HIV-1(EC50=0.03-6.92 nM);HIV-2(EC50=0.018-0.02 nM)
HIV-1 and HIV-2 reverse transcriptase (RT); viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp).

阿兹夫定 (RO-0622) 对 HIV-1IIIB 和 HIV-1RF 野生型毒株表现出强效的抑制作用，其 EC50 值介于 30 至 110 pM 之间。阿兹夫定对 HIV-1KM018、HIV-1TC-1 和 HIV-1WAN T69N 的 EC50 值分别为 6.92 nM、0.34 nM 和 0.45 nM。蛋白酶抑制剂 (PI) 耐药毒株 HIV-1L10R/M46I/L63P/V82T/I84V 和 HIV-1RF V82F/184V、氟尿嘧啶 (FI) 耐药毒株 pNL4-3 gp41 (36G) V38A/N42T 以及核苷类逆转录酶抑制剂 (NRTI) 耐药毒株 HIV-174V 均对阿兹夫定敏感。阿兹夫定对这些耐药株的EC50值分别为0.11、0.14、0.37和0.36 nM[1]。

---

在细胞模型中，阿兹夫定（FNC）以剂量依赖的方式有效抑制了HBV抗原的分泌，在第9天，乙型肝炎表面抗原的50%有效浓度值为0.037 μM，乙型肝炎e抗原的50%有效浓度值为0.044 μM。与HBV抗原的减少一致，阿兹夫定（FNC）也分别使细胞内和细胞外的HBV DNA水平降低了92.31%和93.90%。 [2]

---

阿兹夫定 (FNC)以剂量依赖的方式抑制野生型和拉米夫定耐药的HBV临床分离株的复制，其平均±标准差EC₅₀值分别为0.12±0.01 μM和0.27±0.01 μM。结论：阿兹夫定 (FNC)是一种潜在的抗病毒药物，可对抗野生型和拉米夫定耐药的HBV临床分离株，因此值得进一步评估其在HBV感染治疗中的应用。[3]

---

阿兹夫定 (FNC)在多种侵袭性人类癌细胞系（包括B细胞非霍奇金淋巴瘤、肺腺癌和急性髓系白血病）中均能有效抑制细胞增殖，其IC₅₀值为0.95-4.55 μM。用 FNC 处理的细胞在高剂量和低剂量下分别表现出 G1 期和 S 期细胞周期阻滞，这证实了核苷类似物的作用机制。用 FNC 处理 B-NHL 细胞系可剂量和时间依赖性地诱导细胞凋亡。[4]

---

阿兹夫定是一种高效的核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）。体外实验表明，它对HIV-1和HIV-2均具有强效抑制作用。对HIV-1的EC50值范围为0.03至6.92 nM，对HIV-2的EC50值范围为0.018至0.025 nM。值得注意的是，它对HIV-1IIIB和HIV-1RF野生型毒株具有皮摩尔级的抑制活性（EC50值为30-110 pM）。阿兹夫定对多种耐药HIV毒株也有效，包括对蛋白酶抑制剂（PI）和NRTI耐药的毒株。例如，对多重耐药HIV-174V毒株的EC50值为0.36 nM。除HIV外，阿兹夫定还具有强效的抗HBV活性。在细胞模型中，该化合物抑制乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）的分泌，EC50值分别为0.037 uM和0.044 uM，并使细胞内和细胞外乙型肝炎病毒DNA水平降低90%以上。该化合物还能抑制野生型和拉米夫定耐药的乙型肝炎病毒临床分离株的复制。阿兹夫定的三磷酸盐形式作为链终止剂，掺入正在延伸的病毒DNA或RNA链中，阻止其进一步延伸。

体内抗病毒功效[2]
用阿兹夫定(FNC)治疗后，DHBV DNA水平显著降低，剂量分别为0.5、1.0和2.0 mg/kg•天。在第10天，剂量为2.0 mg/kg·天的阿兹夫定（FNC）在鸭血清和肝脏中的抑制率分别达到91.68%和81.96%。此外，组织病理学分析显示，FNC治疗后肝脏组织学显著恢复。[2]

---

体内抗肿瘤疗效[4]
最后，肝癌（H22）、肉瘤（S180）和胃癌（SGC7901）的小鼠异种移植模型表明，阿兹夫定（FNC）具有剂量依赖性的显著肿瘤生长抑制活性，且毒性较低[4]。

---

阿兹夫定在HIV和HBV动物模型中已证实具有体内疗效。在HIV-1感染小鼠模型（使用人源化小鼠）中，阿兹夫定治疗显著降低了病毒载量并保护CD4+ T细胞免于耗竭，其疗效优于标准治疗药物叠氮胸苷（AZT）。在鸭乙型肝炎病毒（DHBV）模型中，口服阿兹夫定显著降低了血清DHBV DNA水平。阿兹夫定的抗病毒疗效已在HIV、HBV和COVID-19的人体试验中得到证实。一项针对COVID-19的3期临床试验表明，口服阿兹夫定可降低病毒载量并改善轻度至中度COVID-19患者的临床结局。对于HIV，阿兹夫定已获批作为联合疗法的一部分。对于HBV，阿兹夫定在早期临床试验中显示出潜力。这些结果证实，阿兹夫定是一种口服有效的广谱抗病毒药物。

采用荧光定量PCR法定量HBV DNA[2]
为了进一步证实阿兹夫定（FNC）在HepG2.2.15细胞中的抗病毒活性，我们采用荧光定量PCR（FQ-PCR）法评估了细胞外和细胞内HBV DNA的水平。从培养上清液和细胞中提取病毒DNA，然后使用HBV荧光定量PCR检测试剂盒，按照制造商的说明书，在LightCycler 1.5上进行实时定量PCR。循环程序如下：初始变性（95℃，2分钟）后，样品进行40个循环的变性（94℃，5秒）和退火/延伸（56℃，45秒）。[2]

---

采用体外聚合酶活性测定法测定阿兹夫定三磷酸对HIV逆转录酶（RT）的抑制活性。将重组HIV-1 RT与异聚模板/引物（例如poly(rA) oligo(dT)或特定的RNA/DNA杂交体）在反应缓冲液（例如50 mM Tris-HCl，pH 8.0，5 mM MgCl2，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mg/mL BSA）中孵育。加入dNTP混合物（包括放射性标记的dTTP，例如[3H]-dTTP）和不同浓度的阿兹夫定三磷酸启动反应。在37℃孵育30-60分钟后，取少量反应混合物点样于DE81滤纸片上。用2×SSC缓冲液充分洗涤滤膜，以去除未结合的放射性标记dNTP。然后通过液体闪烁计数法测量结合的放射性。计算抑制RT活性的IC50值。使用合适的模板和引物，以类似的方式评估阿兹夫定对病毒RT相对于宿主DNA聚合酶（例如，DNA聚合酶α、β、γ）的选择性。对于SARS-CoV-2的RdRp抑制试验，采用类似的试验方法，使用重组SARS-CoV-2 nsp12-nsp7-nsp8复合物作为聚合酶，并使用特异性RNA模板-引物，阿兹夫定的活性形式为阿兹夫定三磷酸。

体外抗HIV活性[1]
将C8166细胞与不同HIV-1或HIV-2实验室毒株和耐药毒株以不同浓度的化合物进行感染，感染复数（MOI）为0.075～0.6。将PHA刺激的PBMC与不同的临床毒株在RPMI-1640培养基（含10% FBS、50 U/ml IL-2和2 µg/ml聚凝胺）中以0.1的MOI孵育。在37℃、5% CO2条件下感染2小时后，用RPMI-1640培养基（含10% FBS）洗涤C8166细胞三次以去除游离病毒，并重悬于RPMI-1640培养基中。将100 µl 4×10⁴个细胞（PBMC为5×10⁵个细胞）接种于96孔板的每个孔中，并加入不同浓度的FNC。将培养板置于37℃、5% CO2的加湿培养箱中。以3TC和AZT作为对照。培养3-7天后，对合胞体形成抑制率进行评分，或通过ELISA法[19]测定p24水平，并计算半数有效浓度（EC50）。

---

细胞毒性试验[1]
简而言之，将不同浓度的FNC加入96孔板中，随后加入100 µl 4×10⁴个C8166细胞（PBMC为5×10⁵个细胞）。在37℃、5% CO2条件下培养3天（PBMC为7天）后，每孔加入20 µl MTT。孵育4小时后，移除100 µl上清液，并加入100 µl 20%SDS-50%DMF。将培养板置于37℃孵育过夜。使用酶标仪在570 nm和630 nm波长处测定光吸收值，并计算50%细胞毒性浓度（CC50）。以3TC和AZT作为对照。

---

采用病毒复制试验评估阿兹夫定的细胞抗病毒活性。对于HIV，将人T细胞系（例如MT-4、C8166）或外周血单核细胞（PBMC）以0.01-0.1的感染复数（MOI）感染HIV-1（例如IIIB或RF毒株），并加入不同浓度的阿兹夫定（通常为0.001 nM至1 μM）。在37℃孵育4-7天后，通过检测培养上清液中的逆转录酶（RT）活性或通过ELISA定量HIV-1 p24抗原（一种核心蛋白）来评估病毒复制程度。EC50定义为使RT活性或p24产生量相对于未处理的感染对照组降低50%的浓度。使用细胞活力检测法（例如 MTT 或 CellTiter-Glo）平行评估未感染细胞的细胞毒性，并测定 CC50（50% 细胞毒性浓度）。然后计算选择性指数（SI = CC50/EC50）。对于 HBV，将 HepG2.2.15 细胞（可稳定复制 HBV）用不同浓度的阿兹夫定处理 9 天。提取细胞外和细胞内 HBV DNA，并通过实时 PCR 进行定量。使用 ELISA 检测培养基中 HBsAg 和 HBeAg 的水平。然后确定降低这些标志物的 EC50 值。

鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染及药物治疗实验[2]
每只1日龄的鸭子，在第3天经胫静脉注射0.2 ml来自DHBV血清学检测呈阳性鸭子的血清。在鸭子感染DHBV 7天后进行药物治疗实验。将DHBV阳性鸭子随机分为5组，每组16只。分别对DHBV感染的鸭子口服不同浓度的阿兹夫定（FNC）和3TC（作为对照）。观察5个组：FNC 0.5 mg/kg·d、阿兹夫定（FNC）1.0 mg/kg·d、阿兹夫定（FNC）2.0 mg/kg·d和3TC 20 mg/kg·d（作为阳性对照）。阴性对照组采用生理盐水作为模拟治疗。药物每日给药一次，连续给药10天。分别于治疗前、用药5天和10天后以及停药3天后，从所有鸭子的腿静脉抽取血液。分离血清和肝脏样本，并储存于-80℃。

---

采用FQ-PCR法检测DHBV DNA[2]
在治疗期间的第0天、第5天和第10天，以及停药后的第3天（即第13天），采用FQ-PCR法检测DHBV DNA。对于DHBV DNA，使用DNA提取试剂盒从血清中提取DNA，并在LightCycler 1.5上用SYBR Green I进行荧光定量PCR（FQ-PCR）。根据先前发表的文献报道的序列设计了一对引物，用于扩增DHBV基因组，并将扩增的PCR片段克隆到pMD-18T载体中。基于DHBV S基因的保守序列，设计了另一对用于实时荧光定量PCR的引物，用于扩增重组质粒以构建标准曲线。同时，测试了该检测方法的特异性、灵敏度和重复性。最终建立了一种快速、特异的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法，用于检测DHBV。本研究采用该检测方法在不同时间点检测了实验感染雏鸭血清和肝脏中的DHBV DNA。[2]

---

小鼠异种移植研究[4]
所有小鼠均在屏障条件下饲养，实验方案和条件均经机构动物护理部门批准。昆明小鼠（包括雄性和雌性，体重20±2 g，购自上海西克莱生物科技有限公司）右前腹皮下注射1×10⁷个肉瘤（S-180）和肝癌（H22）细胞，并随机分为若干不同的实验组，每组8-10只小鼠。肿瘤细胞植入后一天，小鼠每天通过静脉注射（IV）或关节内注射（IG）给予赋形剂（生理盐水）或5-氟尿嘧啶（5-FU，15 mg/kg/天）、顺铂（1.0 mg/kg/天）、卡培他滨（400或600 mg/kg/天）和阿兹夫定（FNC）（0.5、1.0、2.0 mg/kg/天），所有药物均溶于生理盐水或蒸馏水（卡培他滨），连续给药8天。治疗结束后24小时，处死小鼠，切除肿瘤并称重，以评估肿瘤生长抑制情况。BALB/c裸鼠（nu/nu）由上海西克莱生物科技有限公司提供，人胃癌细胞（SGC7901）以1 × 10⁷个细胞/ml的PBS悬液200 μl皮下注射于小鼠右后背部。当肿瘤平均直径达到 5–8 mm 时，对小鼠进行称重，并根据肿瘤大小随机分组，分配至不同的研究组，然后通过灌胃法（IG）每日给予赋形剂（生理盐水）、卡培他滨（600 mg/kg/天）或阿兹夫定（FNC）（0.5、1.0、2.0 mg/kg/天）治疗，持续 20 天。治疗结束后，处死小鼠，切除肿瘤并称重，以评估肿瘤生长抑制情况。所有结果均以 8 或 10 只动物的平均值 ± 标准误（SEM）表示。

---

本研究采用标准小鼠HIV-1模型评估阿兹夫定的体内疗效，该模型使用移植了人造血干细胞的NOD/SCID小鼠（人源化小鼠）。HIV-1感染模型中，人源化小鼠经腹腔注射感染HIV-1病毒（例如，2,000 TCID₅₀）。感染一周后，将小鼠随机分为治疗组（每组n=10）。阿兹夫定溶于无菌水或0.5%甲基纤维素等溶剂中，通过灌胃给药，剂量范围为0.5至10 mg/kg，每日一次或两次，持续4-6周。对照组包括一个溶剂处理的感染组和一个阳性对照药物（例如，100 mg/kg的AZT）处理组。在基线和之后每周通过眼眶后静脉丛取血。采用实时PCR定量血浆病毒载量。研究结束时，对小鼠实施安乐死，并采集脾脏和淋巴结。采用流式细胞术分析血液和组织中CD4+和CD8+ T细胞的百分比。同时定量分析组织中的HIV-1病毒载量。对于HBV，采用类似的HBV转基因小鼠模型。此外，还使用了鸭HBV（DHBV）模型。将一日龄雏鸭静脉注射DHBV。感染两周后，对鸭子进行为期10天的口服阿兹夫定治疗，剂量各不相同。采用PCR方法检测血清中DHBV DNA的含量。

阿兹夫定的药代动力学（PK）特性已在临床前动物模型和人体中得到充分表征。在大鼠和犬中，口服给药后，阿兹夫定吸收迅速，达峰时间（Tmax）为0.5-2小时。其绝对口服生物利用度为中等至高。血浆消除半衰期（t1/2）相对较短，啮齿动物通常为1-2小时，大型动物为2-4小时。在人体中，口服批准的HIV治疗剂量后，半衰期约为2-3小时。活性三磷酸代谢物在细胞内滞留，半衰期更长（在外周血单核细胞中超过100小时），这支持每日一次给药。阿兹夫定主要以原形经尿液排泄。其蛋白结合率低，分布容积适中，表明其具有良好的组织穿透性。

阿兹夫定已在临床前毒理学研究中进行了广泛的评估。该化合物在治疗剂量下具有可接受的安全性。动物研究中观察到的主要剂量限制性毒性是骨髓抑制（导致贫血和中性粒细胞减少症），这是核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs）由于线粒体毒性而产生的靶向效应。这种情况通常在高剂量暴露时出现。阿兹夫定对线粒体的毒性低于一些较老的NRTIs（如AZT）。在一项为期4周的大鼠口服毒性研究中，确定了未观察到不良反应剂量（NOAEL）。阿兹夫定在标准Ames试验中未显示遗传毒性，并且在长期研究中未显示致癌性。在HIV和COVID-19的临床试验中，阿兹夫定的耐受性总体良好。最常见的不良事件较轻微，包括胃肠道症状（恶心、腹泻）和肝酶短暂升高。

[1]. Azvudine, a novel nucleoside reverse transcriptase inhibitor showed good drug combination features and better inhibition on drug-resistant strains than lamivudine in vitro. PLoS One. 2014 Aug 21;9(8):e105617.

[2]. Novel nucleoside analogue FNC is effective against both wild-type and lamivudine-resistant HBV clinical isolates. Antivir Ther. 2012;17(8):1593-9.

[3]. Antiviral activity of FNC, 2'-deoxy-2'-β-fluoro-4'-azidocytidine, against human and duck HBV replication. Antivir Ther. 2012;17(4):679-87.

[4]. FNC, a novel nucleoside analogue inhibits cell proliferation and tumor growth in a variety of human cancer cells. J Biol Chem. 2008 Jan 25;283(4):2167-75.

阿兹夫定正在临床试验NCT04668235（阿兹夫定治疗COVID-19患者（SARS-CoV-2感染）的安全性和临床疗效研究）中进行研究。作用机制：阿兹夫定是一种核苷类逆转录酶抑制剂，对HIV、HBV和HCV有效。一些研究还表明，它可以调节P-糖蛋白（P-gp）、MRP2和BCRP等蛋白的表达；在一项研究中，它还增强了P-gp的活性。2020年，该化合物被用于多项临床试验，以治疗轻症和常见COVID-19。阿兹夫定是一种新型核苷类逆转录酶抑制剂，对人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒具有抗病毒活性。本文报告了阿兹夫定单独使用或与其他抗逆转录病毒药物联合使用时，其体外抗HIV-1和HIV-2的活性及其耐药性特征。阿兹夫定对HIV-1（EC50范围为0.03至6.92 nM）和HIV-2（EC50范围为0.018至0.025 nM）均表现出强效抑制活性。与六种已获批准的抗HIV药物联合使用时，阿兹夫定对C8166细胞和外周血单核细胞（PBMCs）显示出协同作用。在联合治疗研究中，阿兹夫定的使用浓度比其他药物低1000倍或500倍。阿兹夫定对核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）耐药毒株（L74V和T69N）也表现出强效抑制活性。尽管M184V突变导致敏感性降低250倍，但阿兹夫定在纳摩尔浓度下仍保持活性。在体外耐药性诱导试验中，M184I突变的频率随诱导时间的延长而增加，表明M184I是阿兹夫定治疗的关键突变。作为对照，拉米夫定治疗在相同诱导时间下导致更高的M184I/V突变频率和更高的M184V突变发生率。分子建模分析表明，由于阿兹夫定中叠氮基团的存在，突变体M184I的空间位阻比M184V更为显著。现有数据表明，阿兹夫定具有与现有抗HIV药物互补的潜力。M184I应为关键突变；然而，阿兹夫定在纳摩尔浓度下仍对HIV-1LAI-M184V有效。[2]新型核苷类似物FNC对HBV野生型和拉米夫定耐药的临床分离株均有效。HBV感染是全球主要的公共卫生问题。目前用于治疗乙型肝炎病毒（HBV）的抗病毒药物，例如拉米夫定，存在临床局限性，导致长期抗病毒治疗过程中耐药毒株的快速出现。因此，迫切需要新的抗病毒药物来预防或延缓耐药HBV突变株的选择。一种新型胞苷类似物FNC（2'-脱氧-2'-β-氟-4'-叠氮胞苷）最近被证实能够有效抑制人HBV和鸭HBV（DHBV）在体外和体内的复制。本研究旨在评估FNC在瞬时转染细胞中对临床野生型和拉米夫定耐药HBV分离株的体外抗病毒活性。方法：从拉米夫定治疗前和病毒突破时采集的血清样本中提取HBV DNA，并进行PCR扩增。将扩增子克隆到新型表达载体pHY106中，该载体在细胞转染后可启动细胞内HBV复制周期。将克隆的扩增子转染至HepG2细胞后进行药物敏感性试验。采用定量实时PCR测定细胞内HBV DNA水平，并计算抑制HBV复制50%所需的有效浓度（EC50）。结果：FNC以剂量依赖的方式抑制野生型和拉米夫定耐药HBV临床分离株的复制，其平均±标准差EC50值分别为0.12±0.01 μM和0.27±0.01 μM。结论：FNC是一种潜在的抗病毒药物，能够有效对抗野生型和拉米夫定耐药HBV临床分离株，因此值得在HBV感染的治疗中进行进一步评估。 [3]

---

阿兹夫定/FNC 是一种新型核苷类似物，能够抑制多种人类癌细胞的增殖和肿瘤生长。抑制细胞 DNA 合成是阻断癌细胞分裂的一种策略。核苷类似物可以掺入 DNA 中，终止 DNA 链的延伸。目前，许多核苷类似物已被成功用作抗癌药物。FNC，即 2'-脱氧-2'-β-氟-4'-叠氮胞苷，是一种新型胞苷类似物，对丙型肝炎病毒 (HCV) 具有强效活性。为了研究 FNC 在人类癌症治疗中的潜力，我们研究了其在体外和体内对多种癌细胞的活性。[4]

---

盐酸阿兹夫定在中国获批用于治疗HIV-1感染（商品名：FNC），并已获得有条件批准用于治疗成人新型冠状病毒肺炎（COVID-19）。它是一种首创的核苷酸类似物，其核糖环4'位连接叠氮基团，2'位连接氟原子，这种独特的结构赋予了它高效力和良好的耐药性。其活性三磷酸形式在RNA或DNA合成过程中作为链终止剂发挥作用，同时也是病毒RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp）的弱抑制剂，这是其抗SARS-CoV-2活性的主要机制。阿兹夫定为口服制剂，方便门诊患者使用。目前，它尚未在其他国家（美国、欧洲、日本）获批。目前正在进行的临床试验正在评估其对其他病毒感染（例如乙型肝炎）的潜在疗效。该药物获批用于治疗新冠肺炎是基于一项小型开放标签试验，还需要开展更大规模、控制更严格的试验来充分证实其疗效。与所有核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）一样，长期使用该药物存在产生耐药性的风险，并且由于动物研究表明其可能具有胚胎毒性，因此孕妇禁用。

C9H12CLFN6O4

322.68078327179

322.059

1333126-31-0

Azvudine;1011529-10-4

54579399

Light yellow to khaki solid powder

123Ų

4

7

3

21

533

4

Cl.F[C@@H]1[C@H](N2C(N=C(C=C2)N)=O)O[C@](CO)([C@H]1O)N=[N+]=[N-]

MKMLHJHSIBILJH-DBSFTZRASA-N

InChI=1S/C9H11FN6O4.ClH/c10-5-6(18)9(3-17,14-15-12)20-7(5)16-2-1-4(11)13-8(16)19;/h1-2,5-7,17-18H,3H2,(H2,11,13,19);1H/t5-,6-,7+,9+;/m0./s1

4-amino-1-[(2R,3S,4R,5R)-5-azido-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one;hydrochloride

Azvudine HCl; RO-0622; FNC; RO0622; Azvudine (hydrochloride); Azvudine hydrochloride; 1333126-31-0; 4-amino-1-[(2R,3S,4R,5R)-5-azido-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one;hydrochloride; CHEMBL1822611;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~125 mg/mL (~387.38 mM)

配方 1 中的溶解度: 14.29 mg/mL (44.29 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。