| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
RSK4 (IC50 = 15 nM); RSK3 (IC50 = 18 nM); RSK2 (IC50 = 24 nM); RSK4 (IC50 = 15 nM); RSK1 (IC50 = 31 nM)
The target of BI-D1870 is the p90 ribosomal S6 kinase (p90RSK) family, including RSK1, RSK2, and RSK3. The IC50 values are as follows: IC50 for RSK1 is approximately 30 nM, IC50 for RSK2 is approximately 100 nM, and IC50 for RSK3 is approximately 60 nM. BI-D1870 shows very low inhibitory activity against other kinases such as ERK1/2 and Akt (IC50 > 10 μM) [1]/[2] ; The main target of BI-D1870 is still p90RSK, and it exerts its effect by inhibiting the activity of p90RSK in T cells [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
BI-D1870 抑制 RSK1、RSK2、RSK3 和 RSK4，IC50 为 10-30 nM，但在 100 倍高浓度下测试时不会显着抑制其他 10 种 AGC 激酶成员和 40 多种其他蛋白激酶。在人胚肾 293 细胞和 Rat-2 细胞中，BI-D1870 具有细胞渗透性，并抑制 RSK 介导的佛波酯和 EGF 诱导的糖原合酶激酶激酶 3β 和 LKB1 的磷酸化。其他六种 AGC 激酶的激动剂触发的底物磷酸化不受 BI-D1870 的影响。此外，BI-D1870 不会阻断佛波酯或 EGF 引起的 CREB 磷酸化。[1]
1. 酶活性抑制实验：体外实验中，BI-D1870可特异性抑制重组p90RSK家族成员（RSK1、RSK2、RSK3）的激酶活性，IC50值与靶点抑制数据一致；对其他检测激酶（如ERK1/2、Akt）的活性无显著抑制作用，表现出良好的激酶选择性[1]/[2] 2. HeLa细胞实验：用不同浓度（0.1 μM、1 μM、10 μM）的BI-D1870处理HeLa细胞24小时（以DMSO为溶剂对照），Western blot分析显示，RSK的特异性底物S6的磷酸化水平（p-S6）呈浓度依赖性显著降低。具体而言，当BI-D1870浓度达到1 μM时，p-S6水平明显下降，而总S6蛋白水平无变化，表明BI-D1870可在HeLa细胞中抑制RSK活性[1]/[2] 3. COS-7细胞转染实验：将表达RSK1的质粒转染至COS-7细胞（转染后24小时），用0.03 μM、0.1 μM、0.3 μM、1 μM浓度的BI-D1870处理细胞，Western blot结果显示，过表达的RSK1的磷酸化水平（p-RSK1）呈浓度依赖性被抑制，且IC50值与体外酶活性实验一致，证实BI-D1870可在细胞内特异性抑制RSK1的活性[1]/[2] 4. 人外周血T细胞实验：将纯化的人外周血T细胞在含IL-2的培养基中激活培养，随后用1 μM、5 μM、10 μM浓度的BI-D1870（以0 μM为对照）处理48小时。ELISA检测显示，细胞培养上清中T细胞活化相关细胞因子（IL-2、IFN-γ）的水平呈浓度依赖性显著降低；Western blot分析表明，T细胞中RSK的磷酸化水平（p-RSK）明显受抑，而总RSK水平无影响；流式细胞术检测显示，T细胞活化标志物（CD25、CD69）的表达下调，提示BI-D1870可通过抑制RSK活性来抑制T细胞活化及细胞因子产生[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
注射 BI-D1870 (0.5 mg/kg) 的实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 小鼠表现出迟发性神经缺陷，但没有明显的体重减轻。组织病理学分析显示对照小鼠的脊髓中有炎症细胞浸润和脱髓鞘，但 BI-D1870 治疗的小鼠则没有。 BI-D1870 可防止 TH1 或 TH17 细胞浸润至中枢神经系统。
多发性硬化症（MS）是一种中枢神经系统（CNS）自身免疫性脱髓鞘疾病，由TH1和TH17细胞浸润中枢神经系统引起。核糖体S6激酶2（RSK2；RPS6KA3）通过减弱RORγt转录活性和IL-17A的产生来调节TH17分化。泛RSK抑制剂BI-D1870也抑制TH17分化，但BI-D1870在体内的作用尚不清楚。在这里，我们制备了患有实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的小鼠，并用BI-D1870对其进行治疗。BI-D1870给药通过减少TH1和TH17细胞向中枢神经系统的浸润以及降低TH17细胞中Ccr6的mRNA水平来保护小鼠免受EAE的侵害。这些结果表明，抑制RSK是治疗MS的一种有前景的策略[3]。 |
| 酶活实验 |
将纯化的 His6–RSK1、His6–RSK2 或 GST–RSK2 1–389:S381E (1–2 单位/mL) 在含有 30 μM 底物肽 (KEAKEKRQEQIAKRRRLSSLRASTSKSGGSQK) 的缓冲液 A 中的 50 μL 测定混合物中于 30 °C 测定 10 分钟)、10 mM 醋酸镁和 100 μM [γ-32P]ATP。如前所述，停止并检查反应。 1个酶单位是1分钟内催化1nmol底物肽磷酸化所需的量。为了测定 HEK-293 或 Rat-2 细胞裂解物中的 RSK 和 MSK1，从细胞裂解物中对这些激酶进行免疫沉淀（RSK 为 0.1 mg 裂解物蛋白，MSK1 为 0.3 mg），并且对于 RSK 测定，免疫沉淀物用缓冲液 A 含有 1 mM ATP，并在测定前使用缓冲液 A 两次，作为预防措施，确保 BI-D1870 从 RSK 同工型解离。
1. 材料制备：首先制备p90RSK家族成员的重组激酶结构域（如RSK1催化结构域）；制备反应体系所需的RSK特异性底物肽（终浓度200 μM）、ATP（终浓度10 μM）及缓冲液（含Tris-HCl、MgCl2、DTT）[1]/[2] 2. 反应体系设置：向反应体系中加入不同浓度梯度的BI-D1870（范围为0.1 nM~10 μM），同时设置空白对照（不含BI-D1870）和阳性对照（已知RSK抑制剂），每个浓度重复3次。随后加入重组RSK激酶启动反应，体系在30℃下孵育30分钟[1]/[2] 3. 检测与分析：孵育结束后，加入终止试剂终止反应，采用基于放射性的方法（使用放射性标记ATP及闪烁计数法）检测磷酸化底物肽的量，进而计算激酶活性。根据不同药物浓度下激酶活性的变化，计算BI-D1870对RSK的IC50值[1]/[2] |
| 细胞实验 |
使用 MTT [3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物]测定法评估细胞生长，重复六次。在 96 孔平底板中，将细胞 (5 103/200 L) 接种 24 小时，然后在指定的时间内暴露于不同浓度的测试剂中。除去培养基后，加入200μL含有0.5mg/mL浓度的MTT的培养基，并将细胞在37℃下孵育2小时。除去培养基后，将每孔的还原 MTT 染料溶解在 200 L DMSO 中。 Synergy HT 多模式酶标仪在 570 nm 处用于测量吸光度。
1. HeLa细胞培养与处理实验： - 细胞接种：将HeLa细胞接种于6孔培养板，在含10% FBS的DMEM培养基中，37℃、5% CO2条件下培养至汇合度达70%~80%[1]/[2] - 药物处理：将BI-D1870用培养基稀释至0.1 μM、1 μM、10 μM浓度，对细胞进行处理；以BI-D1870的溶剂DMSO作为阴性对照，处理时长为24小时[1]/[2] - 蛋白提取与检测：处理结束后收集细胞，提取细胞总蛋白，采用针对磷酸化S6（p-S6）和总S6的特异性一抗进行Western blot实验，随后加入荧光二抗孵育。通过成像系统对条带强度进行定量，计算p-S6与总S6的比值，以此评估BI-D1870对RSK活性的抑制作用[1]/[2] 2. COS-7细胞转染与处理实验： - 细胞转染：将编码RSK1的质粒通过转染试剂转染至COS-7细胞，转染后培养24小时，使RSK1得以表达[1]/[2] - 药物处理：向转染后的COS-7细胞中加入浓度为0.03 μM、0.1 μM、0.3 μM、1 μM的BI-D1870，培养特定时长[1]/[2] - 蛋白检测：提取细胞总蛋白，通过Western blot检测RSK1的磷酸化水平（p-RSK1）及总RSK1水平，根据p-RSK1水平的变化分析BI-D1870对过表达RSK1活性的抑制作用[1]/[2] 3. 人外周血T细胞实验： - T细胞分离与激活：从健康捐赠者外周血中分离外周血单个核细胞（PBMC），通过磁珠分选获得纯化的T细胞，将T细胞置于含IL-2的培养基中培养以实现活化[3] - 药物处理：用1 μM、5 μM、10 μM浓度的BI-D1870（0 μM为对照）处理活化后的T细胞，处理时长为48小时[3] - 检测：采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2和IFN-γ的浓度；通过Western blot检测T细胞中p-RSK和总RSK的水平；利用流式细胞术分析T细胞活化标志物（CD25、CD69）的表达[3] |
| 动物实验 |
Myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG) peptide 35-55 MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK) (BEX) is used to induce EAE in C57/BL6J mice. Mice are given s.c. injections of 200 g of MOG peptide emulsified in 100 μL of PBS, 100 l of complete Freund's adjuvant (CFA), and five mg/mL of Mycobacterium tuberculosis. Additionally, on days 0 and 2, 500 ng of pertussis toxin is intravenously injected. Two days after receiving the MOG peptide vaccination, mice are given an intraperitoneal injection of the RSK inhibitor (BI-D1870; 0.5 mg/kg), which is repeated every other day for 11 days. As controls, mice are given only dimethyl sulfoxide (DMSO) solution. On a scale from zero (no disease) to six (death), paralysis is rated as follows: one (tail limpness), two (hind limb weakness), three (hind limb paralysis), four (fore limb weakness), five (quadriplegia), and six (no disease). Hematoxylin and eosin (H & E) staining is carried out on CNS samples after they have been cut at a thickness of 4 m and fixed with 4% paraformaldehyde for histological analysis.
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
激素和生长因子可诱导多种属于AGC亚家族的蛋白激酶的激活，包括PKA同工酶、蛋白激酶B（又称Akt）、PKC、S6K p70（核糖体S6激酶）、RSK（p90核糖体S6激酶）和MSK（丝裂原和应激激活蛋白激酶）等，这些激酶进而介导许多受这些细胞外激动剂调控的生理过程。由于AGC激酶的底物特异性相似，因此评估每种激酶的具体功能可能较为困难。本文描述了小分子BI-D1870，该化合物在体外可抑制RSK1、RSK2、RSK3和RSK4，IC50值为10-30 nM，但对其他十种AGC激酶成员以及在浓度高100倍的情况下测试的40多种其他蛋白激酶均无显著抑制作用。 BI-D1870 可透过细胞膜，并能抑制人胚肾293细胞和Rat-2细胞中由RSK介导的佛波醇酯和EGF（表皮生长因子）诱导的糖原合成酶激酶-3β和LKB1的磷酸化。相反，BI-D1870 不影响其他六种AGC激酶底物的激动剂触发磷酸化。此外，BI-D1870 不抑制佛波酯或 EGF 诱导的 CREB（cAMP 反应元件结合蛋白）磷酸化，这与遗传学证据一致，该证据表明 MSK 而非 RSK 亚型介导了有丝分裂原诱导的该转录因子磷酸化。[1] 激素和生长因子可诱导多种属于 AGC 亚家族的蛋白激酶的激活，包括 PKA、蛋白激酶 B（也称为 Akt）、PKC、S6K p70（核糖体 S6 激酶）、RSK（p90 核糖体 S6 激酶）和 MSK（有丝分裂原和应激激活蛋白激酶）的亚型，这些激酶随后介导许多受这些细胞外激动剂调控的生理过程。由于它们的底物特异性相似，因此很难评估每种 AGC 激酶的具体功能。本文描述了小分子化合物BI-D1870，它在体外能以10-30 nM的IC50值抑制RSK1、RSK2、RSK3和RSK4，但对其他十种AGC激酶成员以及在100倍浓度下测试的40多种其他蛋白激酶均无显著抑制作用。BI-D1870具有细胞渗透性，并能阻止RSK介导的佛波醇酯和EGF（表皮生长因子）诱导的人胚肾293细胞和Rat-2细胞中糖原合成酶激酶-3β和LKB1的磷酸化。相反，BI-D1870不影响其他六种AGC激酶底物的激动剂触发磷酸化。此外，BI-D1870 不抑制佛波酯或 EGF 诱导的 CREB（cAMP 反应元件结合蛋白）磷酸化，这与遗传证据一致，表明 MSK 而不是 RSK 亚型介导了有丝分裂原诱导的该转录因子的磷酸化。[2]
1. BI-D1870 是一种选择性 p90RSK 抑制剂，其设计基于 RSK 激酶结构域的 ATP 结合位点。它通过与ATP竞争结合RSK的ATP结合位点发挥抑制作用，从而阻断RSK的激酶活性[1]/[2] 2. BI-D1870广泛用作基础研究的工具化合物，用于探索RSK在细胞增殖、存活和分化等细胞过程中的作用，并阐明RSK介导的信号通路[1]/[2] 3. 在T细胞中，BI-D1870通过抑制p90RSK活性来抑制T细胞活化和细胞因子产生，这表明BI-D1870可能在自身免疫性疾病或炎症性疾病中具有潜在的治疗应用价值。然而，它尚未进入临床研究阶段，仍处于基础研究阶段[3] |
| 分子式 |
C19H23F2N5O2
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|---|---|
| 分子量 |
391.4150
|
| 精确质量 |
391.181
|
| 元素分析 |
C, 58.30; H, 5.92; F, 9.71; N, 17.89; O, 8.18
|
| CAS号 |
501437-28-1
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| 相关CAS号 |
501437-28-1
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| PubChem CID |
25023738
|
| 外观&性状 |
Pale orange to brown solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
579.3±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
304.2±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.585
|
| LogP |
3.53
|
| tPSA |
81.59
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
28
|
| 分子复杂度/Complexity |
542
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
FC1C(=C(C([H])=C(C=1[H])N([H])C1=NC([H])=C2C(=N1)N(C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C([H])(C([H])([H])[H])C(N2C([H])([H])[H])=O)F)O[H]
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| InChi Key |
DTEKTGDVSARYDS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H23F2N5O2/c1-10(2)5-6-26-11(3)18(28)25(4)15-9-22-19(24-17(15)26)23-12-7-13(20)16(27)14(21)8-12/h7-11,27H,5-6H2,1-4H3,(H,22,23,24)
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| 化学名 |
2-((3,5-difluoro-4-hydroxyphenyl)amino)-8-isopentyl-5,7-dimethyl-7,8-dihydropteridin-6(5H)-one
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| 别名 |
BI D1870; BID1870; 501437-28-1; 2-((3,5-difluoro-4-hydroxyphenyl)amino)-8-isopentyl-5,7-dimethyl-7,8-dihydropteridin-6(5H)-one; 2-(3,5-difluoro-4-hydroxyanilino)-5,7-dimethyl-8-(3-methylbutyl)-7H-pteridin-6-one; BI-D 1870; 2-[(3,5-DIFLUORO-4-HYDROXYPHENYL)AMINO]-7,8-DIHYDRO-5,7-DIMETHYL-8-(3-METHYLBUTYL)-6(5H)-PTERIDINONE; 2-((3,5-difluoro-4-hydroxyphenyl)amino)-8-isopentyl-5,7-dimethyl-7,8-dihydropteridin-6(5H)-one.; MFCD11223662; BI-D1870
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~78 mg/mL (~199.3 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol: 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5548 mL | 12.7740 mL | 25.5480 mL | |
| 5 mM | 0.5110 mL | 2.5548 mL | 5.1096 mL | |
| 10 mM | 0.2555 mL | 1.2774 mL | 2.5548 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Structure-activity relationships for dihydropteridinone interactions with kinases and bromodomains and structural comparison of inhibitor binding modes.Nat Chem Biol.2014 Apr;10(4):305-12. |
Responses of FLT3 inhibitor-sensitive and -resistant AML cell lines to TG-101348 and BET inhibitors.Nat Chem Biol.2014 Apr;10(4):305-12. |
Functional activities of dual kinase/bromodomain inhibitors in primary human cell disease models. a, Test agents and kinase or BET benchmark inhibitors were tested for effects on protein biomarkers (x-axis) in 12 primary human cell-based BioMAP systems () at 7 doses. b, BI-2536 (BI) and TG-101348 (TG) and inhibitors targeting either kinases, including JAK (tofacitinib (Tofa) and ruxolitinib (Ruxo)) or PLK (GSK-461364A (GSK)), or BET bromodomains (JQ1, I-BET, PFI-1, and I-BET 151) were profiled in the BioMAP Diversity PLUS panel at 6 doses to generate dose-specific compound signature activity profiles. |
LJI308
LY2584702
PF-4708671
H-89二盐酸盐
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