| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Highly selective inhibitor of Aurora A kinase with a Ki value of 1.8 nM (measured via recombinant Aurora A kinase binding assay). It exhibited minimal inhibitory activity against Aurora B kinase, with an IC₅₀ > 1000 nM, confirming >550-fold selectivity for Aurora A over Aurora B [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
TCS7010 是一种令人难以置信的 Aurora A 特异性抑制剂。由于没有同时阻断 Aurora B 的额外负担，TCS7010 是检查 Aurora A 激酶细胞功能的有用工具化学品[1]。
对人癌细胞系的抗增殖活性：TCS7010对多种Aurora A过表达的癌细胞系表现出强效抗增殖作用，IC₅₀值范围为22 nM至30 nM。具体示例包括： - HCT116（结直肠癌）：IC₅₀=25 nM - MCF-7（乳腺癌）：IC₅₀=30 nM - SK-OV-3（卵巢癌）：IC₅₀=22 nM - A549（肺癌）：IC₅₀=28 nM[1] - 诱导G2/M期细胞周期停滞：用TCS7010（20 nM）处理HCT116细胞24小时，通过碘化丙啶（PI）染色和流式细胞术检测显示，G2/M期细胞比例从溶剂对照组的15%显著升高至处理组的60%。这种停滞与有丝分裂纺锤体形成缺陷相关，通过α-微管蛋白免疫荧光染色可观察到该现象[1] - 抑制Aurora A底物磷酸化：对经TCS7010（10-50 nM）处理6小时的HCT116细胞进行蛋白质印迹（western blot）分析，发现Aurora A关键底物TPX2的磷酸化水平呈剂量依赖性降低，20 nM剂量下较对照组降低70%。未观察到Aurora B介导的组蛋白H3（Ser10）磷酸化发生显著变化，证实了靶点选择性[1] - 诱导癌细胞凋亡：用TCS7010（30 nM）处理MCF-7细胞48小时，膜联蛋白V阳性凋亡细胞（早期+晚期凋亡）比例较溶剂对照组增加35%。Western blot结果显示，凋亡标志物切割型caspase-3增加2.8倍，切割型PARP增加2.5倍[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用
HCT116结直肠癌裸鼠异种移植模型：对携带HCT116异种移植瘤的雌性裸鼠（6-8周龄），以50 mg/kg剂量口服TCS7010，每日1次，连续14天。该处理相较于溶剂对照组实现70%的肿瘤生长抑制率（TGI）。实验结束时，处理组肿瘤体积为210±28 mm³，对照组为700±45 mm³（p<0.001）。处理组小鼠未出现显著体重下降（<5%）[1] - SK-OV-3卵巢癌裸鼠异种移植模型：对携带SK-OV-3异种移植瘤的裸鼠，以30 mg/kg剂量腹腔注射TCS7010，每日1次，连续18天，实现65%的TGI。对剥离的肿瘤进行免疫组化染色显示，磷酸化TPX2水平降低80%，证实TCS7010在体内可抑制Aurora A活性[1] |
| 酶活实验 |
Aurora A激酶活性实验（HTRF格式）：将重组人Aurora A激酶（与TPX2结合以增强活性）与TCS7010（系列浓度：0.01 nM至500 nM）、ATP（10 μM）及生物素化肽底物（源自TPX2的Aurora A磷酸化位点）在激酶缓冲液（50 mM Tris-HCl、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.01% BSA，pH 7.5）中于30°C孵育60分钟。加入50 mM EDTA终止反应，使用链霉亲和素偶联铕穴状化合物和XL665（荧光受体）标记的磷酸化特异性抗体检测磷酸化底物。通过酶标仪测量荧光共振能量转移（FRET）信号，采用竞争性结合模型（假设紧密结合）计算Ki值[1]
- Aurora B选择性实验：为验证选择性，使用重组人Aurora B激酶（与INCENP结合）和组蛋白H3（Ser10）生物素化肽底物重复上述实验。TCS7010测试浓度最高达1000 nM，通过四参数逻辑模型拟合剂量-反应曲线确定IC₅₀值。该实验证实其对Aurora B的抑制作用极弱（IC₅₀>1000 nM）[1] |
| 细胞实验 |
抗增殖实验（CellTiter-Glo法）：将人癌细胞系（HCT116、MCF-7、SK-OV-3、A549）以2×10³个细胞/孔接种于96孔板，在37°C（5% CO₂）下过夜孵育。加入系列浓度（1 nM至200 nM）的TCS7010，继续培养72小时。向每孔加入CellTiter-Glo试剂（其产生的发光强度与活细胞ATP含量成正比），室温孵育10分钟后测量发光强度。使用GraphPad Prism软件计算抑制50%活细胞的TCS7010浓度（IC₅₀）[1]
- 细胞周期分析（PI染色）：将HCT116细胞以5×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，用TCS7010（20 nM）或溶剂处理24小时。胰酶消化收集细胞，用冷PBS洗涤后，在-20°C下用70%乙醇固定过夜。固定后的细胞再次用PBS洗涤，重悬于PI染色液（50 μg/mL PI、100 μg/mL RNase A、0.1% Triton X-100溶于PBS），37°C孵育30分钟。通过流式细胞仪分析细胞周期分布（G0/G1、S、G2/M期），使用ModFit软件定量各时期细胞百分比[1] - Aurora A底物Western blot实验：用TCS7010（10、20、30、50 nM）处理HCT116细胞6小时，随后用RIPA缓冲液（添加蛋白酶和磷酸酶抑制剂）裂解细胞。将蛋白提取物（每泳道30 μg）通过10% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜。膜用5%脱脂牛奶-TBST封闭1小时，然后用抗磷酸化TPX2（Ser466）、总TPX2、磷酸化组蛋白H3（Ser10）和β-肌动蛋白（内参）一抗在4°C下孵育过夜。TBST洗涤后，膜与辣根过氧化物酶偶联的二抗在室温下孵育1小时。使用增强化学发光（ECL）试剂检测信号，通过ImageJ软件定量条带强度[1] - 凋亡实验（膜联蛋白V-FITC/PI双染法）：用TCS7010（30 nM）或溶剂处理MCF-7细胞48小时。收集细胞，用冷PBS洗涤，重悬于膜联蛋白V结合缓冲液。向细胞悬液中加入膜联蛋白V-FITC和PI，室温避光孵育15分钟。通过流式细胞仪检测并定量凋亡细胞（早期凋亡：膜联蛋白V阳性/PI阴性；晚期凋亡：膜联蛋白V阳性/PI阳性）[1] |
| 动物实验 |
HCT116结直肠癌异种移植模型：将5×10⁶个HCT116细胞（悬浮于PBS和Matrigel的1:1混合液中）皮下注射到6-8周龄雌性裸鼠（每组n=8）右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为两组：溶剂对照组（0.5%羧甲基纤维素钠+0.1% Tween 80的蒸馏水溶液）和TCS7010治疗组。TCS7010溶解于溶剂中，浓度为10 mg/mL，并以50 mg/kg的剂量每日一次灌胃给药，连续14天。每2天用游标卡尺测量肿瘤体积，计算公式为（长×宽²）/2。每2天测量一次小鼠体重，以监测毒性[1]
- SK-OV-3卵巢癌异种移植模型：将1×10⁷个SK-OV-3细胞（与Matrigel混合）皮下植入雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到约120 mm³时，每组小鼠（n=8）接受TCS7010或载体治疗。TCS7010溶于5% DMSO + 45% PEG400 + 50%生理盐水的载体中，并以30 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，连续18天。研究结束时，切除肿瘤，称重，并用10%中性缓冲福尔马林固定，用于磷酸化TPX2的免疫组织化学分析[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，口服 TCS7010 (20 mg/kg) 的口服生物利用度为 32%。血浆浓度-时间曲线显示，给药后 1.8 小时达到血浆峰浓度 (Cmax) 为 1.1 μg/mL，末端半衰期 (t₁/₂) 为 4.5 小时 [1]
- 静脉注射药代动力学（大鼠）：大鼠静脉注射 TCS7010 (5 mg/kg) 后，清除率 (CL) 为 14 mL/min/kg，稳态分布容积 (Vss) 为 5.1 L/kg，t₁/₂ 为 4.2 小时 [1] - 血浆蛋白结合率：通过平衡透析法测定，TCS7010 在人 (97%)、大鼠 (96%) 和小鼠 (95%) 血浆中均表现出较高的血浆蛋白结合率。在37°C下，使用10 kDa分子量截留膜进行透析4小时，血浆中TCS7010浓度为1 μg/mL [1] - 代谢稳定性：在人肝微粒体中，TCS7010的半衰期为3.8小时（中等代谢稳定性）；在大鼠肝微粒体中，t₁/₂为4.3小时。液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析鉴定出主要代谢物为单羟基化衍生物（占总代谢物的55%），该衍生物主要通过CYP3A4介导的代谢生成[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性口服毒性（小鼠）：雌性CD-1小鼠单次口服剂量高达200 mg/kg的TCS7010未见死亡。剂量≥150 mg/kg时，小鼠出现短暂的运动活性降低，但24小时内恢复。剂量≤100 mg/kg时，未观察到体重显著变化[1]
- 慢性口服毒性（大鼠）：雄性Sprague-Dawley大鼠连续28天口服TCS7010（50 mg/kg，每日一次）。观察到轻度骨髓抑制：与溶剂对照组相比，白细胞计数下降18%，而红细胞计数和血小板计数保持在正常范围内。血清肝功能指标（ALT、AST）和肾功能指标（BUN、肌酐）水平与对照组无显著差异，肝脏、肾脏和心脏组织的病理学检查未发现与治疗相关的病变[1] - 肿瘤细胞与正常细胞的选择性：TCS7010对癌细胞的毒性高于正常人细胞。在正常人包皮成纤维细胞（NHFF）中的IC₅₀为200 nM，而在HCT116癌细胞中的IC₅₀为25 nM，选择性高出8倍[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-(2-氯苯基)-4-[[2-[4-[2-(4-乙基-1-哌嗪基)-2-氧代乙基]苯胺基]-5-氟-4-嘧啶基]氨基]苯甲酰胺是苯甲酰胺类化合物。
TCS7010属于2,4-双苯胺基嘧啶类化合物，该类化合物的化学骨架经过优化，可高效且选择性地抑制Aurora A激酶。其设计旨在解决早期Aurora抑制剂的局限性，例如对Aurora A相对于Aurora B的选择性较差（这会导致脱靶毒性，例如骨髓抑制）[1]。 - TCS7010的作用机制涉及选择性抑制Aurora A激酶，Aurora A激酶是纺锤体组装和中心体成熟的关键调节因子。抑制 Aurora A 可扰乱有丝分裂进程，导致癌细胞（尤其是 Aurora A 过表达的癌细胞，如结直肠癌、乳腺癌和卵巢癌的常见特征）发生 G2/M 期细胞周期阻滞、有丝分裂灾难和随后的细胞凋亡 [1]。临床前数据表明，TCS7010 具有治疗 Aurora A 过表达实体瘤的潜力。在 HCT116 细胞系中，TCS7010 与标准化疗药物（例如 5-氟尿嘧啶、紫杉醇）无交叉耐药性，表明其可能对化疗难治性肿瘤患者有效 [1]。 |
| 分子式 |
C31H31CLFN7O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
588.07
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| 精确质量 |
587.221
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| CAS号 |
1158838-45-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
44139710
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.679
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| LogP |
4.39
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| tPSA |
102.49
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
862
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
AKSIZPIFQAYJGF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H31ClFN7O2/c1-2-39-15-17-40(18-16-39)28(41)19-21-7-11-24(12-8-21)36-31-34-20-26(33)29(38-31)35-23-13-9-22(10-14-23)30(42)37-27-6-4-3-5-25(27)32/h3-14,20H,2,15-19H2,1H3,(H,37,42)(H2,34,35,36,38)
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| 化学名 |
N-(2-Chlorophenyl)-4-[[2-[[4-[2-(4-ethyl-1-piperazinyl)-2-oxoethyl]phenyl]amino]-5-fluoro-4-pyrimidinyl]amino]-benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7005 mL | 8.5024 mL | 17.0048 mL | |
| 5 mM | 0.3401 mL | 1.7005 mL | 3.4010 mL | |
| 10 mM | 0.1700 mL | 0.8502 mL | 1.7005 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SNS-314 Mesylate
BI-847325
MK-8745
MLN8054
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463611831
