10058-F4   中文名称: 5-(4-乙基苯亚甲基)绕丹宁

c-Myc
10058-F4 targets the c-Myc transcription factor by disrupting the Myc-Max heterodimer complex, with an IC50 value of 4.5 μM for inhibiting Myc-Max binding in vitro [1]
10058-F4 does not directly inhibit other transcription factor dimers (e.g., Max-Max, Mad-Max) at concentrations up to 20 μM [1]

10058-F4 抑制白血病细胞的生长以及 Myc 和 Max 的二聚化。 10058-F4 诱导 AML 细胞的细胞周期停滞和凋亡。 10058-F4 将 AML 细胞阻滞在 G0/G1 期，下调 c-Myc 表达并上调 CDK 抑制剂 p21 和 p27。同时，10058-F4 通过激活线粒体途径诱导细胞凋亡，具体表现为 Bcl-2 下调、Bax 上调、细胞质细胞色素 C 释放以及 caspase 3、7 和 9 裂解。此外，10058-F4 还诱导骨髓分化。 ，可能通过激活多个转录因子。同样，在原代 AML 细胞中也可以观察到 10058-F4 诱导的细胞凋亡和分化。 10058-F4 降低 c-Myc 蛋白水平，可能通过上调细胞周期蛋白依赖性激酶 (cdk) 抑制剂 p21WAF1 抑制 HepG2 细胞增殖，并降低细胞内 α-胎蛋白 (AFP) 水平。用 10058-F4 处理还会在转录水平下调人端粒酶逆转录酶 (hTERT)。除了抑制 HepG2 细胞的增殖外，10058-F4 还增强对传统化疗药物阿霉素、5-氟尿嘧啶 (5-FU) 和顺铂的敏感性。激酶测定：10058-F4 是一种 c-Myc 抑制剂，可防止 c-Myc-Max 二聚化和 c-Myc 靶基因表达的反式激活。细胞测定：将细胞接种于 96 孔板中（细胞系为 105/mL，原代白血病细胞为 5 × 105/mL），用指定浓度的 10058-F4 处理三次。在不同的时间点，向每个孔中添加 20 μL 5 mg/mL MTT。 37°C 孵育 3 小时后，除去 MTT 培养基并添加 100 μL DMSO 裂解缓冲液。使用分光光度计上的 570 nm 波长，通过处理细胞相对于溶剂对照的吸光度百分比来评估活细胞的数量。

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在人类急性髓系白血病（AML）细胞系（HL-60、U937、THP-1）中，10058-F4 表现出抗增殖活性，IC50 值范围为 7.2 μM 至 12.5 μM [1]
- 10 μM 10058-F4 诱导 HL-60 细胞 G0/G1 期周期阻滞，48 小时后 G0/G1 期细胞比例从 42% 升至 68% [1]
- 15 μM 10058-F4 处理 U937 细胞 72 小时后触发凋亡，表现为膜联蛋白 V 阳性染色（45% 凋亡细胞）及半胱天冬酶 -3 激活（较溶媒组增加 2.8 倍）[1]
- 12 μM 10058-F4 诱导 HL-60 细胞髓系分化，5 天后 62% 的细胞表达 CD11b（分化标志物）[1]
- 在人类肝细胞癌（HCC）细胞系（HepG2、Huh7、SK-Hep1）中，10058-F4 抑制细胞增殖，IC50 值介于 8.6 μM 至 15.3 μM 之间 [2]
- 10 μM 10058-F4 使 HepG2 细胞中人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA 表达下调 70%，蛋白水平降低 65% [2]
- 8 μM 10058-F4 与多柔比星在 HepG2 细胞中具有协同作用，将多柔比星的 IC50 从 0.8 μM 降至 0.2 μM（协同指数 [CI] = 0.38）[2]
- 10058-F4（8-10 μM）抑制 HL-60 和 HepG2 细胞的克隆形成能力，分别使菌落形成率降低 75% 和 68% [1][2]
- Western blot 分析显示，10058-F4（10-15 μM）使 AML 和 HCC 细胞系中 c-Myc 蛋白水平降低 55%-70%，对 Max 蛋白表达无显著影响 [1][2]

单次静脉注射后 5 分钟，血浆 10058-F4 浓度峰值约为 300 μM，并在 360 分钟后降至检测限以下。血浆浓度与时间的关系数据最好通过两室开放线性模型来近似。 10058-F4 的最高组织浓度存在于脂肪、肺、肝脏和肾脏中。 10058-F4 的肿瘤峰值浓度至少比血浆峰值浓度低十倍。在血浆、肝脏和肾脏中鉴定出 10058-F4 的八种代谢物。 10058-F4的终末半衰期约为1小时，分布容积>200ml/kg。用 20 或 30 mg/kg 10058-F4 静脉注射治疗小鼠后，未观察到对肿瘤生长的显着抑制。

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在 HL-60 人 AML 异种移植模型（nu/nu 小鼠）中，10058-F4 腹腔给药（50 mg/kg，每日一次，连续 21 天）的肿瘤生长抑制率（TGI）达 65%，荷瘤小鼠中位生存期较溶媒组延长 40% [3]
- 在 HepG2 人 HCC 异种移植模型（nu/nu 小鼠）中，10058-F4 腹腔给药（60 mg/kg，每日一次，连续 21 天）的 TGI 为 62%，终点时肿瘤重量降低 58% [3]
- 10058-F4 处理组小鼠的肿瘤组织中，c-Myc 蛋白水平降低（较溶媒组减少 60%），TUNEL 阳性凋亡细胞增加（32% vs 溶媒组 8%）[3]
- HepG2 异种移植模型中，10058-F4（50 mg/kg，腹腔给药）联合多柔比星（2 mg/kg，静脉给药）的 TGI 提升至 83%，而多柔比星单独处理的 TGI 为 41% [3]

原癌基因c-Myc在控制细胞增殖、凋亡和分化中起着重要作用，其异常表达在多种人类癌症中常见，包括急性髓系白血病（AML）。作为c-Myc异二聚体与Max反式激活白血病发生中的下游靶基因。最近鉴定的小分子化合物10058-F4抑制c-Myc/Max异二聚可能是一种新的抗白血病策略[1]。

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Myc-Max 结合抑制实验：重组 c-Myc 和 Max 蛋白与含 E-box 共有序列的生物素化 DNA 探针共孵育。加入系列浓度的 10058-F4（1 μM 至 20 μM），25°C 孵育 30 分钟。链霉亲和素包被板捕获 Myc-Max-DNA 复合物，通过特异性抗体检测结合的 c-Myc，从结合抑制的剂量 - 反应曲线计算 IC50 值 [1]
- 转录活性实验：含 E-box 驱动荧光素酶的报告质粒转染 HEK293 细胞。24 小时后，用 10058-F4（5 μM 至 25 μM）处理细胞 16 小时。检测荧光素酶活性，相对于溶媒对照组计算 c-Myc 依赖性转录的抑制率 [1]

将 10058-F4 浓度一式三份应用于铺在 96 孔板中的细胞（细胞系为 10 5 /mL，原代白血病细胞为 5 × 10 5 /mL） 。每个孔接受在不同时间添加的 20 μL 5 mg/mL MTT。 37°C 孵育 3 小时后，添加 100 μL DMSO 裂解缓冲液并除去 MTT 培养基。使用波长为 570 nm 的分光光度计，处理细胞吸光度与溶剂对照细胞相比的百分比用于确定活细胞的数量。

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抗增殖实验：AML 或 HCC 细胞接种于 96 孔板（5×103 个细胞 / 孔），用系列浓度的 10058-F4（2 μM 至 50 μM）处理 72 小时。基于四唑盐还原的比色法评估细胞活力，计算 IC50 值 [1][2]
- 细胞周期分析：10058-F4（10 μM）处理细胞 48 小时后，收集细胞，70% 乙醇固定，碘化丙啶染色，流式细胞术测定细胞周期分布 [1]
- 凋亡实验：细胞经 10058-F4（10-15 μM）处理 72 小时后，用膜联蛋白 V-FITC 和碘化丙啶染色，流式细胞术分析。采用特异性底物的比色法检测半胱天冬酶 -3 活性 [1][2]
- 髓系分化实验：HL-60 细胞用 10058-F4（8-12 μM）处理 5 天。细胞用 CD11b 特异性抗体染色，流式细胞术定量分化阳性细胞 [1]
- RT-PCR 实验：提取 10058-F4 处理（10 μM，48 小时）的 HepG2 细胞总 RNA。通过逆转录 -PCR 定量 hTERT 和 GAPDH（内参）mRNA 水平，采用 ΔΔCt 法计算相对表达量 [2]
- 克隆形成实验：细胞用 10058-F4（8-10 μM）处理 24 小时后，接种于 6 孔板（1×103 个细胞 / 孔），在无药培养基中孵育 14 天。菌落（> 50 个细胞）经染色计数，相对于溶媒对照组计算克隆形成效率 [1][2]

The following groups are stratified based on the C B-17 SCID mice that are bearing PC-3 human prostate tumor xenografts: vehicle control, positive control (10 mg/kg docetaxel), and 10058-F4 treatment (20 or 30 mg/kg/dose). As per our earlier research, the highest dosage of 10058-F4 that can be tolerated on this regimen is 30 mg/kg. For two weeks, mice receive intravenous treatment five days a week.Tumor volumes and body weights are measured twice a week. The second study uses C B-17 SCID mice that have been stratified into similar treatment groups based on the DU145 human androgen-independent prostate cancer xenografts. Docetaxel is given intravenously every seven days in two doses of 10 mg/kg. It is the positive control used in both efficacy studies. Calipers are used to measure tumors, and TV= L×W 2 /2 is the formula used to calculate tumor volumes, where L is the largest diameter of the tumor and W is the smallest diameter perpendicular to L. Mice are monitored for tumor regrowth for a minimum of one week after the last dose is administered.

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HL-60 AML xenograft model: Female nu/nu mice (6-8 weeks old) were subcutaneously implanted with 5×106 HL-60 cells. When tumors reached 100-150 mm3, mice were randomized into groups (n=8/group) and treated with: (1) vehicle (10% DMSO + 40% Cremophor EL + 50% saline) i.p., (2) 10058-F4 (50 mg/kg) i.p. once daily for 21 days, (3) 10058-F4 (50 mg/kg) + doxorubicin (2 mg/kg, i.v. on days 1, 7, 14). Tumor volume, body weight, and survival were monitored [3]
- HepG2 HCC xenograft model: Female nu/nu mice (6-8 weeks old) were subcutaneously implanted with 5×106 HepG2 cells. Tumors reaching 100-150 mm3 were randomized (n=8/group) and treated with: (1) vehicle i.p., (2) 10058-F4 (60 mg/kg) i.p. once daily for 21 days, (3) 10058-F4 (60 mg/kg) + doxorubicin (2 mg/kg, i.v. on days 1, 7, 14). Tumor volume and weight were measured at endpoint [3]
- Pharmacokinetic study: Male CD-1 mice were administered 10058-F4 either intravenously (20 mg/kg) or orally (100 mg/kg). Blood samples were collected at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, and 24 hours post-dosing. Tissues (liver, spleen, kidney, tumor) were collected at 2 and 8 hours to assess distribution [3]

In mice, intravenous administration of 10058-F4 (20 mg/kg) resulted in a Cmax of 8.6 μM, AUC0-24h of 32.4 μM·h, and terminal half-life (t1/2) of 5.8 hours [3]
- Oral administration of 10058-F4 (100 mg/kg) in mice showed low oral bioavailability (18%), with a Cmax of 1.7 μM and AUC0-24h of 7.6 μM·h [3]
- 10058-F4 exhibited high tissue distribution, with tumor-to-plasma concentration ratios of 2.3 and 1.8 at 2 and 8 hours post-intraperitoneal dosing (50 mg/kg) [3]
- The major metabolic pathway of 10058-F4 in mice involves hepatic oxidation, with two main metabolites detected in plasma and liver tissue [3]
- 10058-F4 was primarily excreted via feces (62% of dose) and urine (28% of dose) within 72 hours of intravenous administration [3]

In repeat-dose intraperitoneal toxicity studies in mice (21 days, 30-80 mg/kg/day), 10058-F4 had a maximum tolerated dose (MTD) of 60 mg/kg/day, with dose-limiting toxicity (DLT) of mild hepatotoxicity (elevated ALT/AST by 1.8-2.2-fold at 80 mg/kg/day) [3]
- 10058-F4 (50-60 mg/kg/day, i.p. for 21 days) caused transient weight loss (≤7%), which recovered within 5 days of treatment cessation [3]
- No significant histopathological changes were observed in kidney, heart, or spleen of mice treated with 10058-F4 at 60 mg/kg/day for 21 days [3]
- Human plasma protein binding of 10058-F4 was 89% at 10 μM concentration [3]
- 10058-F4 did not inhibit human cytochrome P450 enzymes (CYP1A2, CYP2C9, CYP3A4) at concentrations up to 25 μM [3]

[1]. A small-molecule c-Myc inhibitor, 10058-F4, induces cell-cycle arrest, apoptosis, and myeloid differentiation of human acute myeloid leukemia. Exp Hematol. 2006 Nov;34(11):1480-9.

[2]. Small-molecule c-Myc inhibitor, 10058-F4, inhibits proliferation, downregulates human telomerase reverse transcriptase and enhances chemosensitivity in human hepatocellular carcinoma cells. Anticancer Drugs. 2007 Feb;18(2):161-70.

[3]. Efficacy, pharmacokinetics, tisssue distribution, and metabolism of the Myc-Max disruptor, 10058-F4 [Z,E]-5-[4-ethylbenzylidine]-2-thioxothiazolidin-4-one, in mice. Cancer Chemother Pharmacol. 2009 Mar;63(4):615-25.

10058-F4 is a member of the class of thiazolidinones that is 2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-one which is substituted at position 5 by a (4-ethylphenyl)methylidene group. It is a cell permeable inhibitor of c-Myc-Max dimerization and exhibits antitumour effects in vivo. It downregulates c-Myc expression and upregulates CDK inhibitors, p21 and p27 resulting in the inhibition of proliferation, induction of apoptosis and cell cycle arrest in G0/G1 phase. It has a role as an apoptosis inducer and an antineoplastic agent. It is a thiazolidinone and an olefinic compound.

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10058-F4 is a small-molecule inhibitor of c-Myc, designed to disrupt the Myc-Max heterodimer formation required for c-Myc-mediated transcriptional activation [1]
The antitumor activity of 10058-F4 is mediated by downregulating c-Myc-dependent genes involved in cell proliferation, survival, and telomerase activity [1][2]
10058-F4 induces myeloid differentiation in AML cells, representing a dual mechanism of action (cytotoxicity + differentiation) for leukemia treatment [1]
10058-F4 enhances the sensitivity of HCC cells to doxorubicin by reducing hTERT expression and c-Myc-dependent DNA repair pathways [2]
The low oral bioavailability of 10058-F4 limits oral administration, but intraperitoneal delivery achieves effective tumor concentrations with manageable toxicity [3]

C12H11NOS2

249.35

249.028

C, 57.80; H, 4.45; N, 5.62; O, 6.42; S, 25.72

403811-55-2

1271002

Yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

387.1±52.0 °C at 760 mmHg

187.9±30.7 °C

0.0±0.9 mmHg at 25°C

1.664

4.38

93.53

1

3

2

16

330

0

O=C1NC(S/C1=C/C2=CC=C(CC)C=C2)=S

SVXDHPADAXBMFB-JXMROGBWSA-N

InChI=1S/C12H11NOS2/c1-2-8-3-5-9(6-4-8)7-10-11(14)13-12(15)16-10/h3-7H,2H2,1H3,(H,13,14,15)/b10-7+

(5E)-5-[(4-ethylphenyl)methylidene]-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-4-one

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 2% DMSO +Corn oil : 10 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。