| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
浓度为 5 μM 的 SJA710-6 可诱导 rMSCs 在分化 14 天后呈现多边形肝细胞样形态，胞质呈颗粒状，边界具有折光性 [1]。
过碘酸-雪夫氏 (PAS) 染色显示，SJA710-6 处理的 rMSCs 积累了糖原（品红色染色），与阳性对照（生长因子）相当，而 DMSO 对照组未见糖原储存 [1]。 通过 ELISA 检测白蛋白分泌：SJA710-6 处理的细胞分泌白蛋白 36.54 ± 7.73 μg/mL，显著高于 DMSO 对照组 (13.77 ± 3.16 μg/mL, p < 0.01) [1]。 暴露于 6 mM NH₄Cl 24 小时后尿素生成： SJA710-6诱导分化的rMSCs产生12.63 ± 3.17 μg/mL尿素，而DMSO对照组为7.61 ± 1.04 μg/mL（p < 0.01）[1]。 LDL摄取：SJA710-6处理的细胞对Dil-Ac-LDL的摄取显著增加（1641.39 ± 326.62 ng/孔），而DMSO对照组为352.48 ± 88.26 ng/孔（p < 0.01）[1]。 诱导24天后的流式细胞术分析：47.14%的SJA710-6处理的细胞表现出肝细胞分化，与生长因子阳性对照组相当[1]。 28天后的RT-PCR分析： SJA710-6 处理显著增加了肝细胞特异性基因白蛋白、AFP、CK18、c-Met、CYP1A1、CYP2B1 和 HNF3β 的 mRNA 表达，而 DMSO 对照组未表达这些基因 [1]。Western blot 分析：与 DMSO 对照组相比，SJA710-6 处理显著增强了 FoxH1 蛋白的表达 (p < 0.01)，与生长因子阳性对照组相似 [1]。 |
|---|---|
| 细胞实验 |
细胞分离：通过用D-Hanks液冲洗6周龄雌性Sprague-Dawley大鼠的股骨和胫骨，获得rMSCs。将细胞培养于含10% FBS、10 mM HEPES、2 mM谷氨酰胺、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的低糖DMEM培养基中，置于37 °C、5% CO₂条件下培养[1]。
肝细胞分化方案（4个步骤）：步骤1（预诱导）：将rMSCs在无血清DMEM培养基中培养24小时。步骤2（诱导）：将rMSCs在含2% FBS、100 ng/mL激活素A和10 ng/mL FGF4的DMEM培养基中培养2天。步骤 3（分化）：在含 2% FBS 的 DMEM 培养基中，加入 1× ITS，并分别添加 DMSO（阴性对照）、生长因子（10 ng/mL FGF4 + 20 ng/mL HGF，阳性对照）或 5 μM SJA710-6，培养 7 天。步骤 4（成熟）：在含 2% FBS 的 DMEM 培养基中，加入 1 μM 地塞米松、1× ITS，并进行相同处理，培养 14 天。每 3 天更换一次培养基 [1]。 PAS 染色：细胞用 4% 甲醛固定，用 0.1% Triton X-100 透化，用 1% 高碘酸在 22 °C 下氧化 1 小时，冲洗，用 Schiff 试剂处理 1 小时，然后在光学显微镜下观察 [1]。 白蛋白 ELISA：收集培养 24 小时后的培养基，使用 ELISA 定量试剂盒，按照制造商的说明进行分析；使用酶标仪读取吸光度[1]。 尿素生成测定：将细胞暴露于 6 mM NH₄Cl 中 24 小时；使用配备尿素测定试剂盒的自动化学分析仪测定培养基中的尿素浓度[1]。 低密度脂蛋白 (LDL) 摄取测定：将分化细胞在含 10 μg/mL Dil-Ac-LDL 的高糖 DMEM 培养基中于 37 °C 孵育 24 小时；收集上清液并按照制造商说明进行测定[1]。 流式细胞术：分化 24 天后，用布雷菲德菌素 A (3 μg/mL) 处理细胞 6 小时，在 70% 冷乙醇中固定过夜，用含有 0.3% Triton X-100、0.1% NaN₃、0.1% 皂苷、10 mM HEPES 和 1% 正常血清的 D-Hanks 溶液透化 15 分钟。将细胞与山羊抗白蛋白一抗孵育，再与FITC标记的兔抗山羊二抗孵育，然后通过流式细胞术进行分析[1]。 RT-PCR：用TRIzol提取总RNA，反转录为cDNA。PCR扩增程序为：94℃预变性5分钟后，94℃变性40秒，56-62℃退火50秒，72℃延伸60秒，共35个循环。使用的引物包括白蛋白、AFP、CK18、c-Met、CYP1A1、CYP2B1、PEPCK、FoxH1、HNF4α、HNF3β和GAPDH[1]。 Western blot：用蛋白提取试剂和蛋白酶抑制剂制备细胞裂解液。将蛋白质样品在 100 °C 加热 5 分钟，经 20% SDS-PAGE 电泳分离后，转移至 PVDF 膜。膜封闭 ≥1.5 小时后，与 FoxH1 或 β-actin 的一抗在 4 °C 孵育过夜。洗涤后，与 HRP 标记的二抗在室温下孵育 ≥1.5 小时，采用化学发光法显色，并用 X 光胶片成像 [1]。 |
| 参考文献 |
ChemMedChem.2012 Aug;7(8):1447-52.
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| 其他信息 |
SJA710-6是通过表型筛选鉴定的，该筛选采用PAS染色作为检测糖原积累的指标，糖原积累是肝细胞分化的标志。该化合物可诱导rMSCs分化为具有与生长因子（FGF4和HGF）诱导的细胞相似的功能特征的肝细胞样细胞。SJA710-6的分化效率（47.14%）与生长因子相似。机制上，SJA710-6可增强FoxH1的表达，提示Nodal信号通路参与肝细胞命运的决定。本研究未报告体内动物疗效、药代动力学或毒性数据[1]。
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| 分子式 |
C22H20BRFN4
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|---|---|
| 分子量 |
439.323407173157
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| 精确质量 |
438.09
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| 元素分析 |
C, 60.15; H, 4.59; Br, 18.19; F, 4.32; N, 12.75
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| CAS号 |
1397255-09-2
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| PubChem CID |
71466685
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| LogP |
5.8
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| tPSA |
42.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
479
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CCCN1C2=C(C=CC(=N2)NCC3=CC=C(C=C3)F)N=C1C4=CC=C(C=C4)Br
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| InChi Key |
RPNQWWSSADJSGS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H20BrFN4/c1-2-13-28-21(16-5-7-17(23)8-6-16)26-19-11-12-20(27-22(19)28)25-14-15-3-9-18(24)10-4-15/h3-12H,2,13-14H2,1H3,(H,25,27)
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| 化学名 |
2-(4-bromophenyl)-N-[(4-fluorophenyl)methyl]-3-propylimidazo[4,5-b]pyridin-5-amine
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| 别名 |
SJA710 6; SJA710-6; SJA-710-6; SJA 710-6
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~569.06 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2762 mL | 11.3812 mL | 22.7625 mL | |
| 5 mM | 0.4552 mL | 2.2762 mL | 4.5525 mL | |
| 10 mM | 0.2276 mL | 1.1381 mL | 2.2762 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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