| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SCR130 targets DNA Ligase IV (specifically the Ligase IV/XRCC4 complex). It shows minimal or no effect on Ligase III and Ligase I at equivalent concentrations. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
SCR130（7-21 μM；48 小时）可增加早期和晚期凋亡细胞的数量。SCR130 通过内源性和外源性途径诱导细胞凋亡。SCR130 可上调 p-p53、BCL2 和 MCL1 的表达，以及细胞色素 C、BAX 和 BAK 的表达。已有研究报道 SCR130 可增加 FAS 和 SMAC-DIABLO 蛋白的表达，并激活 caspase 8[1]。SCR130（48 小时）在 Reh、HeLa、CEM、Nalm6 和 N114 细胞中的 IC50 值分别为 14.1 μM、5.9 μM、6.5 μM、2.2 μM 和 11 μM。这些结果表明 SCR130 具有细胞毒性。 SCR130 与 Reh 和 Nalm6 细胞系联合给药时，可导致细胞死亡增加，从而放大辐射（0.5 和 1 Gy）的效应[1]。当 SCR130 抑制内源性非同源末端连接 (NHEJ) 时，未修复的 DNA 断裂会积累。SCR130 处理会导致 DNA 双链断裂 (DSB) 积累，因为它抑制内源性 NHEJ 并触发细胞凋亡途径，最终导致细胞死亡[1]。
SCR130 (500 µM) 以剂量依赖性方式 (100-1000 µM) 抑制大鼠睾丸和脾脏提取物催化的 DNA 末端连接 [1]。 在纯化的 Ligase IV/XRCC4 介导的末端连接实验中，SCR130 显示出浓度依赖性抑制作用 (100-1000 µM) [1]。 SCR130在测试浓度下对连接酶III或连接酶I介导的末端连接几乎没有抑制作用[1]。 在细胞毒性试验中，SCR130的IC50值如下：Nalm6细胞：2.2 µM；Reh细胞：14 µM；HeLa细胞：6 µM；CEM细胞：6 µM；与野生型Nalm6细胞（IC50 2 µM）相比，连接酶IV缺失的N114细胞的敏感性降低了5倍（IC50 ~10 µM），证实了其对连接酶IV的特异性[1]。 与γ射线（0.5和1 Gy）联合使用可增强其对Reh和Nalm6细胞的细胞毒性[1]。 SCR130处理（7、14、21 µM）以浓度依赖的方式增加Reh细胞中53BP1的聚集灶[1]。 与单独使用SCR130或SCR130联合辐射（0.5/1 Gy）显著增加了Reh、Nalm6和HeLa细胞中53BP1和γH2AX的聚集灶[1]。 HeLa细胞的中性彗星试验显示，单独使用SCR130（3、6、9 µM）或与1 Gy辐射联合使用均可增加彗星尾DNA百分比和Olive矩[1]。 SCR130（7、14、21 µM）可诱导Reh细胞线粒体膜电位丧失（JC-1试验）并增加早期/晚期凋亡细胞（Annexin V/PI染色）[1]。对用SCR130（7、14、21 µM）处理的Reh细胞进行Western blot分析显示，pATM、磷酸化p53、细胞色素C、BAX、BAK、裂解的PARP1、caspase 9、caspase 8、FAS和SMAC-DIABLO的表达呈浓度依赖性增加，而BCL2和MCL1在最高浓度下降低；KU70、连接酶IV、XRCC4和连接酶III的水平保持不变[1]。[1] |
| 酶活实验 |
在无细胞DNA末端连接实验中，使用大鼠睾丸和脾脏提取物测试了SCR130。将提取物与放射性标记的双链寡聚DNA（75 bp，5'端突出）在含有ATP和不同浓度SCR130（100-1000 µM）的缓冲液中于25°C孵育1小时。终止反应，纯化产物，并在变性聚丙烯酰胺凝胶上进行分离，以检测二聚体和环状产物[1]。
在末端连接实验中，使用纯化的Ligase IV/XRCC4（在细菌或昆虫细胞中过表达），以相同的DNA底物和递增浓度的SCR130（100-1000 µM）于25°C孵育1小时；通过变性PAGE分析连接效率[1]。 纯化的连接酶III和连接酶I也进行了类似的测试，以检测SCR130对末端连接的抑制作用[1]。 采用圆二色谱(CD)光谱法研究了结合情况。将从细菌中纯化的全长连接酶IV/XRCC4或其DNA结合域(DBD)与4 µM SCR130孵育，并记录CD光谱。加入SCR130后，观察到光谱模式发生显著变化（表明β-折叠的出现），提示SCR130与连接酶IV的DBD直接结合[1]。[1] |
| 细胞实验 |
细胞凋亡分析[1]
细胞类型： Reh 细胞 测试浓度： 7 μM、14 μM 和 21 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 表明晚期和早期凋亡细胞的数量呈浓度依赖性增加。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型：Reh细胞 测试浓度：7 μM、14 μM和21 μM 孵育时间：48小时 实验结果：显示pATM水平呈浓度依赖性增加，并通过磷酸化激活p53。 使用台盼蓝染色排除法评估SCR130的细胞毒性。将细胞（Nalm6、Reh、HeLa、CEM、N114）用递增浓度（0.1、0.5、1、2、5、10、50、100 µM）处理48小时；IC50值根据活细胞百分比计算[1]。 对于与辐射联合治疗，Reh 和 Nalm6 细胞用 IC50 剂量的 SCR130（Reh 细胞为 14 µM，Nalm6 细胞为 2 µM）处理，并暴露于 0.5 或 1 Gy γ 射线；分别在 24 小时和 48 小时收集细胞进行台盼蓝染色 [1]。 免疫荧光：用 SCR130（7、14、21 µM）处理 Reh 或 HeLa 细胞，或与辐射（0.5/1 Gy）联合处理，固定后，用抗 53BP1 或抗 γH2AX 抗体染色，随后用 Alexa Fluor 标记的二抗染色，细胞核用碘化丙啶或 DAPI 复染；使用 ImageJ 计数荧光灶 [1]。 中性彗星试验：将 HeLa 细胞用 SCR130（3、6、9 µM）单独处理或与 1 Gy 辐射联合处理，包埋于琼脂糖中，裂解，在中性条件下进行电泳，用溴化乙锭染色；使用 CometScore 软件定量彗星尾 DNA 百分比和 Olive 矩（每个样本 ≥250 个细胞）[1]。 细胞周期分析：将 Reh 细胞用 SCR130（7、14、21 µM）处理 48 小时，用 70% 乙醇固定，用碘化丙啶 (PI) 染色，通过流式细胞术分析；定量 SubG1 期细胞群 [1]。 线粒体膜电位：将 Reh 细胞用 SCR130（7、14、21 µM）处理 48 小时，用 JC-1 染料染色，通过流式细胞术分析；缬氨霉素用作阳性对照[1]。 细胞凋亡检测：用SCR130（7、14、21 µM）处理Reh细胞48小时，用Annexin V-FITC和PI染色，通过流式细胞术分析早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞[1]。 蛋白质印迹：用SCR130（7、14、21 µM）处理Reh细胞48小时，裂解细胞，等量上样蛋白质，用针对pATM、ATM、p53、磷酸化p53、BCL2、MCL1、细胞色素C、BAX、BAK、裂解PARP1、caspase 9、caspase 8、FAS、SMAC-DIABLO、KU70、连接酶IV、XRCC4、连接酶III的抗体进行检测；丽春红染色用作上样对照[1]。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
在 Ligase IV 缺失的 N114 细胞系中，SCR130 的细胞毒性（IC50 ~10 µM）比野生型 Nalm6 细胞（IC50 2 µM）低 5 倍，证实了 Ligase IV 依赖性细胞死亡 [1]。在 Reh 细胞中，SCR130 在所有测试浓度（7-21 µM）下均未诱导细胞周期阻滞，但增加了 SubG1 期细胞的比例 [1]。该化合物通过内在途径（细胞色素 C 释放、BAX/BAK 上调、caspase 9 激活）和外在途径（FAS 上调、caspase 8 激活）诱导细胞凋亡 [1]。SCR130 是在 SCR7 的核心结构中引入螺环而衍生而来，与 SCR7 相比，其在诱导癌细胞系细胞毒性方面的效力提高了 20 倍 [1]。
它具有开发为癌症治疗药物的潜力，并且由于其在低浓度下对连接酶IV具有特异性的非同源末端连接抑制作用，也可用于改进精确的基因组编辑（例如CRISPR-Cas9）[1]。[1] |
| 分子式 |
C19H13CL2N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
418.296420812607
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| 精确质量 |
417.01
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| CAS号 |
2377858-38-1
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| PubChem CID |
146165950
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid powder
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| LogP |
3.6
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| tPSA |
103
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
662
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C=CC(=CC=1)C1CC(C2C=CC(=CC=2)Cl)=NC21C(NC(NC2=O)=S)=O
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| InChi Key |
QEMQLCCYJLGAKB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H13Cl2N3O2S/c20-12-5-1-10(2-6-12)14-9-15(11-3-7-13(21)8-4-11)24-19(14)16(25)22-18(27)23-17(19)26/h1-8,14H,9H2,(H2,22,23,25,26,27)
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| 化学名 |
2,4-bis(4-chlorophenyl)-8-sulfanylidene-1,7,9-triazaspiro[4.5]dec-1-ene-6,10-dione
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 100 mg/mL (239.06 mM )
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3906 mL | 11.9531 mL | 23.9063 mL | |
| 5 mM | 0.4781 mL | 2.3906 mL | 4.7813 mL | |
| 10 mM | 0.2391 mL | 1.1953 mL | 2.3906 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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