Tryptophan hydroxylase
In vitro activity: Telotristat (formerly known as LP-778902) is the active metabolite of LX1606 (Telotristat etiprate) which is an orally bioavailable, small-molecule, tryptophan hydroxylase (TPH) inhibitor with potential an in vivo IC50 of 0.028 μM and with antiserotonergic activity. Telotristat has activity in controlling diarrhea associated with carcinoid syndrome. Telotristat acts by inhibiting the enzyme tryptophan hydoxylase (TPH) and reduces serotonin production both inside and outside the GI tract without affecting brain serotonin levels. Blocking peripheral serotonin synthesis by telotristat reduces severity of both chemical- and infection-induced intestinal inflammation.

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Kinase Assay: Telotristat (formerly known as LP-778902) is the active metabolite of LX1606 (Telotristat etiprate) which is an orally bioavailable, small-molecule, tryptophan hydroxylase (TPH) inhibitor with potential an in vivo IC50 of 0.028 μM and with antiserotonergic activity.

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Cell Assay: BON CBA cells are grown in equal volume of DMEM and F12K with 5% bovine serum for 3-4 hours (20 K cell/well) and telotristat is added at a concentration range of 0.07 to 50 μM. The cells are incubated at 37°C overnight. 50 μM of the culture supernatant is then taken for 5HTP measurement. The supernatant is mixed with equal volume of 1M TCA, then filtered through glass fiber. The filtrate is loaded on reverse phase HPLC for 5HTP concentration measurement. The cell viability is measured by treating the remaining cells with Celltiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay.

体外活性：Telotristat（以前称为 LP-778902）是 LX1606（Telotristat etiprate）的活性代谢物，LX1606 是一种口服生物可利用的小分子色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂，潜在体内 IC50 为 0.028 μM，并且具有抗血清素活性。 Telotristat 具有控制类癌综合征相关腹泻的活性。 Telotristat 通过抑制色氨酸羟化酶 (TPH) 发挥作用，减少胃肠道内外血清素的产生，而不影响大脑血清素水平。用 telotristat 阻断外周血清素合成可减轻化学和感染引起的肠道炎症的严重程度。激酶测定：Telotristat（以前称为 LP-778902）是 LX1606（Telotristat etiprate）的活性代谢物，LX1606 是一种口服生物可利用的小分子色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂，体内 IC50 为 0.028 μM，具有抗血清素能作用活动。细胞测定：BON CBA 细胞在等体积的含 5% 牛血清的 DMEM 和 F12K 中生长 3-4 小时（20 K 细胞/孔），并添加浓度范围为 0.07 至 50 μM 的 telotristat。将细胞在 37°C 下孵育过夜。然后取 50 μM 培养上清液用于 5HTP 测量。将上清液与等体积的1M TCA混合，然后通过玻璃纤维过滤。将滤液加载到反相 HPLC 上进行 5HTP 浓度测量。通过用 Celltiter-Glo 发光细胞活力测定处理剩余的细胞来测量细胞活力。

当给予telotristat eth（15、50、150、300mg/kg，po，qd）时，小鼠的外周血而不是大脑中的血清素含量较低。在炎症性肠病大鼠模型中，Telotristat ethyl（200 mg/kg，口服，每日一次）可显着防止 TNBS 诱导的血液中性粒细胞计数升高。组织病理学评估显示，小鼠 IBD 模型受到 telotristat ethyl（200 mg/kg po，qd）的保护[1]。在空肠中，telotristat ethyl (15、50、150 和 300 mg/kg) 消耗 5-HT，但在大脑中则不然。然而，小鼠的组成性胃肠动力和肠神经元血清素（5-HT）的消耗都不是由telotristat ethyl（200 mg/kg，口服）引起的。由三硝基苯磺酸 (TNBS) 引起的结肠炎的严重程度可通过 telotristat ethyl (200 mg/kg) 减轻[2]。

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在小鼠中每日口服一次 LX1606（200 mg/kg），持续 6 天，与载体对照组相比，全血中的血清素（5-HT）浓度显著降低 (p<10⁻⁶)。
在 TNBS 诱导的炎症性肠病小鼠模型中，在 TNBS 攻击前 6 天开始并持续进行口服 LX1606（200 mg/kg，每日一次）预处理和治疗，与载体组相比，显著减轻了体重下降 (p<0.03)。
LX1606 治疗显著降低了组织病理学评分 (p=0.04)，并减少了病理评分 ≥10 的动物百分比。
它还阻止了载体组在 TNBS 攻击后观察到的血液中性粒细胞计数的增加。
对 LX1606 治疗小鼠远端结肠组织的定量 PCR 分析显示，TNBS 攻击后促炎细胞因子 IL-1β、IL-6 和 IL-17α 的表达有降低趋势。
用 LX1606（200 mg/kg）治疗以剂量依赖性方式降低了小肠中的血清素含量，但不影响大脑中的血清素水平。 [1]

Dissolved in 15% cyclodextrin or 0.25% methylcellulose; 300 mg/kg; p.o.Male C57BL/6 mice and male C57 albino mice. In normal mice, telotristat etiprate (administered once daily for 4 days at doses of 15–300 mg/kg/day) was found to reduce serotonin levels throughout the gastrointestinal tract. These reductions occurred in a dose dependent fashion with maximal effects observed with doses of telotristat etiprate ≥150 mg/kg. No significant change in brain serotonin or 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA, a serotonin metabolite) was observed. Similar findings were seen in Sprague-Dawley rats. Gastrointestinal motility studies were conducted in rats using the charcoal meal test. There was a significant dose-related delay in both gastrointestinal transit and gastric emptying, associated with a reduction in blood serotonin levels and proximal colon serotonin. A quantitative whole-body autoradiography study was conducted to assess the absorption, distribution and excretion of radioactivity in rats following a single oral dose of telotristat etiprate labeled with carbon 14. Rats were administered either 30 mg/kg or 100 mg/kg of the compound. The distribution of radioactivity was limited to tissues of the hepatic and renal system and the contents of the GI tract. There was no measurable radioactivity in the brain at any dose tested.

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C57Bl/6brd x 129SvEv F1 hybrid mice were used in all experiments.
For the TNBS-IBD model, animals were challenged via intra-rectal administration with 2% TNBS solution. Naïve control mice were left untreated.
LX1606 and the reference drug sulfasalazine were formulated in 0.25% methylcellulose and administered to mice once daily via oral gavage.
Dosing began 6 days before TNBS challenge and continued throughout the challenge period.
In the efficacy study, mice (n=10 per group initially) were treated with vehicle, LX1606 (200 mg/kg, po, qd), or sulfasalazine (100 mg/kg, po, qd). Body weight was monitored.
For serotonin measurement, separate groups of mice (n=5 per group) were treated with indicated doses of LX1606 for 6 days before analysis.
Blood was collected for neutrophil counts via retro-orbital bleeding into EDTA tubes, and complete cell counts were measured.
At the endpoint, proximal and distal colon and cecum were collected, fixed in formalin, sectioned, and stained with hematoxylin and eosin for histopathological scoring using a modified scoring system. [1]

吸收、分布和排泄
健康受试者单次口服特洛曲司他乙酯后，特洛曲司他乙酯被吸收并代谢为活性代谢物特洛曲司他。特洛曲司他乙酯的血浆峰浓度在0.5至2小时内达到，特洛曲司他的血浆峰浓度在1至3小时内达到。此后，血浆浓度呈双相下降。健康受试者在空腹状态下单次服用500 mg特洛曲司他乙酯（推荐剂量的两倍）后，特洛曲司他乙酯的平均Cmax和AUC0-inf分别为4.4 ng/mL和6.23 ng•hr/mL。特洛曲司他的平均Cmax和AUC0-inf分别为610 ng/mL和2320 ng•hr/mL。在空腹状态下，单次服用100 mg（最低推荐剂量的0.4倍至1000 mg [最高推荐剂量的4倍]）的替洛曲司他乙酯后，替洛曲司他乙酯和替洛曲司他的血浆峰浓度和AUC似乎与剂量呈正比。每日三次服用500 mg替洛曲司他乙酯后，替洛曲司他乙酯和替洛曲司他均未出现明显的稳态蓄积。在接受生长抑素类似物（SSA）治疗的转移性神经内分泌肿瘤合并类癌综合征腹泻患者中，替洛曲司他乙酯和替洛曲司他的中位达峰时间（Tmax）分别约为1小时和2小时。患者每日三次随餐服用 500 mg 替洛曲司他乙酯后，替洛曲司他乙酯的平均 Cmax 和 AUC0-6hr 分别约为 7 ng/mL 和 22 ng•hr/mL。替洛曲司他的平均 Cmax 和 AUC0-6hr 分别约为 900 ng/mL 和 3000 ng•hr/mL。替洛曲司他乙酯和替洛曲司他的药代动力学参数均具有高度变异性，变异系数约为55%。
单次口服500 mg ¹⁴C-替洛曲司他乙酯后，240小时内回收了93.2%的剂量：92.8%经粪便回收，尿液回收不足0.4%。
根据群体药代动力学模型估算，典型健康空腹受试者的活性代谢物表观总分布容积为428.1 L，类癌综合征患者的表观总分布容积为348.7 L。
健康受试者每日三次口服500 mg替洛曲司他乙酯，持续14天（推荐剂量的两倍），稳态表观总清除率（CL/F_ss）分别为2.7 L/hr和152 L/hr。分别指替洛曲司他乙酯和替洛曲司他。

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代谢/代谢物
口服后，替洛曲司他乙酯经羧酸酯酶水解生成其活性代谢物替洛曲司他。替洛曲司他进一步代谢。在替洛曲司他的代谢物中，氧化脱氨脱羧替洛曲司他的酸性代谢物的全身暴露量约为替洛曲司他的35%。体外数据表明，替洛曲司他乙酯和替洛曲司他并非CYP酶的底物。

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生物半衰期
健康受试者单次口服500 mg替洛曲司他乙酯后，替洛曲司他乙酯的表观半衰期约为0.6小时，替洛曲司他的表观半衰期约为5小时。

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口服替洛曲司他乙酯（LX1606）可显著降低肠道和血液中的5-HT水平，但对脑组织中的5-HT水平无影响，表明该化合物可被吸收并在外周发挥作用，但不能穿过血脑屏障。
该手稿指出，外周TPH抑制剂如替洛曲司他乙酯（LX1606）不能穿过血肠神经丛屏障，肠神经元5-HT免疫反应性的维持证实了这一点。
特定药代动力学参数本文未提供Telotristat Etiprate (LX1606)的半衰期、口服生物利用度、Cmax、AUC等参数。[2]

蛋白质结合
telotristat ethyl 和 telotristat 与人血浆蛋白的结合率均大于 99%。

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在 TNBS-IBD 研究中，每组 10 只小鼠，对照组（载体组）在试验结束时有 4 只小鼠死亡，而 LX1606 治疗组和柳氮磺胺吡啶治疗组均未出现死亡。载体组的死亡原因可能与严重的 IBD 有关。[1]

[1]. LX1606 (aka LX1032), a Novel Inhibitor of Serotonin Synthesis, Alleviates Development of Inflammatory Bowel Disease in a Preclinical Model.

[2]. Pharmacological reduction of mucosal but not neuronal serotonin opposes inflammation in mouse intestine. Gut, 2013.

替洛曲司他乙酯是替洛曲司他的前药，于2017年3月获得FDA批准，商品名为Xermelo。它之前被称为替洛曲司他乙酸酯，即马尿酸盐形式；然而，FDA建议使用中性形式的名称，而不是盐的名称。目前，替洛曲司他乙酯用于治疗由神经内分泌肿瘤引起的类癌综合征腹泻，这些肿瘤对短效生长抑素类似物（SSA）治疗控制不佳。神经内分泌细胞是指在化学、神经或其他类型刺激下分泌调节肽和生物胺的细胞。因此，起源于这些细胞的神经内分泌肿瘤（NET）可以将化学介质分泌到血液中，从而在远处部位引起副作用，这种现象被称为类癌综合征。神经内分泌肿瘤 (NET) 分泌的最常见肽类和胺类物质包括组胺、速激肽、激肽释放酶和血清素。血清素过量可导致严重腹泻，这是类癌综合征的主要临床症状之一。血清素代谢后以尿液代谢物 5-羟基吲哚乙酸 (u5-HIAA) 的形式排出体外，而高水平的 u5-HIAA 与 NET 患者的不良生存预后相关。类癌综合征腹泻的一线治疗药物是生长抑素类似物 (SSA)，但症状在病程中仍会复发。
Telotristat Ethyl 是 telotristat 的乙酯形式，telotristat 是一种色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂，具有潜在的抗血清素活性。给药后，telotristat 与 TPH 结合并抑制其活性。这可能会导致外周血清素（5-HT）生成减少，并改善血清素介导的胃肠道效应，如严重腹泻。色氨酸羟化酶 (TPH) 是血清素生物合成的限速酶，在类癌肿瘤细胞中过度表达。
另见：特洛曲司他（具有活性部分）。

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药物适应症
Xermelo 适用于与生长抑素类似物 (SSA) 联合治疗，用于治疗成人类癌综合征腹泻，尤其适用于 SSA 治疗效果不佳的患者。
Xermelo 适用于与生长抑素类似物 (SSA) 联合治疗，用于治疗成人类癌综合征腹泻，尤其适用于 SSA 治疗效果不佳的患者。

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作用机制
特洛曲司他是特洛曲司他乙酯的活性代谢物，是一种色氨酸羟化酶抑制剂，该酶介导血清素生物合成的限速步骤。体外实验表明，替洛曲司他（telotristat）对色氨酸羟化酶的抑制效力是替洛曲司他乙酯（telotristat ethyl）的29倍。血清素在调节胃肠道的分泌、运动、炎症和感觉中发挥作用，并且在类癌综合征患者体内过度产生。替洛曲司他和替洛曲司他乙酯通过抑制色氨酸羟化酶，减少外周血清素的产生，并降低类癌综合征腹泻的发生频率。

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药效学
在正常小鼠中，替洛曲司他乙酯（每日一次，连续4天，剂量为15-300 mg/kg/天）可降低整个胃肠道的血清素水平。这些降低呈剂量依赖性，当替洛曲司他依替普特剂量≥150 mg/kg时观察到最大效应。未观察到脑内5-羟色胺或5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA，一种5-羟色胺代谢物）的显著变化。在Sprague-Dawley大鼠中也观察到了类似的结果。采用活性炭餐试验对大鼠进行了胃肠动力研究。结果显示，胃肠道转运和胃排空均出现显著的剂量依赖性延迟，并伴有血液5-羟色胺水平和近端结肠5-羟色胺水平的降低。为了评估大鼠单次口服碳14标记的替洛曲司他依替普特后放射性物质的吸收、分布和排泄情况，进行了一项定量全身放射自显影研究。大鼠分别给予30 mg/kg或100 mg/kg的化合物。放射性物质的分布仅限于肝肾系统组织和胃肠道内容物。在所有测试剂量下，脑组织中均未检测到放射性。

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LX1606（也称为 LX1032，后更名为 Telotristat ethyl）是一种新型口服色氨酸羟化酶抑制剂，旨在降低外周血清素的生成，而不影响中枢神经系统水平。
它被认为是一种潜在的治疗炎症性肠病等疾病中血清素介导症状的新方法。
其作用机制是抑制 TPH1，从而减少肠道嗜铬细胞中色氨酸合成血清素。[1]

C27H26CLF3N6O3

574.99

574.17

C, 56.40; H, 4.56; Cl, 6.17; F, 9.91; N, 14.62; O, 8.35

1033805-22-9

Telotristat etiprate;1137608-69-5;Telotristat;1033805-28-5; 1033805-22-9 (ethyl); 1374745-52-4 (besilate)

25181577

Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature

1.4±0.1 g/cm3

704.7±70.0 °C at 760 mmHg

380.0±35.7 °C

0.0±2.2 mmHg at 25°C

1.621

5.47

131.17

2

11

10

40

821

2

N[C@@H](CC1=CC=C(C2=NC(N)=NC(O[C@H](C3=CC=C(Cl)C=C3N4N=C(C)C=C4)C(F)(F)F)=C2)C=C1)C(OCC)=O

MDSQOJYHHZBZKA-GBXCKJPGSA-N

InChI=1S/C27H26ClF3N6O3/c1-3-39-25(38)20(32)12-16-4-6-17(7-5-16)21-14-23(35-26(33)34-21)40-24(27(29,30)31)19-9-8-18(28)13-22(19)37-11-10-15(2)36-37/h4-11,13-14,20,24H,3,12,32H2,1-2H3,(H2,33,34,35)/t20-,24+/m0/s1

ethyl (2S)-2-amino-3-[4-[2-amino-6-[(1R)-1-[4-chloro-2-(3-methylpyrazol-1-yl)phenyl]-2,2,2-trifluoroethoxy]pyrimidin-4-yl]phenyl]propanoate

LX 1032; LX 1606; LX-1032; LX1606; LX1032; LX-1606; LX1606; LX 1606; Xermelo; Telotristat ethyl [USAN]; trade name: Xermelo

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。