Aromadendrin (Dihydrokaempferol)   中文名称: 香橙素

Apoptosis; Bcl-2; Bcl-xL

二氢山奈酚（0.3–300 μM；48 小时）似乎不会影响正常滑膜细胞，但有必要降低 RA-FLS 活性[1]。在 48 小时内，二氢山奈酚 (3-30 μM) 会增加干细胞的数量（包含早期和晚期斑块细胞；分别约为 3.8% 和 9.6%）[1]。在 48 小时内，二氢山奈酚 (3–30 μM) 增强 Bax 和 Bad 的表达，抑制 Bcl-2 和 Bcl-xL 的表达.

---

此外，大量的二氢山柰酚在体外的凋亡效应也得到了评估。二氢山柰酚对滑膜细胞的增殖表现出抑制作用。此外，二氢山柰酚促进了Bax和Bad的表达，以及caspase-9、caspase-3和PARP的裂解。同时，它抑制了Bcl-2和Bcl-xL的表达。这些发现表明，从B. championii的乙酸乙酯提取物中分离出的二氢山柰酚有效地促进了凋亡，这是一个通过抑制凋亡活性实现的重要过程。这些结果为进一步研究B. championii在治疗RA中的应用提供了鼓舞人心的依据。

---

二氢山柰酚减少RA-FLSs的增殖 [1]
如图2所示，二氢山柰酚（0.3, 3, 30, 300 μM）对正常滑膜细胞的存活没有显著影响（图2(a)）。但二氢山柰酚（0.3, 3, 30, 300 μM）浓度依赖性地降低了RA-FLSs的存活率（图2(b)）。用超过3 µM浓度的二氢山柰酚处理这些细胞48小时，导致细胞存活率显著下降（图2(b)）。基于这些发现，我们在后续实验中使用3, 30 µM浓度的二氢山柰酚。

---

二氢山柰酚诱导RA-FLSs凋亡 [1]
为了确认二氢山柰酚是否诱导RA-FLSs凋亡，进行了annexin V/PI双染色实验。通过流式细胞术分析检测了磷脂酰丝氨酸（凋亡的标志物）的逆转。如图3所示，用二氢山柰酚（3, 30 µM）处理后，凋亡细胞（包括早期和晚期凋亡细胞）的百分比逐渐增加（分别为~3.8%和~9.6%），而对照组为~2.3%。这表明二氢山柰酚显著诱导了RA-FLSs的凋亡。

---

二氢山柰酚调节RA-FLSs中凋亡相关蛋白的表达 [1]
在研究的进一步部分，细胞与不同浓度的二氢山柰酚一起孵育，以评估其对滑膜细胞的促凋亡活性。结果（图4）显示，二氢山柰酚显著促进了Bax和Bad的表达，并抑制了Bcl-2和Bcl-xL的表达。此外，如图5所示，二氢山柰酚显著增加了caspase-3和caspase-9的裂解片段，并且裂解的PARP蛋白水平也显著增加。总的来说，这些发现表明二氢山柰酚引发了凋亡。

MDA作为脂质过氧化标志物，在tac处理的小鼠心脏中增加了3倍以上。在体内，ARO (Aromadendrin)/二氢山奈酚有效抑制了这种增加（图3A）。另一种脂质过氧化标志物4-HNE在TAC治疗后升高，而ARO降低了这一趋势（图3B和C）。同样，GSH/GSSG比率是一个重要的抗氧化标志物。本研究发现，tac处理小鼠的GSH/GSSG比例降低，ARO恢复了体内降低（图3D）。细胞渗透DCF-DA实验证实，在基础条件下，ARO对ROS没有影响，而PE处理后ROS形成明显减少，且呈浓度相关（图3E）。[2]

细胞增殖分析[1]
细胞类型：正常滑膜细胞； RA-FLS 细胞
测试浓度：0.3 μM、3 μM、30 μM、300 μM
孵育时间：48 小时
实验结果：RA-FLS 增殖减少。

---

细胞凋亡分析 [1]
细胞类型： RA-FLS 细胞
测试浓度： 3 μM、30 μM
孵育持续时间：48小时
实验结果：诱导RA-FLS细胞凋亡。

---

蛋白质印迹分析 [1]
细胞类型： RA-FLS 细胞
测试浓度： 3 μM、30 μM
孵育时间：48小时
实验结果：促进Bax和Bad表达，增加caspase-3、caspase-9和切割的PARP片段和抑制Bcl -2 和Bcl-xL 表达。

---

细胞活力测定 [1]
RA-FLSs在96孔板中培养，并通过MTS法评估细胞活力。将培养在96孔板中的RA-FLSs用不同浓度（0.3、3、30、300 μM）的二氢山柰酚处理48小时，然后在37°C下与MTS一起孵育4小时。随后，使用酶标仪在570 nm波长下测定吸光度。

---

流式细胞术分析 [1]
将培养在6孔板中的RA-FLSs用不同浓度的二氢山柰酚处理48小时。然后，按照制造商的协议收集并定量细胞。简而言之，将细胞重悬于结合缓冲液中，并在室温下与5 µL annexin V-FITC和5 µL PI在黑暗中孵育15分钟。最后，加入400 µL结合缓冲液，随后使用流式细胞仪在488 nm激发波长和530 nm发射波长下分析样品。凋亡细胞以占总细胞数的百分比表示，并进行了三次流式细胞术分析。

---

Western Blot分析 [1]
根据细胞活力的结果，使用Western Blot分析评估受二氢山柰酚影响的蛋白水平。其方法与之前描述的方法类似。用二氢山柰酚处理后，收集细胞并用裂解缓冲液裂解，然后在Heraeus Sepatech离心机中以12,000 g离心15分钟。收集上清液，并通过BCA法测定蛋白浓度。随后，将蛋白与上样缓冲液混合并在100°C下孵育6分钟。最后，使用针对cleaved caspase-3（1:500）、cleaved caspase-9（1:500）、p-Bad（1:500）、Bcl-xL（1:1,000）、Bax（1:1,000）、Bcl-2（1:1,000）、cleaved PARP（1:1,000）和β-actin（1:1,000）的一抗在4°C下孵育过夜，进行Western Blot分析。

[1]. Apoptosis Effects of Dihydrokaempferol Isolated from Bauhinia championii on Synoviocytes. Evid Based Complement Alternat Med. 2018 Dec 2;2018:9806160.

[2]. Inhibition of cardiac hypertrophy by aromadendrin through down-regulating NFAT and MAPKs pathways. Biochem Biophys Res Commun. 2018 Dec 2;506(4):805-811.

(+)-二氢山奈酚是一种四羟基黄烷酮，其羟基位于3、4'、5和7位。它是一种代谢产物。它属于四羟基黄烷酮、二氢黄酮醇类、仲α-羟基酮类和4'-羟基黄烷酮类。它在功能上与山奈酚相关。它是(+)-二氢山奈酚7-氧代阴离子的共轭酸。
据报道，芳香树皮素存在于茶树（Camellia sinensis）、苹果（Maclura pomifera）和其他有相关数据的生物体中。
另见：巴西莓果肉（部分）。

---

羊蹄甲（Bauhinia championii (Benth.) Benth.）是一种传统药用植物，在中国用于治疗类风湿性关节炎（RA），尤其是在畲族人群中。本研究聚焦于具有潜在凋亡抑制作用的藤本植物B. championii (Benth.) Benth.的活性成分。我们建立了一种从B. championii乙酸乙酯提取物中分离化合物的常规植物化学分离方法。该方法包括提取、乙酸乙酯液液萃取和后续化合物纯化。此外，我们采用MTS法体外评价了其中含量丰富的二氢山奈酚的细胞活力，并通过Annexin V/PI染色（流式细胞术分析）和Western blot分析了其抗凋亡作用。结果表明，从B. championii的乙酸乙酯提取物中分离得到9种黄酮类化合物和5种其他化合物，并鉴定为β-谷甾醇（1）、5,6,7,3',4',5'-六甲氧基黄酮（2）、3',4',5,7-四羟基黄酮（3）、5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮（4）、4'-羟基-5,7,3',5'-五甲氧基黄酮（5）、芹菜素（6）、甘草素（7）、5,7-二羟基香豆素（8）、3',4',5,7-五甲氧基黄酮（9）、正十八烷酸酯（10）、羽扇豆酮（11）、邻苯二甲酸二丁酯（12）、二氢山奈酚（13）和…… 5,7,3′,5′-四羟基-6-甲基黄烷酮 (14)。其中，化合物 5-14 为首次从 B. championii 中分离得到。此外，还体外评估了丰富的二氢山奈酚的促细胞凋亡作用。二氢山奈酚对滑膜细胞增殖具有抑制作用。此外，二氢山奈酚促进 Bax 和 Bad 的表达，以及 caspase-9、caspase-3 和 PARP 的裂解。同时，它抑制 Bcl-2 和 Bcl-xL 的表达。这些结果表明，从 B. championii 乙酸乙酯提取物中分离得到的二氢山奈酚能有效促进细胞凋亡，而细胞凋亡是通过抑制凋亡活性实现的。研究结果令人鼓舞，支持进一步研究B. championii在类风湿关节炎（RA）治疗中的应用。[1]
根据已获得的结果，从B. championii (Benth.) Benth的乙酸乙酯提取物中分离出二氢山奈酚和其他13种化合物。鉴于其对滑膜细胞的抗增殖作用，二氢山奈酚似乎是新型抗关节炎药物的良好候选药物，建议对其进行进一步的生物医学研究。[1]

---

心脏肥大是对压力负荷过重的适应不良反应，是心力衰竭和其他不良心血管事件的重要危险因素。芳香树素（ARO）具有显著的抗脂质过氧化功效，是治疗糖尿病和心血管疾病的潜在药物。在本研究中，我们利用去氧肾上腺素在新生大鼠心室肌细胞（RNVMs）中建立了心脏肥大细胞模型。该细胞模型以蛋白质合成增加和心肌细胞体积增大为特征，而ARO治疗可以浓度和时间依赖性地使这些变化恢复正常。在横向主动脉缩窄（TAC）诱导的心脏肥大模型中，ARO给药改善了心脏功能障碍，并减轻了心脏肥大指标，如心室质量/体重比值、心肌细胞横截面积以及ANP、BNP和Myh7的表达。ARO治疗还抑制了心肌纤维化及其相关纤维化基因的表达。我们的进一步研究表明，ARO可以下调压力负荷诱导的丙二醛（MDA）和4-HNE的表达，恢复GSH/GSSG比值的降低，同时阻止NFAT的核转位和MAPKs通路的激活。综上所述，ARO对小鼠实验性心脏肥大具有保护作用，提示其具有作为治疗病理性心脏肥大的新型药物的潜力。[2]

C15H12O6

288.255

288.063

C, 62.50; H, 4.20; O, 33.30

480-20-6

480-20-6

122850

White to off-white solid powder

1.6±0.1 g/cm3

639.0±55.0 °C at 760 mmHg

247 - 249 °C

247.3±25.0 °C

0.0±2.0 mmHg at 25°C

1.729

2.42

107.22

4

6

1

21

392

2

O1C2=C([H])C(=C([H])C(=C2C([C@@]([H])([C@@]1([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])O[H])=O)O[H])O[H]

PADQINQHPQKXNL-LSDHHAIUSA-N

InChI=1S/C15H12O6/c16-8-3-1-7(2-4-8)15-14(20)13(19)12-10(18)5-9(17)6-11(12)21-15/h1-6,14-18,20H/t14-,15+/m0/s1

(2R,3R)-3,5,7-trihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-2,3-dihydrochromen-4-one

Aromadendrin; trans-Dihydrokaempferol; dihydrokaempferol; 480-20-6; (+)-Dihydrokaempferol; katuranin; Aromadedrin; (+)-aromadendrin; Aromadendrol; trans Dihydrokaempferol; Dihydrokaempferol; (+) Aromadendrin; (+)-Aromadendrin; (+) Dihydrokaempferol; (+)-Dihydrokaempferol

2934.99.03.00

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~250 mg/mL (~867.3 mM)
H2O: < 0.1 mg/mL

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.22 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。