| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AMPA/α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate receptor
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| 体外研究 (In Vitro) |
2,3-苯并二氮杂卓化合物的立体选择性为设计立体异构体提供了一种独特的方法，使其成为更具选择性和更有效的抑制剂，作为治疗涉及AMPA受体过度活性的神经系统疾病的候选药物。在这里，我们研究了一对被称为Talampanel的对映体及其（+）对应物对四个AMPA受体亚基或GluA1-4的抑制和选择性机制。我们发现Talampanel是GluA2的共聚体，其端序比在封闭通道为14，在开放通道状态为10。动力学证据支持Talampnel是一种非竞争性抑制剂，它与那些在二氮杂环上具有C-4甲基的2,3-苯并二氮杂卓化合物的同一位点结合。这个位点，我们称之为“M”位点，优先识别那些C-4甲基处于R构型的2,3-苯并二氮杂环庚烷化合物，就像Talampnel的化学结构一样。鉴于Talampanel抑制GluA1和GluA2，但对GluA3和GluA4 AMPA受体亚基几乎无效，我们假设Talampanel结合的GluA1和GluA2上的“M”位点不同于GluA3和GluA4上的M位点。如果使用AMPA受体和Talampnel的分子特性来选择抑制剂作为单一候选药物，以控制体内所有AMPA受体的活性，Talampnel并不理想。我们的研究结果进一步表明，在N-3位添加较长的酰基应能为“M”位点产生更有效的2,3-苯并二氮杂卓抑制剂[3]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在 ALS 小鼠模型中，Talampanel（口服；5 mg/kg；每天一次；2 周）可降低运动神经元中的钙水平；然而，随着疾病的进展，其有效性会减弱[1]。
我们通过测量细胞内钙水平和脊髓运动神经元的损失，在ALS的SOD1突变小鼠模型中测试了Talampanel治疗的疗效。我们打算模仿临床研究；因此，当临床症状已经出现时，治疗就开始了。这些数据与症状前阶段开始的类似治疗的结果进行了比较。从症状前或症状期开始，用talampanel或赋形剂治疗转基因和野生型小鼠。运动神经元的密度由物理测量仪测定，细胞内钙水平由电子显微镜测定。结果显示，SOD1小鼠的运动神经元钙水平升高，只有在症状前开始治疗时，Talampanel才能降低钙水平，但不能恢复。无论是症状前阶段还是症状阶段的治疗都未能挽救运动神经元。我们得出结论，在ALS小鼠模型中，他兰帕奈可以降低运动神经元钙，但随着疾病的进展，其疗效会下降，这表明在疾病的早期阶段开始用药可能更有效。[1] Talampanel（IVAX）是一种非竞争性AMPA拮抗剂，在不同的啮齿动物卒中模型中具有显著的神经保护作用。通过短暂（60分钟）MCA闭塞和48小时再灌注诱导小鼠局灶性脑缺血，并用talampanel（6 x 2 mg/kg，i.p.）治疗。在共聚焦激光显微镜下通过双免疫组织化学染色分析凋亡和坏死细胞。talampanel治疗可显著减小梗死面积（从57.1+/-7.2mm（2）降至18.9+/-2.6mm（2，p<0.001）。Talampanel治疗后，TUNEL阳性细胞的数量显著减少（从962+/-13.0减少到604+/-6.9，p<0.01），这些细胞主要位于缺血性病变的边缘区域。观察到胱天蛋白酶-3活性细胞显著减少。Talampnel作为一种神经保护候选药物，在小鼠短暂MCA闭塞模型中具有显著作用[2]。 |
| 细胞实验 |
细胞培养和受体表达[3]
HEK-293S细胞在37°C、5%CO2、加湿培养箱和添加了10%胎牛血清、100单位青霉素/mL和0.1 mg链霉素/mL的Dulbecco改良Eagle培养基中培养。编码所有AMPA受体亚基的DNA质粒如前所述制备。通过遵循标准磷酸钙方法，将HEK-293S细胞瞬时转染以表达每种AMPA受体。细胞还用编码绿色荧光蛋白（GFP）的质粒作为转染标记和编码大T抗原的单独质粒共转染，以增强单细胞水平的受体表达。GFP和大T抗原质粒与AMPA受体质粒的重量比分别为1:1:10。用于瞬时转染AMPA受体的质粒范围为每35毫米培养皿5至15μg。一般来说，细胞在转染后48小时用于记录。 全细胞电流记录[3] 通过内置的四极低通贝塞尔滤波器，在Axopatch 200B仪器上以2-20kHz的截止频率记录了转染HEK-293S细胞的谷氨酸诱导的全细胞电流。使用Digidata 1322A以5-50kHz的采样频率对整个电池电流轨迹进行数字化。所有记录均在-60 mV和室温下进行。使用pClamp 8软件进行数据采集。记录电极由玻璃毛细管制成，当填充电极溶液时，电阻约为3 MΩ。电极溶液由（以mM计）110 CsF、30 CsCl、4 NaCl、0.5 CaCl2、5 EGTA和10 HEPES（用CsOH调节pH 7.4）组成。外部溶液含有（以mM计）150 NaCl、3 KCl、1 CaCl2、1 MgCl2和10 HEPES（用NaOH调节pH 7.4）。所有化学品均来自商业来源。 激光脉冲光解测量[3] 前面已经描述了使用激光脉冲光解技术来测量通道打开动力学。在这个实验中，将笼状谷氨酸盐（例如4-甲氧基-7-硝基吲哚啉-笼状l-谷氨酸盐）溶解在外部缓冲液中，并使用流动装置施加到细胞上。通过光纤将脉冲调Q Nd:YAG激光器产生的355 nm单激光脉冲施加到HEK-293S细胞上，脉冲长度为8 ns，能量输出范围为200-1000μJ。为了确定激光光解光解产生的谷氨酸的浓度，我们参考剂量-反应关系，在激光闪光前后施加两种已知浓度的游离谷氨酸溶液，校准了同一细胞中的受体反应。这些测量还使我们能够监测对受体和/或细胞的任何损伤，以便对同一细胞进行连续的激光实验。在抑制剂存在和不存在的情况下，使用流动装置输送游离谷氨酸和/或笼状谷氨酸溶液。该流动装置的时间分辨率由全细胞电流响应（10-90%）对饱和谷氨酸浓度的上升时间决定，为1.0±0.2 ms，这是表达相同受体的>100个细胞的平均测量值。此外，我们在流动和激光光解实验中使用8秒时间方案预孵育所有2,3-苯并二氮杂环庚烷化合物，以观察和记录这些抑制剂的完全抑制作用，这是我们之前在其他2,3-苯二氮杂环丁烷化合物中观察到的现象。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性突变型SOD1转基因小鼠[1]
剂量：5 mg/kg 给药途径：口服；5 mg/kg；每日一次；持续2周 实验结果：仅在12周龄时钙水平显著降低。 半合子转基因小鼠表达带有G93A突变的突变型人SOD1，最初购自杰克逊实验室，并在C57BL/6JOlaHsd小鼠品系中繁殖和饲养。动物饲养于21°C、12小时光照/12小时黑暗循环的环境中。食物（标准颗粒饲料）和水自由摄取。雌性SOD1突变转基因小鼠分别接受Talampanel（5 mg/kg体重，溶于0.1 ml Tween 80）或溶剂对照，每日一次，持续两周。选择5 mg/kg的Talampanel剂量是基于以下两点：一是未观察到对体重增加的不良影响（TEVA，个人交流）；二是本实验室的一项预实验表明，该剂量能有效改善SOD1突变转基因小鼠的线粒体功能（未发表数据）。每天早上同一时间，在不使用麻醉的情况下，通过合适的圆形尖端不锈钢灌胃针，将药物直接注入小鼠下食管。治疗分别在小鼠10周龄或17周龄开始，即分别对应于症状出现前期和运动功能障碍发作的年龄。采用相同处理的同龄雌性非转基因小鼠作为对照组。 [1] 采用Erdő方法建立雄性小鼠（C57BL/6J/Charles River）脑卒中模型。实验采用体重25-30 g的成年雄性C57BL/6J小鼠（6只对照组，6只Talampanel治疗组）。 最初，对10-10只小鼠进行手术，选择形态学特征符合要求的小鼠，并通过激光多普勒皮层血流监测检测血流减少情况。在氟烷麻醉（1%氟烷，30%氧气和70%氧化亚氮）下，通过短暂（60分钟）用线结扎大脑中动脉（MCA）诱导局灶性脑缺血。通过直肠温度监测持续监测体温。颈部正中切口后，分离并结扎左侧颈总动脉和颈外动脉。暂时在颈内动脉上放置微血管夹。将一根涂覆硅树脂的 8-0 尼龙单丝（厚度 150–200 μm）经颈总动脉小切口插入，并推进至颈动脉分叉远端 9 mm 处，以阻断大脑中动脉 (MCA)。60 分钟后拔出线，开始再灌注。48 小时再灌注后处死动物。Talampanel 悬浮于含 0.5% Tween-80 的生理盐水中。小鼠腹腔注射 Talampanel，剂量为 2 mg/kg，共 6 次，每次 0.1 ml。首次注射于阻断结束后 15 分钟，之后每隔 15 分钟注射一次，共注射 6 次。对照组动物注射溶剂。 在连续五张切片（间隔 0.5 mm）上进行尼氏染色，以确定缺血性病变。计算并统计分析了平均病灶大小。 如前所述[11]，我们将半暗带定义为梗死脑组织与正常脑组织之间的边界区域。我们采用双重荧光染色法[2]分析了Talampanel对神经元凋亡/坏死的影响。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
吸收迅速，1-3小时内达到血浆峰浓度。 生物半衰期 3-6小时 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
164509 小鼠口服LD50为100 mg/kg，行为学表现：睡眠时间改变（包括翻正反射改变）；行为学表现：肌肉无力；肺、胸腔或呼吸：呼吸抑制。美国专利文件，编号5519019。
164509 小鼠腹腔注射LD50为73500 μg/kg，行为学表现：睡眠时间改变（包括翻正反射改变）；行为学表现：共济失调；肺、胸腔或呼吸：呼吸抑制。美国专利文件，编号5519019。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Talampanel属于苯并二氧杂环戊烯类化合物。
Talampanel是一种正在研究用于治疗脑肿瘤和其他脑部疾病（例如癫痫和帕金森病）的物质。它是一种AMPA受体拮抗剂。 Talampanel是具有抗癫痫活性的二氧杂环戊烯苯二氮卓类合成衍生物。Talampanel拮抗谷氨酸兴奋性氨基酸受体的AMPA（α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸）亚型，并可能通过干扰参与脑肿瘤生长的神经递质来抑制胶质瘤的生长。该药物也可能对创伤性脑损伤具有保护作用。 药物适应症 用于治疗癫痫。 作用机制 他拉帕尼是一种强效的非竞争性选择性谷氨酰胺AMPA受体拮抗剂。灵长类动物研究表明，给帕金森病猴服用他拉帕尼可显著降低左旋多巴诱发的运动障碍达40%。单独使用他拉帕尼并不能改变帕金森病症状的严重程度。然而，他拉帕尼与左旋多巴联用时，可通过增加运动活性来增强左旋多巴的抗帕金森病作用。 药效学 他拉帕尼是一种强效且选择性的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（AMPA）受体拮抗剂，是一种潜在的新型抗癫痫药物（AED）。他拉帕尼的给药策略可能取决于同时服用的其他AED，因为酶诱导型AED会增强其代谢，而丙戊酸（VPA）则会抑制其代谢。他拉帕尼耐受性良好，尽管与健康受试者相比，在较低剂量下也出现了不良事件，这可能是由于同时服用的其他AED的叠加效应所致。 他拉帕尼在症状出现前降低运动神经元钙离子浓度的已证实作用表明，该治疗的理论基础基本正确。然而，在症状期未观察到任何疗效表明，随着疾病进展，该药物的疗效会逐渐丧失。尽管他拉帕尼在症状前期能有效降低细胞内钙水平，但对存活的运动神经元（MNs）的挽救却无任何作用，这可能提示他拉帕尼实际上发挥了预期作用，但却被不断增强的致病机制所掩盖。因此，他拉帕尼治疗最终失败的原因可能至少部分在于用药时间相对于疾病进展而言过晚，和/或缺乏其他药物的辅助治疗以对抗致病机制的其他组成部分。这些结果强调了在临床前动物实验中评估药物在症状前和症状期疗效的重要性，并突出了对肌萎缩侧索硬化症（ALS）早期诊断生物标志物的必要性，这些生物标志物可能有助于临床试验，并有望实现更早启动且更有效的治疗。[1] 总之，在我们的实验中，Talampanel显著抑制了缺血性脑组织中caspase-3的表达，表明其具有显著的抗凋亡作用。这些结果与Erdő及其同事的研究结果一致，并提示Talampanel在卒中治疗中可能发挥潜在作用。[2] 手性可以提高生物分子在体内功能的选择性，甚至可能提高其特异性。例如，哺乳动物的嗅觉系统能够分别通过类似香芹籽和薄荷的反应来区分(+)-和(−)-香芹酮，尽管这两个对映异构体之间的唯一区别在于甲基乙烯基的构型。对于激活谷氨酸受体而言，d-谷氨酸的亲和力较低，其结合引起的受体激活也较少。手性还可以提高抑制剂和药物设计的选择性，甚至特异性。这对于开发更好的2,3-苯二氮卓类化合物以更精确地控制体内AMPA受体活性尤为有利。本研究结果表明，任何在二氮杂环上含有C-4甲基的有效2,3-苯二氮卓类抑制剂，例如BDZ-d或Talampanel，必须具有R构型才能有效地与非竞争性受体位点或“M”位点结合。我们的研究进一步表明，在 N-3 位点添加更长的基团应该能产生更有效的“M”位点抑制剂。基于 BDZ-d 能抑制 GluA1 和 GluA2，但对 GluA3 和 GluA4 几乎无效这一事实，我们推测 GluA1 和 GluA2 上的“M”位点与 GluA3 和 GluA4 上的“M”位点不同，这很可能反映了构成“M”位点的氨基酸残基组合不同。如果同时考虑 AMPA 受体和 BDZ-d 或 Talampanel 的分子特性来选择单一抑制剂作为 ALS 临床试验的候选药物，那么 Talampanel 并非理想之选。[3] |
| 分子式 |
C19H19N3O3
|
|---|---|
| 分子量 |
337.37246
|
| 精确质量 |
337.142
|
| 元素分析 |
C, 67.64; H, 5.68; N, 12.46; O, 14.23
|
| CAS号 |
161832-65-1
|
| PubChem CID |
164509
|
| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
528.9±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
273.7±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.675
|
| LogP |
1.23
|
| tPSA |
77.15
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
544
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
C[C@@H]1CC2=CC3=C(C=C2C(=NN1C(=O)C)C4=CC=C(C=C4)N)OCO3
|
| InChi Key |
JACAAXNEHGBPOQ-LLVKDONJSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H19N3O3/c1-11-7-14-8-17-18(25-10-24-17)9-16(14)19(21-22(11)12(2)23)13-3-5-15(20)6-4-13/h3-6,8-9,11H,7,10,20H2,1-2H3/t11-/m1/s1
|
| 化学名 |
(8R)-7-Acetyl-5-(4-aminophenyl)-8,9-dihydro-8-methyl-7H-1,3-dioxolo[4,5-h][2,3]benzodiazepine
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| 别名 |
LY300164, LY 300164, LY-300164, Talampanel; GYKI 53,773; Talampanel (INN); Talampanel [INN]; LY 300,164; LY-300,164; GYKI-53,773; ...; 161832-65-1; GYKI53773,GYKI 53405, GYKI-53405, LY293606, LY-293606, LY 293606,
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~296.41 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9641 mL | 14.8205 mL | 29.6410 mL | |
| 5 mM | 0.5928 mL | 2.9641 mL | 5.9282 mL | |
| 10 mM | 0.2964 mL | 1.4821 mL | 2.9641 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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