| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
REV-ERBα(IC50 = 790 nM); REV-ERBβ(IC50 = 560 nM)
In HEK293 cells expressing chimeric Gal4 DNA-binding domain (DBD)-REV-ERB ligand-binding domain (LBD) α or β and a Gal4-responsive luciferase reporter gene (REV-), SR9011 dose-dependently boosts REV-ERB-dependent repressor activity. REV-ERBβ IC50 = 560 nM, ERBα IC50 = 790 nM. SR9011 potently suppressed transcription (SR9011 IC50=620 nM) in a co-transfection test using full-length REV-ERBα and a luciferase reporter driven by the Bmal1 promoter. SR9011 suppresses the expression of BMAL1 mRNA in HepG2 cells in a manner that is dependent on REV-ERBα/β [1]. In addition, SR9011 prevents the growth of breast cancer cell lines irrespective of their ER or HER2 status. It seems that SR9011 stops breast cancer cells' cell cycle before they reach the M phase. Since cyclin A (CCNA2) was found to be a direct target gene of REV-ERB, cell cycle arrest may be mediated by SR9011's suppression of this cyclin's expression. G0/G1 phase cells increased and S and G2/M phase cells decreased after treatment with SR9011, indicating that REV-ERB activation may reduce the transition from G1 to S phase and/or from S phase to G2/M phase [2]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在表达嵌合 Gal4 DNA 结合结构域 (DBD)-REV-ERB 配体结合结构域 (LBD) α 或 β 和 Gal4 响应性荧光素酶报告基因 (REV-) 的 HEK293 细胞中，SR9011 剂量依赖性增强 REV-ERB 依赖性抑制活性。 REV-ERBβ IC50 = 560 nM，ERBα IC50 = 790 nM。在使用全长 REV-ERBα 和 Bmal1 启动子驱动的荧光素酶报告基因的共转染测试中，SR9011 有效抑制转录（SR9011 IC50 = 620 nM）。 SR9011 以依赖于 REV-ERBα/β 的方式抑制 HepG2 细胞中 BMAL1 mRNA 的表达 [1]。此外，SR9011 可以阻止乳腺癌细胞系的生长，无论其 ER 或 HER2 状态如何。 SR9011 似乎可以在乳腺癌细胞进入 M 期之前停止其细胞周期。由于细胞周期蛋白 A (CCNA2) 被发现是 REV-ERB 的直接靶基因，因此细胞周期停滞可能是通过 SR9011 抑制该细胞周期蛋白表达来介导的。 SR9011治疗后G0/G1期细胞增加，S和G2/M期细胞减少，表明REV-ERB激活可能减少从G1期到S期和/或从S期到G2/M期的转变[2]。
在 HEK293 细胞中使用嵌合 Gal4 DNA 结合结构域-REV-ERB 配体结合结构域报告系统进行的实验中，SR9011 剂量依赖性地增加 REV-ERB 依赖性抑制活性，对 REV-ERBα 和 REV-ERBβ 的 IC50 值分别为 790 nM 和 560 nM。 在使用全长 REV-ERBα 和由 Bmal1 启动子驱动的荧光素酶报告基因的共转染实验中，SR9011 能有效抑制转录，IC50 为 620 nM。 SR9011 以 REV-ERBα/β 依赖的方式抑制 HepG2 细胞中 BMAL1 mRNA 的表达。 在生化实验中，SR9011 增加了核受体共抑制子 NCoR 的 CoRNR 盒肽段的募集，这与直接激动剂活性一致。 SR9011 可逆地抑制了来自 Per2:luc 报告基因小鼠的 SCN 外植体的昼夜节律振荡，降低了振荡幅度但不影响周期。 在 Per2:luc 成纤维细胞中也观察到了类似的对昼夜节律振荡的影响。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于 SR9011 表现出相当大的血浆暴露量，因此在六天内给予不同剂量 SR9011 的小鼠肝脏中研究了对 REV-ERB 敏感的基因表达。响应 SR9011，REV-ERB 靶基因纤溶酶原激活剂抑制剂 1 型 (Serpine1) 显示剂量依赖性表达抑制。甾醇反应元件结合蛋白 (Srepf1) 和胆固醇 7α-羟化酶 (Cyp7a1) 的基因同样被证明对 REV-ERB 有反应，并且通过增加 SR9011 剂量而受到剂量依赖性抑制。在 D:D 环境中 12 天后，在 CT6（Rev-erbα 表达峰值）时给小鼠注射单剂量的 SR9011 或载体。车辆注射不会干扰昼夜节律运动活动。然而，SR9011 治疗导致受试者在黑暗时期丧失运动活动能力。随后的昼夜节律周期恢复正常，这与一天内药物清除一致。 SR9011 依赖性抑制 REV-ERB 反应基因 Srebf1 的体内功效 (ED50 = 56 mg/kg) (ED50 = 67 mg/kg) 与 SR9011 依赖性减少小鼠滚轮运行的效果相当连续黑暗条件下的行为[1]。
在持续黑暗条件下，于昼夜时间 CT6 对小鼠单次腹腔注射 SR9011（100 mg/kg），导致随后主观暗期的运动活动完全丧失，正常活动在下一个昼夜周期恢复。 对跑轮行为的这种影响是剂量依赖性的，ED50 为 56 mg/kg。 在 12:12 明暗循环条件下，单次注射 SR9011 导致夜间运动活动开始时间延迟 1-3 小时，而非完全停止。 在 CT0 单次注射 SR9011（100 mg/kg，腹腔）改变了小鼠下丘脑中核心时钟基因（Per2, Cry2, Bmal1, Npas2, Clock）的昼夜表达模式。 对 Balb/c 或 C57BL/6 小鼠慢性给予 SR9011（100 mg/kg，腹腔，每日两次）10-12 天，导致由于脂肪量减少而体重下降，但不影响总食物摄入量。 在 CLAMS 实验中，SR9011 处理使耗氧量增加约 5%，表明能量消耗增加，尽管运动量减少了 15%。 SR9011 给药后，观察到夜间耗氧量峰值延迟 1-3 小时。 SR9011 改变了肝脏（例如抑制 Serpine1, Cyp7a1, Srebf1, Srebf2, Scd1, Ppargc1a/b）、骨骼肌（例如增加 Cpt1b, Fatp1, Ppargc1b, Ucp3, Hk1, Pkm2）和白色脂肪组织（例如抑制 Dgat1, Dgat2, Mgat, Plin1, Hsl）中代谢基因的昼夜表达。 在瘦型 C57BL/6 小鼠中，SR9011 处理（100 mg/kg，腹腔，每日两次，持续 10 天）降低了空腹血浆甘油三酯和总胆固醇水平。[1] |
| 酶活实验 |
在这项研究中，研究人员开发了两种REV-ERBα/β激动剂，它们具有足够的血浆/脑暴露，可以在体内评估其效果。SR9009和SR9009（图1a，补充图1）均剂量依赖性地增加了在表达嵌合Gal4 DNA结合结构域（DBD）-REV-ERB配体结合结构域α或β和Gal4反应性萤光素酶报告子的HEK293细胞中评估的REV-ERB依赖性阻遏物活性（图1b）（SR9009:REV-ERBαIC50=670 nM，REV-ERBβIC50=800 nM；SR9011:REV-ERB a IC50=790 nM，REV-ERBβIC50=560 nM）。REV-ERB配体GSK4112（补充图2）没有暴露于血浆中，其活性有限（图1b）。在使用全长REV-ERBα以及由Bmal1启动子驱动的萤光素酶报告子的共转染试验中，SR9011和SR9009均有效地抑制了转录（图1c）（SR9009 IC50=710 nM；SR9011 IC50=620 nM）。SR9011和SR9009以REV-ERBα/β依赖的方式抑制HepG2细胞中BMAL1 mRNA的表达（补充图3）。与这两种化合物作为REV-ERB的直接激动剂的作用一致，我们注意到，使用生化分析，这些化合物增加了NCoR的CoRNR盒肽片段的募集（补充图4）。SR9009与REV-ERBα的直接结合也通过圆二色谱分析得到证实（补充图5）（Kd=800 nM）。这两种化合物都没有在其他核受体上表现出活性12,13（补充图6）[1]。
使用生化实验测量在 SR9011 存在下，核受体共抑制子 NCoR 的 CoRNR 盒肽段向 REV-ERB 的募集情况，结果显示募集增加，这与激动剂活性一致。[1] |
| 细胞实验 |
HEK293 细胞在 96 孔板（1×106/孔）中生长，并使用 Lipofectamine 瞬时转染。每孔用总共 200 ng DNA 转染细胞，其中包含 pGL4 mIL-17 萤火虫荧光素酶报告基因构建体、pGL4 mIL-17 + CNS-5 萤火虫荧光素酶报告基因构建体或 pGL4 mIL-17 2kB RORE 突变体（100 ng/孔）、肌动蛋白启动子海肾荧光素酶报告基因（50 ng/孔）以及单独的对照载体或测试 DNA（50 ng/孔的全长 RORα 或全长 RORγ）。所有 48 种人类核受体均出现在特异性测定中，SR9009 的测试浓度为 20 μM。该测定的形式是在 HEK293 细胞中使用 Gal4 DNA 结合域-核受体融合物进行共转染测定[1]。
将编码嵌合 Gal4 DNA 结合结构域与 REV-ERBα 或 REV-ERBβ 配体结合结构域融合蛋白的载体，以及一个 Gal4 响应性荧光素酶报告基因共转染到 HEK293 细胞中。用 SR9011 处理细胞，测量荧光素酶活性以评估 REV-ERB 依赖性抑制活性。 对于全长受体实验，将全长 REV-ERBα 的表达载体和由 Bmal1 启动子驱动的荧光素酶报告质粒共转染到 HEK293 细胞中。用 SR9011 处理后，测量荧光素酶活性以评估转录抑制。 用 SR9011 处理 HepG2 细胞，通过 QPCR 定量 BMAL1 mRNA 水平以评估 REV-ERB 依赖性基因抑制。 培养来自 Per2:luc 报告基因小鼠的 SCN 外植体或成纤维细胞，并用 SR9011 处理。随时间监测生物发光，以评估该化合物对昼夜节律振荡幅度和周期的影响。[1] |
| 动物实验 |
在昼夜节律基因表达实验中，雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）分别饲养于光暗周期（12小时：12小时）或持续黑暗条件下。在昼夜节律时间（CT）0，小鼠腹腔注射单剂量100 mg/kg SR9009或SR9011，并在CT0、CT6、CT12和CT18处死各组小鼠（n=6）。采用实时定量PCR（qPCR）检测基因表达。[1]
在持续黑暗条件下进行昼夜节律行为和基因表达研究时，C57BL/6小鼠饲养于滚轮笼中，先使其适应标准光暗周期，然后转移至持续黑暗（D:D）条件下。在12天的昼夜循环（D:D）条件下饲养12天后，于昼夜节律时间（CT）6或CT0时，分别腹腔注射SR9011（100 mg/kg）或载体。监测小鼠的运动活性，并在不同的CT时间点采集下丘脑组织，通过qPCR进行基因表达分析。 在12:12光暗循环的研究中，小鼠维持在该循环条件下，并接受单次腹腔注射SR9011（100 mg/kg）。评估小鼠的运动活性和下丘脑基因表达。 在慢性代谢研究中，Balb/c或C57BL/6小鼠腹腔注射SR9011，剂量为100 mg/kg，每日两次（CT0和CT12），持续10至12天。监测体重、体成分（通过双能X射线吸收法DEXA测定）和代谢参数（通过CLAMS测定）。 为了分析代谢组织中的基因表达谱，C57BL/6小鼠在CT0时接受单次腹腔注射SR9011（100 mg/kg）。分别在CT0、CT6、CT12和CT18时处死小鼠，并收集肝脏、骨骼肌和白色脂肪组织进行qPCR分析。 为了研究瘦小鼠的降脂效果，C57BL/6小鼠腹腔注射SR9011（100 mg/kg），每日两次，连续10天，之后测量空腹血浆甘油三酯和胆固醇水平。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
该化合物在小鼠体内显示出合理的血浆暴露量，从而可以评估其体内效应。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
接受SR9011治疗的小鼠未表现出力量下降，并在旷场实验中继续活动。
治疗组小鼠的血常规检查未显示明显的毒性迹象。 尽管猴子在短期内体重显著增加（在讨论REV-ERB激动剂的一般特性时提及），但在所测试的任何剂量的REV-ERB激动剂中，均未观察到肝转氨酶水平升高超过基线水平2倍以上。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SR-9011 是一种 REV-ERB 激动剂。研究表明，SR-9011 对癌细胞和癌基因诱导的衰老细胞（包括黑素细胞痣）具有特异性杀伤作用，且对正常细胞或组织的活力无影响。
同步行为和代谢过程的节律对于心血管健康和预防代谢性疾病至关重要。核受体 REV-ERB-α 和 REV-ERB-β 在调节驱动活动和代谢节律的核心时钟蛋白的表达中发挥着不可或缺的作用。本文描述了具有体内活性的强效合成 REV-ERB 激动剂的鉴定。给予合成 REV-ERB 配体可改变小鼠的昼夜节律行为以及下丘脑中核心时钟基因表达的昼夜节律模式。肝脏、骨骼肌和脂肪组织中一系列代谢基因的昼夜节律表达模式也发生改变，导致能量消耗增加。用 REV-ERB 激动剂治疗饮食诱导的肥胖小鼠，通过减少脂肪量和显著改善血脂异常和高血糖来减轻肥胖。这些结果表明，靶向昼夜节律的合成REV-ERB配体可能对治疗睡眠障碍和代谢性疾病有益。[1] SR9011是核受体REV-ERBα和REV-ERBβ的合成激动剂，REV-ERBα和REV-ERBβ是昼夜节律时钟调控机制的关键组成部分。 通过靶向REV-ERB，SR9011可以调节昼夜节律行为、核心时钟基因表达以及外周组织中众多代谢基因的昼夜节律模式。 其作用包括增加能量消耗、促进肌肉中脂肪酸和葡萄糖的氧化、抑制肝脏中的脂肪生成和胆固醇合成，以及减少脂肪组织中甘油三酯的合成和储存。 这些作用导致小鼠模型中脂肪减少和血浆脂质谱改善。 该研究表明，像SR9011这样的合成REV-ERB配体可能对治疗睡眠障碍和代谢性疾病有益。 SR9011可能具有治疗睡眠障碍（通过调节昼夜节律相位）和代谢性疾病（通过增加能量消耗和减少肥胖）的潜在用途。[1] |
| 分子式 |
C23H31CLN4O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
479.04
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|
| 精确质量 |
478.18
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| 元素分析 |
C, 57.67; H, 6.52; Cl, 7.40; N, 11.70; O, 10.02; S, 6.69
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| CAS号 |
1379686-29-9
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| 相关CAS号 |
SR9011 hydrochloride;2070014-94-5
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| PubChem CID |
57394021
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
642.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
342.6±30.1 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.595
|
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| LogP |
5.74
|
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| tPSA |
110
|
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
600
|
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
PPUYOYQTTWJTIU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H31ClN4O3S/c1-2-3-4-12-25-23(29)27-13-11-19(16-27)15-26(14-18-5-7-20(24)8-6-18)17-21-9-10-22(32-21)28(30)31/h5-10,19H,2-4,11-17H2,1H3,(H,25,29)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0875 mL | 10.4375 mL | 20.8751 mL | |
| 5 mM | 0.4175 mL | 2.0875 mL | 4.1750 mL | |
| 10 mM | 0.2088 mL | 1.0438 mL | 2.0875 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SR9011 and SR9009 are synthetic REV-ERB agonists with activityin vivo.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8 |
Synthetic REV-ERB ligands alter circadian behavior and the pattern of expression of core clock genes.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
Activation of REV-ERB by SR9011in vivoresults in an increase in energy expenditure and weight loss.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
REV-ERB ligands alter the pattern of circadian expression of metabolic genes in the liver, skeletal muscle and adipose tissue.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
SR9009 treatment results in a decrease in fat mass and in plasma lipids in diet-induced obese mice.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
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