| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
D4 Receptor; 5-HT1A Receptor (pIC50 = 8.87); 5-HT1A Receptor (pA2 = 9.71)
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| 体外研究 (In Vitro) |
在持续表达多巴胺 D2L 或 D4.4 受体的 HEK 293 细胞中，评估了 WAY-100635 的功能特征和结合亲和力[1]。 WAY-100635 在 D2L、D3 和 D4 处表现出结合亲和力。 2 个受体分别为 940、370 和 16 nM。如饱和度分析所示，[3H] WAY-100635 在 D4.2 受体上的 Kd 为 2.4 nM。 WAY-100635 的 EC50 为 9.7 nM，使其成为 HEK-D4.4 细胞的强激动剂。 WAY-100635 对 D4.4 受体具有 3.3 nM 的强亲和力 [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
用 WAY-100635（1 mg/kg；皮下注射；雄性 Sprague-Dawley 大鼠）治疗可消除尼古丁依赖大鼠服用红景天所带来的戒断症状严重程度的减轻[2]。
小鼠静脉注射后，[3H]WAY 100635 可选择性结合大脑 5-HT1A 受体。 WAY 100635 还以剂量依赖性方式阻断 8-OH-DPAT 抑制中缝背侧 5-HT 神经元放电的能力，并诱导 5-HT 综合征、体温过低、食欲过盛以及升高血浆 ACTH 水平。在小鼠明/暗盒焦虑模型中，WAY 100635 诱导类似抗焦虑的作用。 WAY 100635 对大鼠短期记忆延迟匹配位置模型中的认知没有内在影响，但逆转了 8-OH-DPAT 对运动动机表现的破坏性影响。 WAY 100635 以本身无抑制作用的剂量阻断 8-OH-DPAT 对麻醉大鼠中缝背神经元放电的抑制作用。在行为模型中，WAY 100635 本身不会引起明显的行为变化，但可有效拮抗 8-OH-DPAT 在大鼠和豚鼠中引起的行为综合征（最小有效剂量 = 0.003 mg/kg sc，ID50 = 0.01 mg/kg sc） ， 分别）。 WAY 100635 还可阻断 8-OH-DPAT 在小鼠和大鼠中引起的体温过低，皮下注射的 ID50 值为 0.01 mg/kg. |
| 酶活实验 |
Screening Assay[1]
对于NIMH-PDSP在大量克隆受体和转运蛋白上的初步筛选（详见Roth等人（2002）和Shapiro等人（2003）），使用了10μM WAY-100635。在测量到显著抑制的情况下（四次测定的抑制率>50%），用6-10个浓度的未标记配体进行K i测定，并用GraphPad Prism分析数据。 饱和结合实验[1]。 通过刮取培养基中的细胞，然后在1000×g下离心10分钟并吸出培养基来收集全细胞颗粒。然后将颗粒重新悬浮在冰冷的标准结合缓冲液（SBB:50 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM MgCl2和0.1 mM EDTA）中，等分，在4°C下以14000×g离心20分钟，以沉淀膜部分，吸出并储存在-80°C下供将来使用。[1] 通过在冰冷的SBB中重新悬浮来洗涤5-HT1A颗粒，并在4°C下以14000×g离心15分钟，然后吸出缓冲液。类似地洗涤hD4.2颗粒，但在冰冷的多巴胺激动剂结合缓冲液（DABB:50 mM Tris-HCl pH 7.4，5 mM KCl，2 mM MgCl2，2 mM CaCl2）中洗涤。洗涤后的5-HT1A膜在室温SSB中均化，并在10μM 5-HT存在和不存在的情况下与0.004至2.3 nM的12种浓度的[3H]WAY-100635一起孵育，以分别测定总结合和非特异性结合。同样，将洗涤过的hD4.2膜在室温DABB中进行Dounce均质化，并在10μM氯丙嗪存在和不存在的情况下，用0.004至13.4 nM的12种浓度的[3H]WAY-100635孵育，以分别测定总结合和非特异性结合。在室温下2小时后，通过在冷的0.3%PEI预浸过滤器上快速过滤来终止反应。然后在4°C 50 mM Tris-HCl（pH 6.9）中洗涤过滤器三次。然后将过滤后的材料转移到与4ml Ecoscint-A闪烁液（National Diagnostic；美国佐治亚州亚特兰大）混合的闪烁瓶中，并在Beckman LS6500闪烁计数器上计数。[1] 放射性配体结合分析[1]。 细胞在20cm平板上生长至融合。倾析生长培养基，用10ml冰冷的裂解缓冲液（1mM HEPES，pH 7.4和2mM EDTA）代替。10分钟后，从平板上刮下细胞，在30000×g和4°C下离心20分钟。使用Kinematica均质器在6的设置下将所得沉淀重新悬浮在4 ml受体结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4和4 mM MgCl）中5秒，然后将1.0 ml等分试样再次在13000×g下离心10分钟。将沉淀储存在-80°C下直至使用。[1] 然后将颗粒重新悬浮，在受体结合缓冲液（50μg蛋白质/100μl）中研磨使用，并一式两份添加到含有0.1-0.2 nM[3H]斯皮龙和适当药物的测定管中。使用（+）-丁卡醇（5μM）测定非特异性结合。如cAMP结合测定所述，在过滤前，将测定管在37°C下孵育30分钟。将滤板干燥，并向每个孔中加入30μl Packard Microscint-O闪烁液。使用Packard TopCount闪烁计数器测定每孔的放射性。[1] 还进行了放射性配体结合试验，以研究100μM鸟苷基-5′-亚氨基二磷酸（Gpp-[NH]p）对激动剂结合的影响。这些实验是在改良的受体结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，4 mM MgCl和120 mM NaCl）中使用HEK-hD4.4膜进行的。 |
| 细胞实验 |
环腺苷酸积累试验[1]
细胞在48个透明的组织培养板中生长成融合的单层。在测定之前，倾析生长培养基，并将平板置于冰上。在冰上加入在Earle平衡盐溶液（EBSS）测定缓冲液（EBSS含有2%小牛血清、0.025%抗坏血酸和15mM HEPES，pH 7.4）中制备的药物稀释液。5μM毛喉素刺激cAMP积累，每次测定都在500μM异丁基甲基黄嘌呤存在下进行。在37°C水浴中孵育15分钟。为了终止刺激，倾析测定培养基，在冰上加入100μl 3%三氯乙酸裂解细胞。在定量cAMP之前，将板在4°C下储存至少1小时。[1] 环AMP的定量[1] 使用之前描述的竞争性结合试验评估环AMP的积累（Watts和Neve 1996）。简而言之，将细胞裂解物（12μl）一式两份加入含有[3H]cAMP（终浓度为1 nM）和cAMP结合蛋白（500μl缓冲液中的100-150μg）的cAMP结合缓冲液（100 mM Tris-HCl，pH 7.4，100 mM NaCl，5 mM EDTA）的测定管中。反应管在4°C的冰上孵育2-3小时，然后使用96孔Packard FilterMate细胞采集器通过过滤（GF/C滤板）收获。将滤板干燥，并向每个孔中加入30μl Packard Microscint-O闪烁液。使用Packard TopCount闪烁计数器测定每孔的放射性。根据0.01至300pmol cAMP的标准曲线估算每个样品中cAMP的浓度。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠（220-240 g）[2]
剂量：1 mg/kg 给药途径：皮下注射（药代动力学/PK研究） 实验结果：总戒断评分降低，不动时间增加，埋藏行为增加。 [123I]6b和[123I]7b在大鼠体内的生物分布研究：一般程序[3] 动物实验采用体重约230 g的雄性Wistar大鼠。所采用的动物实验方案已获得荷兰国家动物护理委员会和内部伦理委员会的批准，符合荷兰动物实验法的相关规定。放射性标记化合物的溶液在实验前一天配制。大鼠用2%异氟烷麻醉后，经尾静脉注射200 μL放射性标记化合物。在不同时间间隔后，在麻醉状态下，通过颈椎脱臼处死大鼠，并从断头尸体上采集血液。取出目标组织，称重，并使用LKB Wallac 1282 CompuGamma CS测定其放射性。为了计算注射剂量，称取五份注射液，并计数其放射性。结果经衰变校正后，以每克组织注射剂量的百分比±标准差（% ID/g ± SD）表示。[3] [123I]6b[3] 实验使用了两组大鼠，每组四只。第一组大鼠静脉注射200 μL（7 MBq，<20 ng）放射性标记化合物，并在注射后45分钟处死。在第二组中，大鼠在静脉注射[123I]6b（7 MBq）前5分钟，先静脉注射非标记化合物1（2 mg/kg）。注射后45分钟处死大鼠并进行解剖。[3] [123I]7b[3] 本研究使用了三组大鼠，每组四只。每只大鼠静脉注射200 μL（7 MBq，<20 ng）放射性标记化合物。分别在注射后15、45和120分钟处死大鼠，并按上述方法进行处理。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
N-[2-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]乙基]-N-(2-吡啶基)环己烷甲酰胺属于哌嗪类化合物。
研究背景及目的：WAY-100635 是一种典型的 5-HT1A 受体拮抗剂，已被广泛用作药理学探针，用于研究 5-HT1A 受体的分布和功能。我们的研究结果表明，WAY-100635 具有与其 5-HT1A 受体亲和力无关的强效诱导作用。在本研究中，我们评估了该化合物在两种D2样受体亚型上的体外药理学特性。方法：在稳定表达多巴胺D2L或D4.4受体的HEK 293细胞中评估了WAY-100635的功能特性和结合亲和力。结果：美国国立精神卫生研究院（NIMH）精神活性药物筛选项目进行的初步筛选表明，WAY-100635对D2L、D3和D4.2受体的结合亲和力分别为940 nM、370 nM和16 nM。随后的饱和分析表明，[3H]WAY-100635在D4.2受体上的解离常数（Kd）为2.4 nM，仅比5-HT1A受体高十倍。 WAY-100635 及其主要代谢物 WAY-100634 在 HEK-D4.4 细胞中均为强效激动剂（EC50 分别为 9.7±2.2 nM 和 0.65±0.2 nM）。WAY-100635 表现为完全激动剂，而 WAY-100634 则表现为近乎完全激动剂。在 HEK-D2L 细胞中，WAY-100635 对 300 nM 喹吡罗的作用具有微弱的拮抗作用。后续的放射性配体结合研究证实，WAY-100635 对 D4.4 受体具有高亲和力，但与 D2L 受体的结合较弱（分别为 3.3±0.6 nM 和 420±11 nM）。结论：本研究表明，WAY-100635 并非如先前报道的“选择性”5-HT1A 受体拮抗剂，因此，以往将 WAY-100635 作为选择性 5-HT1A 受体拮抗剂的研究结论可能需要重新评估。[1]红景天在传统医学中已有数百年应用历史，用于刺激神经系统、增强身心机能以及治疗疲劳。已知服用红景天提取物具有抗抑郁活性，但其作用机制尚不明确。动物模型和人体研究的证据表明，尼古丁可以减轻抑郁症状，而戒断尼古丁则会诱发抑郁样症状。我们研究了红景天对尼古丁戒断症状的影响。通过皮下注射尼古丁（2 mg/kg，每日四次），持续14天，诱导动物产生尼古丁依赖。另一组动物先接受尼古丁治疗（14天），随后接受红景天提取物治疗，并同时给予选择性5-HT受体拮抗剂WAY 100635（1 mg/kg）。尼古丁戒断后，对动物的行为参数（运动活性、戒断症状、埋弹珠实验）、间脑5-羟色胺代谢和5-羟色胺受体1A表达进行评估。结果显示，用玫瑰红（R. rosea）处理的N组体内5-HT含量显著增加，同时5-羟色胺受体1A也显著增加，这表明5-羟色胺参与了玫瑰红缓解尼古丁戒断症状的有益作用。[2] 本文描述了与化合物1（WAY-100635）相关的5-HT(1A)受体配体的设计、合成和药理学特性。化合物1及其O-去甲基化类似物3中的环己基部分被桥头碘化桥稠环取代：金刚烷基、立方烷基、双环[2.2.2]辛基或双环[2.2.1]庚基。所有类似物在体外均表现出对5-HT(1A)受体的（亚）纳摩尔级亲和力。化合物 6b 和 7b 对该受体的选择性高于其他相关受体，且易于被放射性碘-123 碘化。在人肝细胞中，[(123)I]6b 酰胺水解倾向低，且碳-碘键稳定。[(123)I]6b 和 [(123)I]7b 在大鼠体内的生物分布表明，碳-碘键在体内也稳定。然而，这两种放射性配体的脑摄取率和特异性均显著低于母体分子 1。综上所述，所设计的示踪剂不适用于 SPECT 成像。[3] |
| 分子式 |
C25H34N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
422.573
|
| 精确质量 |
422.268
|
| 元素分析 |
C, 71.06; H, 8.11; N, 13.26; O, 7.57
|
| CAS号 |
162760-96-5
|
| 相关CAS号 |
WAY-100635 maleate;1092679-51-0
|
| PubChem CID |
5684
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow ointment
|
| LogP |
3.828
|
| tPSA |
48.91
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
546
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(N(C1=NC=CC=C1)CCN2CCN(CC2)C3=CC=CC=C3OC)C4CCCCC4
|
| InChi Key |
SBPRIAGPYFYCRT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H34N4O2/c1-31-23-12-6-5-11-22(23)28-18-15-27(16-19-28)17-20-29(24-13-7-8-14-26-24)25(30)21-9-3-2-4-10-21/h5-8,11-14,21H,2-4,9-10,15-20H2,1H3
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| 化学名 |
N-[2-[4-(2-methoxyphenyl)piperazin-1-yl]ethyl]-N-pyridin-2-ylcyclohexanecarboxamide
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| 别名 |
WAY 100635; WAY-100635; 162760-96-5; Way 100635; cyclohexanecarboxamide, n-[2-[4-(2-methoxyphenyl)-1-piperazinyl]ethyl]-n-2-pyridinyl-; CHEMBL31354; N-(2-(4-(2-Methoxyphenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-N-(pyridin-2-yl)cyclohexanecarboxamide; N-[2-[4-(2-methoxyphenyl)piperazin-1-yl]ethyl]-N-pyridin-2-ylcyclohexanecarboxamide; 71IH826FEG; WAY-100635
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~66.67 mg/mL (~157.78 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3665 mL | 11.8324 mL | 23.6647 mL | |
| 5 mM | 0.4733 mL | 2.3665 mL | 4.7329 mL | |
| 10 mM | 0.2366 mL | 1.1832 mL | 2.3665 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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