Urolithin B

Endogenous Metabolite; NF-κB; JNK; ERK; Akt

尿石素B抑制LPS刺激的BV2小胶质细胞中NO和促炎细胞因子的产生，同时增加抗炎细胞因子IL-10。此外，尿石素B抑制脂磷壁酸（LTA）或聚肌苷-聚胞苷酸（poly（I:C））刺激的BV2细胞中NO、TNF-α和IL-6的产生，表明尿石素B的抗炎作用不局限于LPS刺激。尿石素B还通过减少细胞内活性氧（ROS）的产生和NADPH氧化酶亚基的表达，以及通过Nrf2/ARE信号上调抗氧化剂血红素氧化酶-1的表达，显示出抗氧化作用。更详细的机制研究表明，尿石素B通过减少IκBα的磷酸化和降解来抑制NF-κB的活性。此外，尿石素B抑制JNK、ERK和Akt的磷酸化，并增强AMPK的磷酸化作用，这与抗炎和抗氧化过程有关[1]。
尿石素B通过增加蛋白质合成和抑制泛素-蛋白酶体途径增强C2C12肌管的生长和分化。遗传学和药理学的论点支持雄激素受体的含义。信号分析表明雄激素受体和mTORC1通路之间存在串扰，可能通过AMPK [2]。

尿石素B抑制LPS注射小鼠大脑中的小胶质细胞活化[1]
为了验证其体内抗炎作用，我们检测了尿石素B对LPS注射小鼠大脑中小胶质细胞活化的影响。通过定量Iba1的免疫反应性来研究微胶质细胞的激活。与对照组中观察到的数量相比，全身LPS给药增加了具有密集染色的变形虫细胞体的Iba1阳性细胞的数量。然而，尿石素B显著减少了皮层、海马体和黑质中Iba1阳性细胞的数量，表明尿石素B在体内神经炎症条件下有效抑制了小胶质细胞的激活。
体内实验证实，尿石素B诱导小鼠肌肉肥大，并减少坐骨神经切片后的肌肉萎缩[2]。

使用酶联免疫吸附试验（ELISA）、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白质印迹分析检测尿石素B对BV2小胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）和细胞因子表达的影响。使用免疫组织化学评估注射脂多糖（LPS）的小鼠脑中的小胶质细胞活化。使用电泳迁移率变动分析、报告基因分析、蛋白质印迹和RT-PCR分析了尿石素B抗炎和抗氧化作用的详细分子机制[1]。

BV2细胞（1 × 在24孔板中105个细胞/孔）用尿锂蛋白B预处理1 h，并由LPS刺激（100 ng/ml）、聚（I:C）（25 µg/ml）或LTA（10 µg/ml）进行16 h.然后收集上清液，并使用Griess试剂（Promega，Madison，WI）测定累积的一氧化氮水平。根据供应商的说明（BD Biosciences，San Jose，CA），使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测量条件培养基中TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-10的浓度。用2′，7′-二氯荧光素（H2DCF-DA）测定细胞内ROS的积累。用LPS刺激BV2细胞16 h并用20染色 µM H2DCF-DA用于1 h，温度为37°C。在485的激发波长下测量DCF荧光强度 nm，发射波长535 nm在荧光板读取器上[1]。

LPS诱导的炎症和尿石素B的给药[1]
ICR小鼠（雄性，32-37 g，7周龄）购自韩国Orient Bio公司（首尔），饲养于受控环境（21°C，12小时光照/黑暗循环），实验期间可自由摄取食物和水。所有实验均经梨花女子大学机构动物护理和使用委员会批准（IACUC #2014-0274），并按照美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》进行。通过腹腔注射LPS（5 mg/kg）诱导全身炎症。尿石素B（50 mg/kg，腹腔注射）溶于溶剂（1% DMSO生理盐水）中，在LPS注射前4天每天给小鼠给药。

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免疫组织化学[1]
小鼠经LPS处理6小时后，用戊巴比妥麻醉，并经心脏灌注生理盐水和4%多聚甲醛。脑组织用4%多聚甲醛后固定，然后用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤3次，每次10分钟。之后将组织浸泡在30%蔗糖溶液中，再用冰冻切片机切成30 µm厚的切片。将漂浮的切片用0.3%过氧化氢PBS溶液处理30分钟以中和内源性过氧化物酶活性，然后用含10% Triton X-100的PBS溶液（PBST）冲洗。将切片在含4%牛血清白蛋白的PBS溶液中孵育1小时，然后与Iba1一抗（1:500）在4℃下孵育过夜。将切片与生物素标记的二抗（1:1000）孵育1小时，再与亲和素-生物素-辣根过氧化物酶（HRP）复合物（Vector Laboratories，Burlingame，CA）孵育，然后用PBST洗涤。使用3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐（DAB）显色。切片脱水后，加盖玻片，在光学显微镜下观察。

[1]. Anti-inflammatory and antioxidant mechanisms of urolithin B in activated microglia. Phytomedicine. 2019 Mar 1;55:50-57.

[2]. Urolithin B, a newly identified regulator of skeletal muscle mass. J Cachexia Sarcopenia Muscle. 2017 Aug;8(4):583-597.

[3]. Urolithin B suppresses tumor growth in hepatocellular carcinoma through inducing the inactivation of Wnt/β-catenin signaling. J Cell Biochem. 2019 Oct;120(10):17273-17282.

尿石素B是香豆素类化合物。
据报道，石榴（Punica granatum）和黄足蝠（Trogopterus xanthipes）中含有尿石素B，并有相关数据。

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背景：尿石素B是鞣花单宁的肠道微生物代谢产物之一，存在于多种植物性食物中，包括石榴、浆果、核桃、热带水果和药用草本植物。尽管已报道尿石素B具有多种生物活性，但其在神经炎症中的抗炎和抗氧化作用尚未得到明确证实。目的：本研究旨在探讨尿石素B在活化小胶质细胞中的抗炎和抗氧化作用，并阐明其潜在的分子机制。研究设计：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法检测尿石素B对BV2小胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧合酶-2（COX-2）和细胞因子表达的影响。采用免疫组织化学方法评估脂多糖（LPS）注射小鼠脑内小胶质细胞的活化情况。本研究采用电泳迁移率变动分析、报告基因检测、蛋白质印迹和RT-PCR等方法，详细分析了尿石素B抗炎和抗氧化作用的分子机制。结果表明，尿石素B抑制脂多糖（LPS）刺激的BV2小胶质细胞中一氧化氮（NO）和促炎细胞因子的产生，同时增加抗炎细胞因子IL-10的表达。此外，尿石素B抑制脂磷壁酸（LTA）或聚肌苷酸-聚胞苷酸（poly(I:C)）刺激的BV2细胞中NO、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-6的产生，提示尿石素B的抗炎作用并非仅限于LPS刺激。尿石素B还通过降低细胞内活性氧（ROS）的产生和NADPH氧化酶亚基的表达，以及通过Nrf2/ARE信号通路上调抗氧化酶血红素加氧酶-1的表达，发挥抗氧化作用。更详细的机制研究表明，尿石素B通过降低IκBα的磷酸化和降解来抑制NF-κB活性。此外，尿石素B抑制JNK、ERK和Akt的磷酸化，并增强AMPK的磷酸化，而AMPK与抗炎和抗氧化过程相关。最后，我们证实尿石素B抑制LPS注射小鼠脑内的小胶质细胞活化。结论：尿石素B强大的抗炎和抗氧化作用可能为与氧化应激和小胶质细胞活化相关的神经炎症性疾病提供治疗潜力。[1]

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背景：肌肉大小的控制是健康的重要组成部分。事实上，骨骼肌萎缩会导致力量下降、生活质量降低和代谢紊乱。因此，为了应对这一广泛的健康问题，需要制定旨在减轻肌肉萎缩并促进肌肉生长的策略，以应对各种（病理）生理状态，例如肌少症、制动、营养不良或恶病质。在本研究中，我们测试了尿石素B（一种鞣花单宁衍生的代谢物）对骨骼肌生长的影响。方法：将C2C12肌管用15 μM的尿石素B处理24小时。在体内实验中，将微型渗透泵植入小鼠体内，持续28天每天输注10 μg尿石素B。我们还研究了坐骨神经去神经支配小鼠的肌肉萎缩情况，这些小鼠也以同样的方式接受尿石素B治疗。结果：我们的实验表明，尿石素B通过增加蛋白质合成和抑制泛素-蛋白酶体途径来促进C2C12肌管的生长和分化。遗传学和药理学论证支持雄激素受体参与其中。信号通路分析表明雄激素受体与mTORC1通路之间存在串扰，可能通过AMPK介导。体内实验证实，尿石素B可诱导小鼠肌肉肥大，并减少坐骨神经切断后的肌肉萎缩。结论：本研究强调了尿石素B在治疗与各种（病理）生理状态相关的肌肉萎缩方面的潜在应用价值。[2] 膳食鞣花单宁（ETs）的摄入已被证实对多种慢性疾病有益，包括癌症和心血管疾病。尿石素是源自ETs的肠道菌群代谢产物，被认为是这些健康益处的分子。先前的研究表明，尿石素对前列腺癌、乳腺癌和结肠癌具有抗增殖作用。然而，其对肝细胞癌（HCC）的作用机制尚不明确。本文旨在探讨尿石素家族成员尿石素B（UB）在肝细胞癌（HCC）中的作用。我们评估了UB对HCC细胞活力、细胞周期和凋亡的影响，发现UB能够抑制HCC细胞增殖，其机制是通过诱导细胞周期阻滞和凋亡。此外，UB能够增加磷酸化β-catenin的表达并阻断其从细胞核向细胞质的转位，从而抑制Wnt/β-catenin信号通路。利用异种移植小鼠模型，我们发现UB在体内能够抑制肿瘤生长。总之，我们的数据表明，UB能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路在体外和体内抑制HCC细胞增殖，提示UB可能成为开发靶向HCC抗癌药物的潜在候选药物。[3]

C13H8O3

212.2008

212.047

C, 73.58; H, 3.80; O, 22.62

1139-83-9

5380406

Light yellow to yellow solid powder

1.395g/cm3

432.6ºC at 760 mmHg

196.6ºC

4.34E-08mmHg at 25°C

1.679

Endogenous Metabolite; Monophenols

2.651

50.44

1

3

0

16

289

0

O1C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C2C([H])=C([H])C(=C([H])C1=2)O[H])=O

WXUQMTRHPNOXBV-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H8O3/c14-8-5-6-10-9-3-1-2-4-11(9)13(15)16-12(10)7-8/h1-7,14H

3-hydroxy-6H-benzo[c]chromen-6-one

Urolithin B; NSC94726; 3 hydroxy Urolithin; NSC-94726; Urolithin-B; NSC 94726; 3-hydroxy Urolithin;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~250 mg/mL (~1178.13 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.80 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。