胎牛血清的最低必需培养基中维持和常规增殖。转染前24小时，将HepG2细胞以15×103个细胞/孔的密度铺在96孔板上。使用LipofectamineTM 2000（Invitrogen）进行转染。转染后16小时，用载体或化合物处理细胞。治疗后24小时，使用Dual-GloTM萤光素酶测定系统测量萤光素酶活性。所示值代表四个独立转染孔的平均值±S.E。实验重复了至少三次。REV-ERBα和报告子结构已在前面描述[1]。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 6-OHDA损伤小鼠[1]
剂量： 20 μg/只小鼠 给药途径： 缓慢微量注射；20 μg/只小鼠 实验结果： 6-OHDA损伤小鼠的情绪相关行为缺陷得到恢复。腹侧被盖区（VTA）中残存的多巴胺能神经元特异性REV-ERBα和Nurr1转录水平发生改变。REV-ERBα和NURR1结合活性的恢复与VTA中酪氨酸羟化酶（TH）启动子和TH蛋白水平的拮抗性串扰有关。黎明诱导 REV-ERBα 和 NURR1 结合基序的富集。 SR8278 的局部注射 [3] 在每次行为学测试前 3 小时，于昏暗红光下将 SR8278 局部注射到中脑腹侧被盖区 (VTA)。我们遵循先前报道的时间安排，进行动物操作和在行为学测试前 3 小时缓慢微量注射 SR8278 到 VTA。SR8278 溶解于乙醇中，浓度为 50 µg/µL。使用连接 10 µL Hamilton 注射器的 33 号注射套管，以 0.1 µL/min 的速率将 SR8278（20 µg/只小鼠）或相应的溶剂（乙醇）直接微量注射到 VTA 中。对于微量输注，小鼠用戊巴比妥钠（50 mg/kg，腹腔注射）麻醉，固定在立体定位仪上，单侧植入26号不锈钢套管至中脑腹侧被盖区（VTA）（AP −3.2 mm，ML −0.5 mm，DV −3.5 mm）。每个引导套管内插入一根32号假套管以防止堵塞。将固定螺钉植入颅骨后，用树脂水泥将整个装置固定在颅骨上。[3] 药代动力学研究[2] 在给予SR8278之前，按照先前发表的方法，将套管插入颈静脉，用于注射制剂和采集血液。在进行颈静脉手术前，使用麻醉混合液（氯胺酮 50 mg/mL、赛拉嗪 3.3 mg/mL 和乙酰丙嗪 3.3 mg/mL）对大鼠进行麻醉，并在手术后皮下注射卡洛芬[2]。 通过颈静脉插管向大鼠注射 SR8278，剂量为 2 mg/kg。分别于给药后 5、10、15、30、45 分钟以及 1、1.5、2、4 和 6 小时从颈静脉插管抽取血样（200 μL）。每次取样时，均用等体积的生理盐水补充血液。血液样本立即在 4 °C 下离心，分离血浆和血细胞，并将血浆样本储存在 −80 °C 直至分析。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
采用WinNonlin 3.3软件，通过三室模型计算SR8278的药代动力学参数，结果见表4。各时间点的预测浓度如图5所示。如图所示，预测浓度与实测值接近，表明三室药代动力学模型与数据拟合良好。静脉给药后，正常大鼠和糖尿病大鼠体内SR8278的初始浓度（C0）分别为2410.25 ± 202.36 ng/mL和3742.11 ± 1300.21 ng/mL。血浆中药物浓度较低可能是由于药物迅速分布到除中央室以外的其他室室所致。 SR8278在正常大鼠和糖尿病大鼠体内的分布容积(V)分别为44401.58 ± 2106.63 mL/kg和43516.94 ± 22982.75 mL/kg。此外，由于其消除速率常数(K10)较快，SR8278的消除半衰期(t1/2)也极短，在正常大鼠中仅为0.17 ± 0.084 h，在糖尿病大鼠中仅为0.11 ± 0.04 h。SR8278在正常大鼠和糖尿病大鼠体内的AUC值分别为608.33 ± 295.25 ng·h/mL和598.59 ± 276.92 ng·h/mL。 SR8278 的血液暴露量有限且清除速度快，这可能是其临床应用中的一个主要问题。[2]
在 -80 °C 下对血浆中 SR8278 的稳定性进行了评估，保存时间为 10 天，并经过三次冻融循环后进行评估（表 3）。所有样品的回收率在各种稳定性测试后均在 90.82% 至 95.75% 之间，表明血浆样品中的 SR8278 在储存条件下稳定。此外，我们还测定了 SR8278 在 50% 甲醇溶液中室温保存 24 小时后的稳定性。结果表明，SR8278 在 50% 甲醇溶液中稳定超过 24 小时（表 3），从而为完成检测提供了充足的时间。方法验证参数（包括回收率和活性）的良好结果也表明，SR8278 在样品制备和分析完成过程中均保持稳定。 [2] 采用经验证的分析方法测定了SR8278在正常大鼠和糖尿病大鼠体内的药代动力学行为。两组大鼠SR8278的平均血浆浓度-时间曲线如图5所示。静脉注射SR8278（2 mg/kg）后，糖尿病大鼠在各时间点的血浆SR8278浓度均略高于正常大鼠。然而，这些差异无统计学意义，表明糖尿病对SR8278的体内行为无影响。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
昼夜节律与代谢紊乱之间存在关联。活性成分SR8278能够竞争性结合并抑制核受体Rev-erb（哺乳动物昼夜节律系统的主要调节因子），从而调节生物体的代谢。然而，我们对SR8278的药代动力学(PK)特征了解甚少。本文描述了一种灵敏且可重复的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法，用于体内SR8278的定量分析。SR8278的线性范围和定量限(LOQ)分别为30-3000 ng/mL和6 ng/mL。日间和日内变异系数均在10%以内。该UPLC-MS/MS方法成功用于表征正常大鼠和糖尿病大鼠静脉注射2 mg/kg剂量SR8278后的药代动力学行为。在正常大鼠和糖尿病大鼠中，SR8278的药代动力学参数未观察到显著差异。具体而言，正常大鼠和糖尿病大鼠的SR8278血浆浓度-时间曲线下面积（AUC）、初始血浆浓度（C0）、消除半衰期（t1/2）和清除率（CL）分别为608.33 ± 295.25 vs. 598.59 ± 276.92 ng·h/mL、2410.25 ± 202.36 vs. 3742.11 ± 1300.21 ng/mL、0.17 ± 0.08 vs. 0.11 ± 0.04 h和3330.83 ± 1609.48 vs. 3364.81 ± 1111.38 mL/kg·h。总之，我们首次成功建立并验证了一种UPLC-MS/MS方法，该方法具有线性范围宽、定量限低、样品用量少（10 μL）、分析速度快（4 min）和回收率高（>80%）等优点。该方法还用于阐明SR8378在大鼠体内的药代动力学特征。SR8378在正常大鼠和糖尿病大鼠体内表现出相同的药代动力学行为，表明糖尿病可能对SR8378在体内的分布、代谢和/或消除影响甚微或无影响，这对于未来的临床研究具有重要意义。[2]帕金森病是一种以进行性多巴胺能神经元丢失为特征的神经退行性疾病。帕金森病患者的运动障碍已得到充分证实，但非运动症状，包括与昼夜节律紊乱相关的情绪障碍，也是常见的特征。一种常见的现象是“日落综合征”，其特征是在特定时间（黄昏）出现神经精神症状，导致生活质量严重下降。本研究旨在阐明帕金森病中日落综合征的潜在机制及其与生物钟的分子联系。我们发现，作为帕金森病小鼠模型的6-羟基多巴胺（6-OHDA）损伤小鼠仅在黎明时分（相当于人类的黄昏）表现出抑郁和焦虑样行为的增加。给予REV-ERBα拮抗剂SR8278后，在6-OHDA损伤小鼠中以昼夜节律依赖的方式发挥抗抑郁和抗焦虑作用，并恢复了情绪相关行为的昼夜节律。 6-OHDA损伤改变了多巴胺能特异性Rev-erbα和Nurr1的转录，以及REV-ERBα和NURR1（酪氨酸羟化酶启动子区域的上游核受体）的非典型结合活性。SR8278治疗恢复了REV-ERBα和NURR1与酪氨酸羟化酶启动子的结合活性，并诱导了REV-ERBα和NURR1识别的R/N基序的富集，ATAC测序结果证实了这一点；因此，在6-OHDA注射小鼠的腹侧被盖区，酪氨酸羟化酶的表达升高，尤其是在黎明时分。这些结果表明，REV-ERBα是一个潜在的治疗靶点，其拮抗剂SR8278是一种治疗与昼夜节律紊乱相关的情绪障碍（即帕金森病中的日落综合征）的潜在药物。[3]
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| 分子式 |
C18H19NO3S2
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|---|---|
| 分子量 |
361.47
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| 精确质量 |
361.081
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| 元素分析 |
C, 59.81; H, 5.30; N, 3.87; O, 13.28; S, 17.74
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| CAS号 |
1254944-66-5
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| 相关CAS号 |
1254944-66-5
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| PubChem CID |
53393127
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| LogP |
3.538
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| tPSA |
100.15
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
473
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UIEBLUZPSFAFOC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H19NO3S2/c1-3-22-18(21)14-10-12-6-4-5-7-13(12)11-19(14)17(20)15-8-9-16(23-2)24-15/h4-9,14H,3,10-11H2,1-2H3
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| 化学名 |
ethyl 2-{[5-(methylsulfanyl)thiophen-2-yl]carbonyl}-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylate
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| 别名 |
SR8278; SR 8278; ethyl 2-{[5-(methylsulfanyl)thiophen-2-yl]carbonyl}-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylate; ethyl 2-(5-methylsulfanylthiophene-2-carbonyl)-3,4-dihydro-1H-isoquinoline-3-carboxylate; CHEMBL4754504; ethyl 2-(5-(methylthio)thiophene-2-carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylate; SR-8278
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~276.64 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7665 mL | 13.8324 mL | 27.6648 mL | |
| 5 mM | 0.5533 mL | 2.7665 mL | 5.5330 mL | |
| 10 mM | 0.2766 mL | 1.3832 mL | 2.7665 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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