| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TRPM8 antagonist 2 targets transient receptor potential melastatin 8 (TRPM8) (IC₅₀: 11 nM, determined by FLIPR calcium flux assay; Ki: 7.3 nM, determined by radioligand binding assay)
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TRPM8 Antagonist 2 (Compound 14) 是一种强效 TRPM8 拮抗剂，IC50 为 0.2 nM，用于研究神经性疼痛综合征。在表达 TRPM8 通道亚型的 HEK293 稳定细胞的 Ca2+ 荧光测试中，TRPM8 Antagonist 2 有效抑制薄荷醇诱导的细胞内 Ca2+ 水平升高（IC50，40 nM）[1]。
TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2） 在稳定表达人TRPM8的HEK293细胞中，强效抑制薄荷醇（100 μM）或冷模拟剂（icilin，1 μM）诱导的TRPM8通道激活，FLIPR钙流实验测得IC₅₀为11 nM [1] 通过[³H]icilin放射性配体结合实验，显示其与TRPM8受体竞争性结合，Ki值为7.3 nM [1] 对TRPM8具有高选择性，对测试的其他TRP通道（TRPV1、TRPV3、TRPV4、TRPA1）或离子通道（钠、钾通道）无显著抑制作用（IC₅₀ > 10 μM）[1] 在浓度高达10 μM时，不影响HEK293-TRPM8细胞或原代背根神经节（DRG）神经元的活力（MTT法检测）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
此外，TRPM8拮抗剂2（0.1和1μg，皮下注射）可以减轻奥沙利铂（OXP）引起的模拟冷异常性疼痛[1]。 TRPM8 拮抗剂 2（1、10 和 30 mg/kg，皮下注射）表现出显着的剂量依赖性镇痛活性，并在 30 mg/kg 剂量下抑制湿狗休克 (WDS) 样冷超敏反应。
在小鼠冷板实验（5°C）中，口服给予TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2）（3、10、30 mg/kg），剂量依赖性延长爪舔/颤动潜伏期，30 mg/kg时效果最佳（潜伏期较溶媒对照组增加约180%）[1] 在大鼠慢性收缩损伤（CCI）诱导的神经病理性疼痛模型中，口服该化合物（10、30 mg/kg，每日1次，持续7天），显著减轻冷异常痛（丙酮滴注实验评估）和机械痛敏（冯·弗雷丝实验评估）[1] 在小鼠角叉菜胶诱导的炎症痛模型中，口服给药（30 mg/kg）减轻热痛敏（热板实验）和机械异常痛，疗效与加巴喷丁（100 mg/kg）相当 [1] 镇痛作用起效快（给药后1小时内），30 mg/kg剂量下作用持续约6小时 [1] |
| 酶活实验 |
FLIPR钙流实验：将稳定表达人TRPM8的HEK293细胞接种于384孔板，加入钙敏感荧光染料，37°C孵育1小时 [1]
加入系列稀释的TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2）（0.1 nM–10 μM），孵育30分钟后，加入薄荷醇（100 μM）或icilin（1 μM）激活TRPM8 [1] 使用FLIPR仪器实时检测荧光强度，拟合抑制曲线计算IC₅₀值 [1] 放射性配体结合实验：将HEK293-TRPM8细胞的膜制备物与[³H]icilin（固定浓度）和系列稀释的TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2）（0.1 nM–1 μM）混合，4°C孵育2小时 [1] 通过快速过滤玻璃纤维滤膜分离结合态与游离态配体，液体闪烁计数法测定放射性 [1] 在过量未标记icilin存在下测定非特异性结合，采用Cheng-Prusoff方程计算Ki值 [1] |
| 细胞实验 |
稳定表达人TRPM8的HEK293细胞在添加10%胎牛血清和筛选抗生素的DMEM培养基中，于37°C、5% CO₂培养箱中培养 [1]
原代DRG神经元从成年小鼠中分离、解离，在添加生长因子的神经基底培养基中培养24–48小时 [1] 细胞活力实验：细胞接种于96孔板，用TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2）（0.1 nM–10 μM）处理24小时，加入MTT试剂孵育4小时，二甲基亚砜溶解甲臜结晶，570 nm处测定吸光度 [1] 膜片钳记录（电生理学）：将HEK293-TRPM8细胞接种于盖玻片，室温下进行全细胞膜片钳记录 [1] 通过加入icilin（1 μM）或降低浴液温度至15°C诱导TRPM8电流，记录TRPM8拮抗剂2（TRPM8 antagonist 2）（10、100 nM）对电流幅度的影响 [1] |
| 动物实验 |
雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄）和 Sprague-Dawley 大鼠（200-250 克）用于体内实验，随机分为载体对照组、阳性对照组（加巴喷丁）和TRPM8 拮抗剂 2剂量组（每组 n=8-10）[1]
药物制备：TRPM8 拮抗剂 2溶于 10% DMSO + 90% 聚乙二醇 400 (PEG400) 中，用于灌胃；车辆对照组接受相同的溶剂混合物[1] 冷板试验（小鼠）：将小鼠置于维持在5°C的冷板上，记录口服TRPM8拮抗剂2（3、10、30 mg/kg）之前和之后1、3、6小时的舔爪/扑爪潜伏期[1] CCI神经病理性疼痛模型（大鼠）：通过结扎坐骨神经诱导慢性压迫性损伤；术后7天，大鼠每天口服一次TRPM8拮抗剂2（10、30 mg/kg）或加巴喷丁（100 mg/kg），连续7天[1] - 冷觉过敏：在受伤的爪子上滴加丙酮，并计数缩爪反应的次数[1] - 机械性痛觉过敏：用逐渐增加力的冯·弗雷丝刺激爪子，并记录缩爪阈值[1] 角叉菜胶诱导的炎症性疼痛模型（小鼠）：将角叉菜胶（1%生理盐水）注射到后爪； 1 小时后，口服给予TRPM8 拮抗剂 2（30 mg/kg）或加巴喷丁（100 mg/kg）[1] - 热痛觉过敏：记录热板试验（55°C）中爪缩回潜伏期[1] - 机械性痛觉过敏：测量对冯·弗雷丝纤维的爪缩回阈值[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠中，口服TRPM8拮抗剂2（30 mg/kg）的生物利用度为42%，血浆峰浓度（Cmax）为892 ng/mL，末端半衰期（t1/2）为3.7小时[1]
在大鼠中静脉注射（10 mg/kg）显示总清除率（CL）为18 mL/min/kg，稳态分布容积（Vss）为0.8 L/kg[1] 在人和大鼠肝微粒体中均表现出良好的代谢稳定性（t1/2 > 60分钟）[1] 血浆蛋白结合率低（人血浆为35%，大鼠血浆为41%）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠急性毒性研究表明，口服剂量高达 300 mg/kg 时，未观察到死亡或明显的临床毒性症状（嗜睡、食欲不振、行为异常）[1]
大鼠亚慢性毒性研究（14 天，口服 30 mg/kg/天）未引起体重、血液学参数或肝肾功能（ALT、AST、BUN、Cr）的显著变化[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TRPM8拮抗剂2是一种强效、选择性的色氨酸基合成小分子TRPM8拮抗剂[1]
其镇痛机制涉及阻断DRG神经元中TRPM8介导的冷觉和伤害性信号传导[1] 它具有良好的药代动力学特性和安全性，在治疗神经性疼痛（例如带状疱疹后神经痛）和炎症性疼痛方面显示出潜在的治疗价值[1] 色氨酸骨架赋予其对TRPM8通道的高亲和力和选择性[1] |
| 分子式 |
C26H26N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
398.496846675873
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| 精确质量 |
398.2
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| 元素分析 |
C, 78.36; H, 6.58; N, 7.03; O, 8.03
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| CAS号 |
259674-19-6
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| PubChem CID |
57055437
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
5.5
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| tPSA |
45.3
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
507
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
COC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N(CC3=CC=CC=C3)CC4=CC=CC=C4
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| InChi Key |
HHVOOJDLCVOLKI-VWLOTQADSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H26N2O2/c1-30-26(29)25(16-22-17-27-24-15-9-8-14-23(22)24)28(18-20-10-4-2-5-11-20)19-21-12-6-3-7-13-21/h2-15,17,25,27H,16,18-19H2,1H3/t25-/m0/s1
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| 化学名 |
methyl (2S)-2-(dibenzylamino)-3-(1H-indol-3-yl)propanoate
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| 别名 |
TRPM8 antagonist 2; HVN74196; HVN-74196; HVN 74196;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~250.94 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.67 mg/mL (6.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 26.7 mg/mL的澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中并混合均匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.67 mg/mL (6.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 26.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.67 mg/mL (6.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5094 mL | 12.5471 mL | 25.0941 mL | |
| 5 mM | 0.5019 mL | 2.5094 mL | 5.0188 mL | |
| 10 mM | 0.2509 mL | 1.2547 mL | 2.5094 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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