Tryptophan hydroxylase
Telotristat Etiprate (LX 1606 Hippurate) is a selective inhibitor of tryptophan hydroxylase 1 (TPH1), the rate-limiting enzyme for mucosal serotonin (5-HT) synthesis. It exhibits an IC50 of 1.2 nM against recombinant human TPH1 and >1000 nM against TPH2 (neuronal isoform), showing high isoform selectivity [1]
- Telotristat Etiprate (LX 1606 Hippurate) targets TPH1 in intestinal epithelial cells and enterochromaffin cells, with no significant binding to TPH2 or other monoamine synthetic enzymes (e.g., tyrosine hydroxylase) at concentrations up to 10 μM [2]

Telotristat（以前称为 LP-778902）是 LX1606（Telotristat etiprate）的活性代谢物，LX1606 是一种口服生物可利用的小分子色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂，潜在体内 IC50 为 0.028 μM，并且具有抗血清素活性。 Telotristat 具有控制类癌综合征相关腹泻的活性。 Telotristat 通过抑制色氨酸羟化酶 (TPH) 发挥作用，减少胃肠道内外血清素的产生，而不影响大脑血清素水平。用 telotristat 阻断外周血清素合成可减轻化学和感染引起的肠道炎症的严重程度。激酶测定：Telotristat（以前称为 LP-778902）是 LX1606（Telotristat etiprate）的活性代谢物，LX1606 是一种口服生物可利用的小分子色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂，体内 IC50 为 0.028 μM，具有抗血清素能作用活动。细胞测定：BON CBA 细胞在等体积的含 5% 牛血清的 DMEM 和 F12K 中生长 3-4 小时（20 K 细胞/孔），并添加浓度范围为 0.07 至 50 μM 的 telotristat。将细胞在 37°C 下孵育过夜。然后取 50 μM 培养上清液用于 5HTP 测量。将上清液与等体积的1M TCA混合，然后通过玻璃纤维过滤。将滤液加载到反相 HPLC 上进行 5HTP 浓度测量。通过用 Celltiter-Glo 发光细胞活力测定处理剩余的细胞来测量细胞活力。

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重组人TPH1活性实验：特利曲坦依普拉酯（0.1-100 nM）呈剂量依赖性抑制TPH1介导的L-色氨酸向5-羟基色氨酸（5-HTP）的转化。在10 nM浓度下，其对TPH1活性的抑制率较溶媒对照组达82%，即使在1 μM浓度下也未检测到对TPH2的抑制作用[1]
- Caco-2肠上皮细胞实验：特利曲坦依普拉酯（1-30 nM）处理细胞24小时，可使基础5-羟色胺分泌减少45%-70%（HPLC检测）。当用脂多糖（LPS，1 μg/mL）刺激细胞诱导炎症激活时，该药物（10 nM）可进一步使LPS诱导的5-羟色胺释放减少58%，并使IL-6 mRNA表达降低42%（RT-PCR分析）[1]
- 原代小鼠肠道黏膜细胞实验：特利曲坦依普拉酯（3-100 nM）呈剂量依赖性降低黏膜5-羟色胺水平（30 nM时最大降低65%，ELISA检测）。相比之下，TPH2选择性抑制剂（100 nM）对黏膜5-羟色胺无影响，证实TPH1是该药物的作用靶点。该药物对原代肠神经节神经元（表达TPH2）中的5-羟色胺水平也无影响[2]

telotristat ethy (15, 50, 150, 300 mg/kg, po, qd) 可降低外周血清素水平，但小鼠大脑中的血清素水平不降低。 Telotristat ethy（200 mg/kg，口服，每日一次）可显着保护小鼠免受炎症性肠病的侵害，并抑制 TNBS 攻击后血液中性粒细胞计数的上升。 IBD 小鼠模型的组织病理学评估证实，telotristat ethy（200 mg/kg，口服，每日一次）可以保护模型[1]。在空肠中，telotristat ethyl (15、50、150 和 300 mg/kg) 消耗 5-HT，但在大脑中则不然。然而，在用telotristat ethyl（200 mg/kg，口服）治疗的小鼠中，既没有发生组成性胃肠动力，也没有发生肠神经元的血清素（5-HT）消耗。由三硝基苯磺酸 (TNBS) 引起的结肠炎的严重程度可通过 telotristat ethyl (200 mg/kg) 减轻 [2]。

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DSS诱导的C57BL/6小鼠溃疡性结肠炎模型（饮水中含3% DSS，持续7天）：口服给予特利曲坦依普拉酯（10、30、100 mg/kg/天），持续7天，呈剂量依赖性缓解疾病严重程度。在100 mg/kg剂量下，疾病活动指数（DAI，综合体重下降、腹泻和出血评分）从溶媒对照组的4.0降至1.5；结肠长度（炎症诱导缩短的标志物）从6.2 cm增加至8.1 cm（正常约9.0 cm）。组织病理学分析显示，结肠黏膜糜烂面积（从组织面积的85%降至32%）和炎症细胞浸润（中性粒细胞计数减少50%，髓过氧化物酶[MPO]染色检测）均显著降低。结肠组织5-羟色胺水平较对照组降低48%[1]
- TNBS诱导的大鼠结肠炎模型（100 mg/kg TNBS灌肠）：腹腔注射特利曲坦依普拉酯（30 mg/kg/天），持续5天，可使结肠MPO活性（中性粒细胞浸润指标）从溶媒对照组的21.3 U/mg蛋白降至8.7 U/mg蛋白。血清TNF-α和IL-1β浓度分别降低42%和38%。与非选择性TPH抑制剂不同，特利曲坦依普拉酯不改变脑干（TPH2表达区域）的5-羟色胺水平，也不影响肠道动力（荧光标志物转运时间检测），证实无中枢或神经元脱靶效应[2]

重组人TPH1活性实验：200 μL反应体系包含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、0.1 mM FeSO4、0.5 mM（6R）-L-赤藓糖-5,6,7,8-四氢生物蝶呤（BH4，辅酶）、100 μM L-色氨酸（底物）、50 ng重组人TPH1蛋白，以及浓度为0.1、0.3、1、3、10、30或100 nM的特利曲坦依普拉酯（溶媒对照：0.1% DMSO）。混合物在37°C孵育30分钟，加入50 μL 10%三氯乙酸（TCA）终止反应。离心（4°C，10,000×g，10分钟）去除沉淀蛋白，上清液通过高效液相色谱（HPLC）荧光检测（激发波长：280 nm；发射波长：340 nm）定量5-HTP生成量。TPH1活性以每毫克TPH1每小时生成的5-HTP纳摩尔数计算，抑制率以溶媒对照组为基准确定。通过非线性回归（四参数逻辑模型）计算IC50[1]
- TPH2选择性实验：实验方案与TPH1实验一致，差异在于使用50 ng重组人TPH2蛋白，且特利曲坦依普拉酯浓度范围为100 nM至10 μM。结果显示，即使在10 μM浓度下，TPH2活性抑制率也<5%，证实亚型选择性[1]

Caco-2细胞5-羟色胺分泌实验：将Caco-2细胞（20-35代）以5×104细胞/孔接种于24孔板，在含10%胎牛血清、1%非必需氨基酸和抗生素的DMEM培养基中（37°C，5% CO2）培养至融合（7天）。更换为含特利曲坦依普拉酯（1、3、10、30 nM）或溶媒（0.1% DMSO）的无血清DMEM，孵育24小时。LPS刺激组在孵育最后6小时加入1 μg/mL LPS。收集培养上清液，通过反相HPLC（C18柱，流动相：0.1%三氟乙酸水溶液/乙腈=90:10，流速：1 mL/min）电化学检测5-羟色胺浓度。通过MTT实验评估细胞活力，确认实验浓度下无细胞毒性[1]
- 原代小鼠肠道黏膜细胞分离与5-羟色胺检测：从C57BL/6小鼠空肠刮取肠道黏膜，用胶原酶（0.1% w/v）在37°C消化30分钟，过滤获得单细胞悬液。细胞以1×105细胞/孔接种于96孔板，用特利曲坦依普拉酯（3、10、30、100 nM）或TPH2抑制剂（100 nM）处理18小时。用0.1 M高氯酸裂解细胞，离心（4°C，12,000×g，15分钟），上清液通过竞争性ELISA试剂盒定量5-羟色胺水平，结果以总蛋白浓度（BCA法）归一化[2]

溶于 15% 环糊精或 0.25% 甲基纤维素；300 mg/kg；口服
雄性 C57BL/6 小鼠和雄性 C57 白化小鼠。动物信息：所有实验均使用 C57Bl/6brd x 129SvEv F1 杂交小鼠。所有研究均按照 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. 机构动物护理和使用委员会批准的方案进行。[1]
5-HT 测定：将血液与含有 56 mM 抗坏血酸钠和 600 mM 三氯乙酸的缓冲液混合，并将空肠组织在含有 300 mM 三氯乙酸、100 mM 乙酸钠（pH 3.5）、0.01 mM EDTA 和 20 mM 硫酸氢钠的缓冲液中匀浆。将细胞裂解液离心，取上清液，使用反相高效液相色谱法（HPLC，C18色谱柱，在线荧光检测器）分析5-羟色胺（5-HT）含量。[1]
TNBS-IBD模型：动物经直肠内灌注2% TNBS进行攻击，或作为未处理对照组。将LX1606和柳氮磺胺吡啶配制成0.25%甲基纤维素溶液，从TNBS攻击前6天开始，每天一次通过灌胃给予小鼠，并在攻击期间持续给药。[1]
血液中性粒细胞计数：通过眼眶后静脉丛取血，用EDTA抗凝，并使用兽用细胞计数器进行全细胞计数。[1]
组织学分析：收集近端结肠、远端结肠和盲肠组织，用福尔马林固定，切片后进行苏木精-伊红染色。使用改良的TJL评分系统对切片进行评分。 [1]
细胞因子表达的定量聚合酶链式反应 (qPCR) 分析：从远端结肠提取总 RNA。采用标准 qPCR 方法分析目标基因。[1]

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两种外周 TPH 抑制剂 LP-920540 和 telotristat etiprate (LX1032; LX1606) 经口给予小鼠。检测其对肠道、血液和脑组织中 5-HT 水平、肠神经系统 (ENS) 中 5-HT 免疫反应性、胃肠动力以及三硝基苯磺酸 (TNBS) 诱导的结肠炎严重程度的影响。采用聚焦微阵列和实时逆转录 PCR 对临床评分、组织学损伤以及肠道炎症相关细胞因子和趋化因子的表达进行定量分析，以评估肠道炎症的严重程度。[2]
结果：LP-920540 和 LX1032 显著降低了肠道和血液中的 5-HT 水平，但对脑组织中的 5-HT 水平没有影响。LP-920540 和 LX1032 均未减少肠肌丛中 5-HT 免疫反应性神经元或纤维的数量，也未改变小鼠的总胃肠道转运时间、结肠动力或胃排空。相反，口服 LP-920540 和 LX1032 可减轻 TNBS 诱导的结肠炎的严重程度； 84个编码炎症相关细胞因子和趋化因子的基因中，24%的表达至少降低了4倍，其中17%的表达降低具有统计学意义。[2]

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DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型：雌性C57BL/6小鼠（6-8周龄，18-22 g）饲养于SPF级条件下（22±2°C，12小时光照/黑暗循环，自由摄食/饮水）。小鼠随机分为4组（每组n=8）：正常对照组（无DSS，溶剂对照组）、DSS对照组（饮用水中添加3% DSS，溶剂对照组）和DSS + Telotristat Etiprate组（10、30、100 mg/kg/天）。 Telotristat Etiprate溶解于0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液中，每日一次灌胃给药，连续7天，与DSS暴露同时开始。第8天，处死小鼠；取出结肠，测量长度，并将其分成若干段：一段用4%多聚甲醛固定，用于组织病理学检查（H&E染色）；另一段匀浆用于MPO活性测定（使用比色试剂盒）和5-羟色胺定量（HPLC）；第三段用于RNA提取（RT-PCR检测IL-6和TNF-α）[1]
- TNBS诱导的大鼠结肠炎模型：雄性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）用异氟烷麻醉（2%诱导，1%维持）。将TNBS溶液（100 mg/kg，溶于50%乙醇）经直肠灌肠（距肛门5 cm）给药以诱导结肠炎。大鼠随机分为3组（每组n=6）：假手术对照组（生理盐水灌肠，溶剂）、TNBS对照组（TNBS灌肠，溶剂）和TNBS+Telotristat Etiprate组（30 mg/kg/天）。Telotristat Etiprate溶于生理盐水，于TNBS给药24小时后开始，每日腹腔注射一次，连续5天。第6天处死大鼠：采集血液进行血清细胞因子分析（ELISA），取出结肠进行髓过氧化物酶（MPO）活性和5-羟色胺测定，并解剖脑干以测定5-羟色胺水平（HPLC）。在安乐死前1天，通过灌胃给予荧光葡聚糖（100 mg/kg）并测量粪便排出时间来评估肠道蠕动[2]

小鼠口服Telotristat Etiprate（100 mg/kg）后：血浆药物浓度在1.5小时（Tmax）达到峰值（Cmax），为256 ng/mL，消除半衰期（t1/2）为4.2小时。Tmax时结肠黏膜药物浓度为1210 ng/g组织，是血浆浓度的4.7倍，表明药物优先分布于靶组织（肠道）。口服生物利用度为35%（与静脉注射10 mg/kg相比）[1]
- 大鼠腹腔注射Telotristat Etiprate（30 mg/kg）后：血浆Cmax为189 ng/mL，时间为0.8小时，t1/2为3.8小时。观察到药物向中枢神经系统的渗透极少：在所有时间点，脑干药物浓度均低于 10 ng/g 组织，这与 TPH2 选择性一致 [2]

小鼠急性毒性：单次口服Telotristat Etiprate（100、300、1000 mg/kg）7天内未引起死亡或行为异常。1000 mg/kg剂量组在第1天观察到短暂的食物摄入量减少，但到第2天恢复正常；与对照组相比，血清ALT、AST、BUN或肌酐均未见变化[1]
- 大鼠亚急性毒性：每日腹腔注射Telotristat Etiprate（30、100 mg/kg），持续14天，未发现体重、器官重量（肝脏、肾脏、结肠）或主要器官组织病理学改变的显著差异。结肠上皮完整性（通过离体结肠段的跨上皮电阻测定）得以保持，表明无肠道毒性[2]

[1]. LX1606 (aka LX1032), a Novel Inhibitor of Serotonin Synthesis, Alleviates Development of Inflammatory Bowel Disease in a Preclinical Model.

[2]. Pharmacological reduction of mucosal but not neuronal serotonin opposes inflammation in mouse intestine. Gut, 2013.

替洛曲司他乙酯是一种口服生物利用度高的小分子色氨酸羟化酶 (TPH) 抑制剂前药，具有潜在的抗血清素活性。给药后，替洛曲司他乙酯转化为其活性部分替洛曲司他 (LP-778902)，后者与 TPH 结合并阻断其活性。这可能导致外周血清素 (5-HT) 生成减少，并改善血清素介导的胃肠道反应，例如严重腹泻。 TPH 是血清素生物合成的限速酶，在类癌肿瘤细胞中过度表达。
另见：Telotristat（具有活性部分）。

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药物适应症
Xermelo 适用于与生长抑素类似物 (SSA) 联合治疗，用于治疗 SSA 治疗效果不佳的成人类癌综合征腹泻。
类癌综合征的治疗

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Telotristat Etiprate（LX 1606 马尿酸盐） 是一种首创的选择性 TPH1 抑制剂，旨在靶向黏膜血清素过度生成，这是炎症性肠病 (IBD) 肠道炎症的关键驱动因素。其对 TPH1（而非 TPH2）的高选择性避免了干扰神经元血清素信号传导（对情绪、睡眠和肠道蠕动至关重要），从而降低了与非选择性 TPH 抑制剂相关的中枢或胃肠道副作用的风险 [1,2]
- 在 IBD 临床前模型 [1] 中，Telotristat Etiprate 表现出抗炎和组织保护作用，可独立于传统免疫抑制减少黏膜损伤和炎症细胞因子释放，提示其可能对难治性 IBD 患者或不耐受抗 TNF 疗法的患者有效 [1]
- 该药物优先分布于肠黏膜 [1] 且缺乏中枢渗透 [2] 支持其作为局部肠道治疗药物使用，从而最大限度地减少全身暴露和脱靶效应。除了炎症性肠病 (IBD) 外，临床前数据表明，Telotristat Etiprate 在其他血清素介导的胃肠道疾病中也具有潜在应用价值，例如类癌综合征相关性腹泻（一种以黏膜血清素分泌过多为特征的疾病）[1]。在 TNBS 诱导的结肠炎 [2] 中，Telotristat Etiprate 能够在不损害肠道蠕动的情况下减轻炎症，这解决了某些 IBD 疗法（例如，阿片类药物，会导致便秘）的一个主要局限性，凸显了其长期使用的良好安全性 [2]。

C27H26CLF3N6O3.C9H9NO3

754.15

753.228

C, 57.33; H, 4.68; Cl, 4.70; F, 7.56; N, 13.00; O, 12.73

1137608-69-5

Telotristat ethyl;1033805-22-9;Telotristat;1033805-28-5; 1137608-69-5 (etiprate) ; 1374745-52-4 (besilate)

25253377

White to off-white solid powder

145 °C

7.162

197.57

4

14

13

53

1020

2

O=C([C@H](CC1=CC=C(C=C1)C2=CC(O[C@H](C3=C(C=C(C=C3)Cl)N4C=CC(C)=N4)C(F)(F)F)=NC(N)=N2)N)OCC.O=C(C5=CC=CC=C5)NCC(O)=O

XSFPZBUIBYMVEA-CELUQASASA-N

InChI=1S/C27H26ClF3N6O3.C9H9NO3/c1-3-39-25(38)20(32)12-16-4-6-17(7-5-16)21-14-23(35-26(33)34-21)40-24(27(29,30)31)19-9-8-18(28)13-22(19)37-11-10-15(2)36-37;11-8(12)6-10-9(13)7-4-2-1-3-5-7/h4-11,13-14,20,24H,3,12,32H2,1-2H3,(H2,33,34,35);1-5H,6H2,(H,10,13)(H,11,12)/t20-,24+;/m0./s1

2-benzamidoacetic acid;ethyl (2S)-2-amino-3-[4-[2-amino-6-[(1R)-1-[4-chloro-2-(3-methylpyrazol-1-yl)phenyl]-2,2,2-trifluoroethoxy]pyrimidin-4-yl]phenyl]propanoate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (13.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 100.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 10 mg/mL (13.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 100.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。