| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CDK9/Cyclin T (IC50 = 10 nM); CDK5/p35 (IC50 = 13 nM); cdk2/cyclin A (IC50 = 47 nM); Cdk4/cyclin D1 (IC50 = 100 nM); cdk6/cyclin D3 (IC50 = 170 nM); Cdk1/cyclin B (IC50 = 210 nM); CDK7/Cyclin H/MAT1 (IC50 = 2400 nM); GSK3β (IC50 = 89 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 MM 细胞中，AT7519 Hydrochloride (0–4 μM) 会引起剂量依赖性细胞毒性，IC50 范围为 0.5–2 μM。这种细胞毒性与 GSK-3β 激活有关，并且不依赖于拐点阻断。 MM 细胞的时间诱导诱导是通过 AT7519 盐酸盐 (0.5 μM) 实现的。此外，在 MM.1S 细胞中，AT7519 Hydrochloride (0.5 μM) 部分抑制 RNA 产生并防止 RNA 聚合酶 II CTD 被磷酸化 [1]。 AT7519 盐酸 (250 nM) 抑制人肿瘤细胞系的细胞周期进程。人类肿瘤细胞系在接触 AT7519 盐酸时同样会发展为肝癌 [2]。 AT7519 盐酸 (100-700 nM) 在空白细胞系中诱导细胞效应。在人类肿瘤细胞系中，AT7519 盐酸盐也抑制转录。此外，AT7519 Hydrochronide 可抑制 RNA 聚合酶 II 并降低抗氧化蛋白水平 [3]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在人类 MM 异种移植模型中，AT7519 盐酸盐可抑制肿瘤的生长 [1]。 AT7519 盐酸盐（4.6 和 9.1 mg/kg/剂）可抑制早期 HCT116 肿瘤异种移植物的生长。在患有 HCT116 肿瘤的 BALB/c 裸鼠中，靶标 CDK 同样会受到 AT7519 盐酸盐（10 mg/kg，腹腔注射）的抑制[2]。
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| 酶活实验 |
使用辐射滤光片结合对 CDK1、CDK2 和 GSK3-β 进行激酶测定。 CDK 4 和 6 的测定形式为 ELISA，CDK 5 的测定形式为 DELFIA。将相关 CDK 和 0.12 μg/mL 组蛋白 H1 分别在 20 mM MOPS、pH 7.2、25 mM β 中孵育 2 或 4 小时-甘油磷酸、5 mM EDTA、15 mM MgCl2、1 mM 原钒酸钠、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA、45 μM ATP (0.78 Ci/mmol) 和各种浓度的 AT7519。为了测试 GSK3-β，添加适当的酶和 5 μM 糖原合酶肽 2，并将混合物在 10 mM MOPS pH 7.0、0.1 mg/mL BSA、0.001% Brij-35、0.5% 下孵育三小时甘油、0.2 mM EDTA、10 mM MgCl2、0.01% β-巯基乙醇、15 μM ATP (2.31 Ci/mmol)，所有这些都经过测试。添加过量正磷酸以终止反应后，使用 Millipore MAPH 过滤板过滤测定反应。之后，清洁板，添加闪烁剂，并使用 Packard TopCount 闪烁计数装置测定放射性。持续 30 分钟，CDK5、CDK5/p35、1μM 生物素化组蛋白 H1 肽（生物素-PKTPKKAKKL）、pH 7.5、25 mM Tris-HCl、0.025% Brij-35、0.1 mg/mL BSA、1 mM DTT 、15 μM ATP 和不同浓度的 AT7519 进行孵育。 λex=335nm、λem=620nm 处的时间分辨荧光用于使用 EDTA 终止测定反应，将混合物转移至中性亲和素包被的板，并使用兔磷酸 cdk1 底物多克隆抗体和 DELFIA 铕标记对磷酸化肽进行定量抗兔 IgG 二抗。板用 GST-pRb769-921 包被，并用 Superblock 封闭以进行 CDK 4 和 6 测定。为了启动反应，将 ATP 添加到 CDK4 或 6 中。孵育条件包括 15 mM MgCl2、50 mM HEPES、pH 7.4、1 mM DTT、1 mM EGTA、pH 8.0、0.02% Triton X-100、2.5% DMSO 和各种浓度的 AT7519。 30 分钟后添加 0.5 M EDTA pH 8.0 终止反应。之后，清洗板并与二抗（碱性磷酸酶连接的抗兔）一起孵育一小时，并与稀释在 Superblock 中的一抗（抗 p-Rb 丝氨酸 780）一起孵育一小时。使用 Attophos 系统显色板后，在 Spectramax Gemini 读板器上测量荧光，激发波长为 450 nm，发射波长为 580 nm。使用 GraphPad Prism 软件，IC50 值是根据每种情况下的复制曲线计算得出的。
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| 细胞实验 |
3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5 二苯基四溴化钠 (MTT) 染料吸光度用于测量 AT7519 对 MM 细胞系、原代 MM 细胞和 PBMNC 活力的影响。三碘胸苷摄取 (3H-TdR) 用于定量 DNA 合成。将 MM 细胞（2–3 × 104 细胞/孔）在 96 孔培养板中于 37°C 下培养 24 或 48 小时，并添加培养基和不同浓度的 AT7519、重组 IL-6（ 10 ng/mL) 或 IGF-1 (50 ng/mL)。然后测量 3H-TdR 掺入。
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| 动物实验 |
In order to assess the in vivo anti-MM activity of AT7519, 5×106 MM.1S cells are subcutaneously injected into male SCID mice using 100 μL of serum-free RPMI 1640 medium. Mice are treated intraperitoneally (IP) with vehicle or AT7519 dissolved in 0.9% saline solution when tumors are detectable. Ten mice in the first group receive a daily dose of 15 mg/kg for two weeks, while the second group receives a daily dose of 15 mg/kg three times a week for four weeks in a row. The carrier is given to the control group separately at the same time. Tumor volume is calculated using the formula V= 0.5 a × b2, where a represents the tumor's long diameter and b its short diameter. Tumor size is measured every other day in two dimensions using calipers. When a tumor is ulcerated or grows to a size of 2 cm3, the animal is killed. From the first day of treatment until death, survival and tumor growth are assessed.
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| 参考文献 |
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| 分子式 |
C16H18CL3N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
418.71
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| 精确质量 |
417.052608
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| 元素分析 |
C, 45.90; H, 4.33; Cl, 25.40; N, 16.73; O, 7.64
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| CAS号 |
902135-91-5
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| 相关CAS号 |
AT7519;844442-38-2;AT7519 TFA;1431697-85-6
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| PubChem CID |
25033099
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
586.0±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
308.2±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.654
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| LogP |
0.95
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| tPSA |
98.91
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
479
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
0
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| InChi Key |
PAOFPNGYBWGKCO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H17Cl2N5O2.ClH/c17-10-2-1-3-11(18)13(10)15(24)22-12-8-20-23-14(12)16(25)21-9-4-6-19-7-5-9;/h1-3,8-9,19H,4-7H2,(H,20,23)(H,21,25)(H,22,24);1H
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| 化学名 |
4-[(2,6-dichlorobenzoyl)amino]-N-piperidin-4-yl-1H-pyrazole-5-carboxamide;hydrochloride
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| 别名 |
AT-7519 diHCl; AT7519; AT 7519; AT-7519
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~52 mg/mL (~124.2 mM)
Ethanol: ~28 mg/mL (~66.9 mM) Water: ~43 mg/mL (~102.7 mM) |
|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3883 mL | 11.9414 mL | 23.8829 mL | |
| 5 mM | 0.4777 mL | 2.3883 mL | 4.7766 mL | |
| 10 mM | 0.2388 mL | 1.1941 mL | 2.3883 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
M1-20
CDK12-Cyclin K Ligand-Linker Conjugates 1
CGP-74514 dihydrochloride
(S)-CDK2 degrader 6
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