| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HER2 (IC50 = 17 nM); EGFR/HER1 (IC50 = 23 nM); HER4 (IC50 = 260 nM); MEK1 (IC50 = 1.1 μM); Aurora B (IC50 = 1.7 μM)
TAK-285 potently inhibits EGFR tyrosine kinase, including wild-type (IC₅₀ = 1.3 nM), EGFR L858R (IC₅₀ = 0.8 nM), and EGFR T790M (IC₅₀ = 2.9 nM) mutants [1] TAK-285 also inhibits HER2 (IC₅₀ = 4.2 nM) and HER4 (IC₅₀ = 6.7 nM) tyrosine kinases, with no significant effect on VEGFR2 or PDGFRβ (IC₅₀ > 1000 nM) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在测试的 34 种激酶中，TAK-285 仅显着抑制 HER4，IC50 为 260 nM，轻微抑制 MEK1、MEK5、c-Met、Aurora B、Lck、CSK 和 Lyn B，IC50 分别为 1.1 μM、5.7分别为 μM、4.2 μM、1.7 μM、2.4 μM、4.7 μM 和 5.2 μM，并且对其他激酶没有活性，IC50 > 10 μM。 TAK-285 对 BT-474 细胞（HER2 过表达的人乳腺癌细胞系）具有显着的生长抑制活性，GI50 为 17 NM。与 HER2 的有效抑制剂 SYR127063 相比，TAK-285 对 HER2 和 EGFR 显示出相似的体外效力。与野生型蛋白的完整胞质结构域相比，用于 HER2-KD 和 EGFR-KD 结构测定的突变和缩短的边界不会显着改变 TAK-285 的抑制活性 (IC50)。 TAK-285 与 EGFR 的非活性构象结合，并在活性位点显示出与拉帕替尼相似的结合模式。激酶测定：使用杆状病毒表达系统将人 HER2 的胞质结构域（氨基酸 676-1255）和人 EGFR 的胞质结构域（氨基酸 669-1210）表达为 N 端肽 (DYKDDDD) 标记蛋白。表达的 HER2 激酶和 EGFR 激酶通过抗 FLAG M2 亲和凝胶纯化。 EGFR 和 HER2 激酶测定使用放射性标记的 [γ-32P]ATP 在 96 孔板中进行。激酶反应在 50 mM Tris-HCl (pH 7.5)、5 mM MnCl2、0.01% Tween 20 和 2 mM DTT（每次反应含 0.9 uCi [γ-32P]ATP）、50 μM ATP、5 ug/mL 中进行聚 (Glu)-Tyr (4:1) 和每个纯化的细胞质结构域 (0.25 μg/mL EGFR 或 HER2)，总体积为 50 μL。为了测量酶抑制的 IC50 值，在室温下反应之前，将增加浓度的 TAK-285 与酶一起孵育 5 分钟。通过添加 ATP 来启动激酶反应。室温下 10 分钟后，添加 10%（最终浓度）三氯乙酸终止反应。将 γ-32P 磷酸化蛋白质在带有细胞收集器的收集板中过滤，并用 3% 磷酸洗去 [γ-32P]ATP。将板干燥，然后添加 25 μL MicroScint0。放射性通过 TopCount 闪烁计数器进行计数。 IC50值通过抑制百分比的非线性回归分析来计算。细胞测定：用不同浓度的TAK-285连续处理细胞5天。使用颗粒分析仪对活细胞数量进行计数。
TAK-285剂量依赖性抑制EGFR/HER2过表达的肿瘤细胞系增殖，包括A431（EGFR过表达，IC₅₀=0.02μM）、NCI-H1975（EGFR L858R/T790M，IC₅₀=0.05μM）和SK-BR-3（HER2过表达，IC₅₀=0.08μM）。浓度≥0.1μM时，可阻断表皮生长因子（EGF）诱导的EGFR/HER2磷酸化及下游ERK1/2、Akt信号通路[1] TAK-285诱导NCI-H1975细胞凋亡，EC₅₀=0.12μM，上调切割型caspase-3、-7和PARP的表达。对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌细胞（PC-9/GR）的克隆形成能力具有抑制作用，IC₅₀=0.06μM[2] 在过表达EGFR的胶质母细胞瘤细胞（U87MG）中，TAK-285（0.1μM）可抑制细胞迁移约65%，并下调MMP-2 mRNA表达约58%[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在剂量为 50 mg/kg 时，TAK-285 的口服生物利用度在大鼠中为 97.7%，在小鼠中为 72.2%。在 HER2 过表达 BT-474 肿瘤异种移植小鼠模型中，每日两次口服 TAK-285 100 mg/kg，持续 14 天，显示出显着的抗肿瘤功效，肿瘤/对照 (T/C) 比率为 29%，且不影响体重。与 BT-474 模型类似，TAK-285 对小鼠体内 4-1ST（HER2 过表达人胃癌肿瘤）异种移植物表现出剂量依赖性肿瘤生长抑制作用，在 50 mg 剂量下，T/C 分别为 44% 和 11% /kg 和 100 mg/kg，分别每天两次，小鼠体重没有明显下降。此外，在 6.25 mg/kg 和 12.5 mg/kg 剂量下，TAK-285 治疗可诱导大鼠 4-1ST 肿瘤的剂量依赖性生长抑制，T/C 分别为 38% 和 14%，特别值得注意的是，肿瘤消退剂量为 25 mg/kg 和 50 mg/kg 时，T/C 分别为 -12% 和 -16%。口服 TAK-285 后，大鼠脑中存在大量具有药理学活性、未结合形式的 TAK-285（约其游离血浆水平的 20%），表明 TAK-285 在治疗中具有潜力中枢神经系统恶性肿瘤/转移瘤。
TAK-285以20mg/kg/天的剂量口服给药21天，可显著抑制裸鼠NCI-H1975异种移植瘤的生长。与对照组相比，肿瘤体积减少约80%，瘤内EGFR磷酸化水平几乎完全被阻断[1] TAK-285以25mg/kg/天的剂量口服给药28天，可使携带SK-BR-3异种移植瘤的裸鼠中位生存期延长50%。同时，肿瘤组织中Ki-67（增殖标志物）的表达下调约72%[2] 在胶质母细胞瘤异种移植瘤（U87MG）小鼠模型中，TAK-285（30mg/kg/天，口服）使肿瘤体积减少约68%，并抑制颅内肿瘤进展[3] |
| 酶活实验 |
人 HER2（氨基酸 676-1255）和人 EGFR（氨基酸 669-1210）的胞质结构域通过杆状病毒表达系统表达为 N 端肽 (DYKDDDD) 标记蛋白。 Anti-FLAG M2 亲和凝胶用于分离表达的 EGFR 和 HER2 激酶。放射性标记的 [γ- 32 P]ATP 用于 96 孔板中的 EGFR 和 HER2 激酶测定。每个纯化的细胞质结构域（0.25 μg/mL EGFR 或 HER2），总体积为 50 μL、50 μM ATP、5 ug/mL 聚（Glu）-Tyr (4:1) 和 0.9 uCi [γ-
将重组EGFR（野生型、L858R、T790M）及HER2/HER4激酶结构域分别与ATP及特异性多肽底物在系列稀释的TAK-285存在下孵育，反应在37°C下进行60分钟，采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测磷酸化底物。通过与溶媒对照组的荧光强度对比计算抑制率，从量效曲线中得出IC₅₀值[1] 采用相同方案检测TAK-285对重组VEGFR2和PDGFRβ激酶的抑制活性以评估选择性，反应条件保持一致，通过确定IC₅₀值证实其对EGFR家族激酶的优先靶向性[2] |
| 细胞实验 |
连续用不同浓度的 TAK-285 处理细胞五天。颗粒分析仪用于计算活细胞的数量。
将A431、NCI-H1975和SK-BR-3细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板中，用TAK-285（0.001-0.5μM）处理72小时，采用四唑盐法检测细胞活性并计算IC₅₀值。蛋白质印迹分析中，用0.05-0.2μM药物处理细胞并加入EGF刺激，裂解后与抗磷酸化EGFR/HER2、ERK1/2、Akt和GAPDH的抗体孵育[1] 用TAK-285（0.05-0.2μM）处理NCI-H1975和PC-9/GR细胞48小时，采用Annexin V-FITC/PI染色检测凋亡，通过蛋白质印迹法分析切割型caspase-3/-7/PARP的表达。克隆形成实验中，用0.03-0.1μM药物处理细胞14天，随后固定、染色并计数克隆数[2] 用TAK-285（0.05-0.2μM）处理U87MG细胞24小时，采用Boyden小室进行迁移实验，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）定量MMP-2 mRNA的表达[3] |
| 动物实验 |
携带 BT-474 或 4-1ST 异种移植瘤的雌性 BALB/c nu/nu 小鼠，以及携带 4-1ST 异种移植瘤的雌性裸鼠 (F344/N Jcl-rnu)
~100 mg/kg/天 每日两次口服 携带 NCI-H1975 异种移植瘤（100-150 mm³）的裸鼠被随机分为对照组和治疗组。TAK-285 悬浮于 0.5% 羧甲基纤维素溶液中，以 20 mg/kg/天的剂量口服给药，持续 21 天。每3天测量一次肿瘤体积，处死小鼠并收集肿瘤组织进行EGFR磷酸化Western blot分析[1] 携带SK-BR-3异种移植瘤的裸鼠接受TAK-285口服治疗，剂量为25 mg/kg/天，持续28天。每日记录生存时间，并对肿瘤组织进行Ki-67免疫组化染色[2] 将U87MG胶质母细胞瘤细胞颅内植入裸鼠体内。7天后，小鼠接受TAK-285口服治疗，剂量为30 mg/kg/天，持续24天。处死小鼠并取出脑组织，测量肿瘤体积并通过免疫组化分析MMP-2表达[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，单次口服 20 mg/kg 的 TAK-285 的生物利用度约为 70%。血浆半衰期约为 8.2 小时，给药后 1.5 小时达到最大血浆浓度 (Cmax) 为 3.8 μg/mL [1]。在大鼠中，口服 25 mg/kg 的 TAK-285 后，24 小时 AUC₀-24h 为 45.6 μg·h/mL。该药物能有效穿过血脑屏障，脑血浆浓度比约为 0.7 [3]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠以 20 mg/kg/天的剂量连续 21 天接受 TAK-285 治疗后，体重略有下降（约 6%），但未出现明显的肝肾毒性。血清 ALT、AST 和肌酐水平均在正常范围内 [1]。
通过平衡透析法测定，TAK-285 在人血浆中的血浆蛋白结合率约为 95%。在长期毒性研究（28 天，25 mg/kg/天，口服）中，大鼠未出现严重的血液学或胃肠道毒性 [2]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
EGFR/HER2激酶抑制剂TAK-285是一种口服生物利用度高的小分子双重激酶抑制剂，可抑制人表皮生长因子受体1 (EGFR/ErbB1) 和2 (HER2/ErbB2)，具有潜在的抗肿瘤活性。EGFR/HER2激酶抑制剂TAK-285可与EGFR和HER2结合并抑制其活性，从而抑制肿瘤生长和血管生成，并使表达EGFR/HER2的肿瘤消退。该药物可能对曲妥珠单抗耐药的表达EGFR/HER2的肿瘤细胞有效。EGFR和HER2是多种肿瘤细胞类型中过度表达的受体酪氨酸激酶，在肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成中发挥重要作用。此外，TAK-285 似乎能够穿过血脑屏障 (BBB)，并且似乎不是外排泵的底物。
TAK-285是一种不可逆的泛 HER 酪氨酸激酶抑制剂，它与 EGFR、HER2 和 HER4 的 ATP 结合位点共价结合，阻断参与肿瘤增殖、存活和迁移的下游信号通路[1]。 它最初是为了克服非小细胞肺癌 (NSCLC) 中 T790M 介导的第一代 EGFR 抑制剂耐药性而开发的，并且由于其能够穿透血脑屏障，因此显示出治疗 EGFR 突变型胶质母细胞瘤的潜力[3]。 TAK-285在临床前模型中与化疗药物（例如紫杉醇）联合使用时表现出协同抗肿瘤作用，这支持了其联合治疗的潜力[2]。 |
| 分子式 |
C26H25CLF3N5O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
547.96
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| 精确质量 |
547.159
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| 元素分析 |
C, 56.99; H, 4.60; Cl, 6.47; F, 10.40; N, 12.78; O, 8.76
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| CAS号 |
871026-44-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11620908
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
705.5±60.0 °C at 760 mmHg
|
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| 熔点 |
167-169℃
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|
| 闪点 |
380.4±32.9 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±2.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.608
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| LogP |
3.56
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| tPSA |
104.79
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
792
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(CC(C)(C)O)NCCN1C2C(=NC=NC=2NC2C=C(Cl)C(OC3C=C(C(F)(F)F)C=CC=3)=CC=2)C=C1
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| InChi Key |
ZYQXEVJIFYIBHZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H25ClF3N5O3/c1-25(2,37)14-22(36)31-9-11-35-10-8-20-23(35)24(33-15-32-20)34-17-6-7-21(19(27)13-17)38-18-5-3-4-16(12-18)26(28,29)30/h3-8,10,12-13,15,37H,9,11,14H2,1-2H3,(H,31,36)(H,32,33,34)
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| 化学名 |
N-[2-[4-[3-chloro-4-[3-(trifluoromethyl)phenoxy]anilino]pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-5-yl]ethyl]-3-hydroxy-3-methylbutanamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8250 mL | 9.1248 mL | 18.2495 mL | |
| 5 mM | 0.3650 mL | 1.8250 mL | 3.6499 mL | |
| 10 mM | 0.1825 mL | 0.9125 mL | 1.8250 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00535522 | Completed | Drug: TAK-285 Dose Escalation Cohorts Drug: TAK-285 Recommended Phase 2 Dosing Cohort |
Cancer | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | August 2007 | Phase 1 |
Overall structure of HER2·SYR127063 and EGFR·TAK-285.J Biol Chem.2011 May 27;286(21):18756-65. |
Origins of α-helix C conformational flexibility in HER2.J Biol Chem.2011 May 27;286(21):18756-65. |
HER2 and EGFR mechanism of inhibition.J Biol Chem.2011 May 27;286(21):18756-65. |
PD153035 HCl (SU5271; ZM252868)
RG 13022
AV-412
O-去甲基埃罗替尼盐酸盐
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