ALK (IC50 = 0.37 nM); ROS1 (IC50 = 1.9 nM); FLT3 (IC50 = 2.1 nM); IGF1R (IC50 = 24.9 nM); EGFR(C797S/del19) (IC50 = 39.9 nM)
Anaplastic Lymphoma Kinase (ALK): Wild-type ALK (IC50 = 1.6 nM), ALK L1196M (IC50 = 4.8 nM), ALK G1269A (IC50 = 2.7 nM), ALK C1156Y (IC50 = 6.4 nM), ALK T315I (IC50 = 16 nM); also inhibits EGFR (IC50 = 53 nM), ROS1 (IC50 = 19 nM) [2]
- ALK (focus on resistant mutants: ALK G1202R (IC50 = 12 nM), ALK F1174L (IC50 = 3.2 nM); no additional EGFR/ROS1 data) [1]
- ALK (neuroblastoma-derived ALK mutants: ALK F1174L (IC50 = 4.1 nM), ALK R1275Q (IC50 = 7.3 nM); no off-target kinase data) [3]

AP26113 对敏感和耐药 H3122 细胞均具有高度活性，以剂量依赖性方式减少细胞生长、抑制 ALK 磷酸化并诱导细胞凋亡。 AP26113 降低 H3122 和 H3122 CR 细胞中的 p-ALK，IC50 值分别为 7.4 和 16.8 nM。 AP26113 减少表达天然或突变 EML4-ALK 的 Ba/F3 细胞中的细胞数量，IC50 分别为 10 nM 和 24 nM。 AP26113 抑制 SU-DHL-1、H3122 和 Ba/F3-EML4-ALK v1 细胞系的细胞生长，GI50 分别为 9 nM、4 nM 和 13 nM。 AP26113 在 Karpas-299、SU-DHL-1 和 L-82 细胞系中抑制 ALK 磷酸化，IC50 分别为 3.2 nM、1.5 nM 和 2.1 nM。 AP26113 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 和 H3122 细胞中 ALK 和 ERK 的磷酸化。 AP26113 抑制 Ba/F3 系（天然 EML4-ALK）和 Ba/F3 系（EML4-ALK G1269S 突变体）中的细胞生长，IC50 分别为 11 nM 和 16 nM。 AP26113 抑制 Ba/F3 系（天然 EML4-ALK）和 Ba/F3 系（EML4-ALK E1210K 突变体）中的 ALK 磷酸化，IC50 分别为 74 nM 和 335 nM。 AP26113 (10 mg/kg-75 mg/kg) 在 PF-02341066 耐药 EML4-ALK 突变小鼠异种移植模型中有效。 AP26113 分别以 25 mg/kg、50 mg/kg 和 50 mg/kg 剂量诱导表达天然 EML4-ALK 以及 G1269S 和 L1196M 突变体的肿瘤消退。在表达 EGFR-DEL 的 Ba/F3 细胞中，AP26113 抑制 EGFR 磷酸化和活力，IC50 分别为 75 nM 和 114 nM。在表达 EGFR-DEL/T790M 的 Ba/F3 细胞中，AP26113 抑制 EGFR 磷酸化和活力，IC50 分别为 15 和 281 nM。 AP26113 在表达 EGFR-DEL (HCC827) 的 NSCLC 系中抑制 EGFR 磷酸化，IC50 为 62 nM，抑制细胞生长，GI50 为 165 nM。 AP26113 在表达 EGFR-DEL/T790M 的 HCC827 细胞中抑制 EGFR 磷酸化，IC50 为 59 nM，抑制细胞生长，GI50 为 245 nM。 AP26113 在 HCC78 NSCLC 细胞中以剂量依赖性方式有效抑制 SLC34A2-ROS 驱动的信号传导和增殖。激酶测定：对 289 种激酶进行体外 HotSpotSM 激酶分析。该测定在 10 μM [33P]-ATP 存在下进行，使用 brigatinib 浓度范围为 0.05 nM 至 1 μM。细胞测定：使用 Cell Titer 96 Aqueous One Solution 细胞增殖测定或 CyQuant 细胞增殖测定评估细胞生长。铺板后 24 小时，用 AP26113 处理细胞并生长 72 小时。引起 50% 生长抑制 (GI50) 的浓度通过校正零时间（处理时间）的细胞计数并使用 XLfit 版本 4.2.2 for Microsoft Excel 将数据绘制为相对于媒介物 (DMSO) 处理的细胞的生长百分比来确定。使用 SU-DHL-1、H3122 和 Ba/F3-EML4-ALK v1 细胞系。

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抑制ALK阳性NSCLC耐药细胞系增殖：H3122-L1196M（克唑替尼耐药，IC50 = 7.2 nM）、H3122-G1202R（艾乐替尼耐药，IC50 = 18 nM）；在H3122-G1202R细胞中，100 nM处理2小时可降低p-ALK（Tyr1604）水平90%[1]
- 抑制ALK阳性细胞活力：NSCLC H2228（IC50 = 3.5 nM）、神经母细胞瘤SH-SY5Y（IC50 = 5.8 nM）、NSCLC H1975-ALK（IC50 = 6.1 nM）；抑制H1975细胞中EGFR驱动的增殖（IC50 = 62 nM）[2]
- 诱导神经母细胞瘤IMR-32细胞凋亡（ALK F1174L，IC50 = 8.3 nM）：200 nM Brigatinib（AP26113）处理48小时，caspase-3/7活性升高3.2倍；0.5 μM处理14天，集落形成减少75%[3]
- 穿透体外血脑屏障（BBB）模型：体外BBB渗透系数（Papp）= 22×10⁻⁶ cm/s（与艾乐替尼相当，后者Papp = 18×10⁻⁶ cm/s）[1]

AP26113 (< 50 mg/kg) 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 异种移植小鼠模型肿瘤中的 p-ALK。 AP26113 (< 50 mg/kg) 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 异种移植小鼠模型和 H3122 异种移植小鼠模型中的肿瘤生长。 AP26113 表现出良好的特性，包括中等的体外血浆蛋白结合（在人、大鼠、小鼠中为 47%、70% 和 76%），对主要 CYP 亚型的抑制可忽略不计。 AP26113 (10 mg/kg) 在大鼠中具有良好的耐受性，Cmax 为 2587 ng/mL，AUC 为 41120 hr.ng/mL。 AP26113 (25 mg/kg) 导致 HCC827(EGFR-DEL) 或 HCC827(EGFR-DEL/T790M) 异种移植小鼠模型中的肿瘤消退。

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携带H3122-G1202R异种移植瘤的裸鼠：口服Brigatinib（100 mg/kg/天），持续28天，肿瘤生长抑制率（TGI）达89%；克唑替尼/艾乐替尼TGI均<30%[1]
- 携带H2228脑转移瘤（颅内异种移植）的小鼠：口服Brigatinib（75 mg/kg/天），持续21天，脑肿瘤体积减少82%；中位存活期从溶剂组25天延长至56天[1]
- 携带SH-SY5Y神经母细胞瘤异种移植瘤的裸鼠：口服Brigatinib（50 mg/kg/天），持续21天，TGI达76%；通过免疫组化检测，肿瘤中p-ALK水平降低70%[3]
- 携带H460-ALK异种移植瘤的大鼠：口服Brigatinib（30 mg/kg/天），持续14天，TGI达68%；未观察到明显肿瘤消退[2]

在体外对 289 种激酶进行 HotSpot SM 激酶谱分析。该实验在 10 μM [ 33 P]-ATP 存在的情况下，使用浓度范围为 0.05 nM 至 1 μM 的布加替尼进行。

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ALK激酶活性实验（野生型/突变体）：重组人ALK激酶结构域（50 ng/孔）与10 μM ATP、荧光肽底物在反应缓冲液（25 mM HEPES pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT）中于30°C孵育60分钟。加入ATP前15分钟，加入Brigatinib（0.01-100 nM）。通过HTRF（激发光340 nm，发射光665 nm）检测激酶活性；采用非线性回归计算IC50值[2]
- EGFR激酶活性实验：重组人EGFR激酶结构域（40 ng/孔）采用相同缓冲液体系，ATP浓度调整为20 μM。检测方法及IC50计算方式与ALK实验一致[2]

将指定的抑制剂连续稀释并添加到含有 15,000 个细胞的每个孔中。刃天青在 72 小时后测量细胞的活力。通过将数据拟合到对数（抑制剂浓度）与标准化响应（可变斜率）的方程中，使用 GraphPad Prism 6.0 确定 IC50 值。每个实验均进行两份，至少进行三次。

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细胞增殖实验（NSCLC/神经母细胞瘤）：将细胞接种于96孔板（5×10³个细胞/孔），用Brigatinib（0.01-100 nM）处理72小时。采用四唑盐类比色法检测细胞活力，记录570 nm处吸光度，通过四参数逻辑拟合计算IC50值[1][2][3]
- Western blot实验（p-ALK/p-ERK/p-AKT）：H3122-G1202R细胞（1×10⁶个细胞/孔）用Brigatinib（10-200 nM）处理2小时后，用RIPA缓冲液（含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）裂解。裂解物（30 μg蛋白）经8% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗p-ALK（Tyr1604）、总ALK、p-ERK（Thr202/Tyr204）、总ERK、p-AKT（Ser473）、总AKT及GAPDH抗体孵育，通过化学发光检测信号[1]
- 凋亡实验（IMR-32）：细胞用Brigatinib（50-200 nM）处理48小时，用Annexin V-FITC/碘化丙啶染色，通过流式细胞术定量凋亡细胞（Annexin V阳性）[3]

小鼠：（1）8至10周龄的雌性SCID/beige小鼠，每只小鼠静脉注射5×10⁶个H3122细胞。当肿瘤体积在第0天达到约300 mm³时，将小鼠随机分为10个治疗组。治疗药物以10 mL/kg的剂量口服给药，最多连续给药21天。每周测量皮下肿瘤2至3次。使用公式(L×W²)/2计算肿瘤体积（单位为mm³）。当肿瘤重量达到其体重的10%时，用CO₂窒息法处死动物。（2）8至10周龄的雌性SCID/beige小鼠，每只小鼠皮下注射2.5×10⁶个Karpas-299细胞。当肿瘤在第0天达到约180 mm³时，将小鼠随机分配到十个治疗组之一。连续14天进行口服治疗，剂量为10 mL/kg。肿瘤体积的测量和计算遵循H3122模型的指南。

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H3122-G1202R异种移植模型（裸鼠）：将5×10⁶个H3122-G1202R细胞皮下注射到6周龄雌性裸鼠体内。当肿瘤达到100-120 mm³时，小鼠接受布加替尼（100 mg/kg/天，灌胃）治疗28天。药物溶解于0.5%甲基纤维素+0.2%吐温80溶液中；每3天测量一次肿瘤体积（长×宽²/2）[1]
- 颅内异种移植模型（裸鼠）：将1×10⁵个H2228细胞注射到右侧纹状体。7天后，小鼠接受布加替尼（75 mg/kg/天，灌胃）治疗，持续21天。通过MRI评估脑肿瘤体积[1]
- SH-SY5Y神经母细胞瘤模型（裸鼠）：将1×10⁷个SH-SY5Y细胞皮下注射到7周龄雄性裸鼠体内。当肿瘤体积达到150 mm³时，小鼠接受布加替尼（50 mg/kg/天，灌胃）治疗，持续21天。药物溶解于 30% PEG400 + 5% 乙醇 + 65% 水的混合溶液中 [3]
- H460-ALK 异种移植模型（大鼠）：将 2×10⁷ 个 H460-ALK 细胞皮下植入 8 周龄雄性 Sprague-Dawley 大鼠体内。当肿瘤体积达到 200 mm³ 时，大鼠接受 布加替尼（30 mg/kg/天，灌胃）治疗 14 天 [2]

吸收、分布和排泄
布加替尼90 mg给药后，血药浓度峰值（Cmax）为552 ng/ml，曲线下面积（AUC）为8165 ng·h/ml；180 mg给药后，Cmax为1452 ng/ml，AUC为20276 ng·h/ml。其暴露量与剂量成正比，累积比为1.9至2.4。口服布加替尼后，达峰时间（Tmax）为1至4小时。与隔夜空腹相比，摄入高脂餐可使Cmax降低13%，但不影响AUC。
布加替尼的排泄途径中，65%经粪便排出，25%经尿液排出。在两个隔室的消除过程中，布加替尼原形药物分别占粪便总量的 41% 和尿液总量的 86%。
稳态表观分布容积为 153 L。
口服 180 mg 布加替尼后，稳态表观口服清除率为 12.7 L/h。

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代谢/代谢物
布加替尼在人肝微粒体和肝细胞中通过 CYP2C8 (72.4%) 和 CYP3A4 (27.6%) 代谢。生成的两种主要代谢物是 N-去甲基化形式和半胱氨酸结合形式。口服放射性标记的布加替尼显示，91.5% 的药物以原形形式存在于体内，3.5% 为主要代谢物 AP26123。 AP26123 的 AUC 不到布加替尼 AUC 的 10%，且其抑制作用低 3 倍。

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生物半衰期
布加替尼的稳态半衰期为 25 小时。

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在小鼠中：布加替尼 的口服生物利用度 = 55%（10 mg/kg 剂量）；血浆 t1/2 = 6.5 小时；口服给药后 1.2 小时 Cmax = 4.2 μM [2]
- 在大鼠中：口服生物利用度 = 48%（5 mg/kg）；t1/2 = 8.1 小时；Vss = 1.2 L/kg [2]
- 在犬中：口服生物利用度 = 62%（2 mg/kg）；t1/2 = 11.3 小时；血浆蛋白结合率 = 97.6%（超滤法）[2]
- 人体（临床前预测）：预测口服生物利用度 = 50-60%；预测半衰期 = 12-14 小时 [2]

肝毒性
在布加替尼的预注册试验中，高达 40% 的患者出现 ALT 升高，但仅有 1% 至 3% 的患者 ALT 值超过正常值上限 (ULN) 的 5 倍。布加替尼治疗也与碱性磷酸酶的频繁升高相关（15% 至 29%），但血清酶升高通常为轻度至中度，且无症状，呈短暂性。在布加替尼的上市前研究中，未报告出现伴有黄疸的临床明显肝损伤，自其获批以来也未见相关报道。一般来说，ALK 激酶抑制剂在治疗期间与较高的血清酶升高率相关，但由其引起的特异性、临床明显肝损伤的病例非常罕见。大多数病例报告均与克唑替尼（2011年获批）有关，克唑替尼也是最常用的抗ALK激酶抑制剂。阿来替尼（2015年）和色瑞替尼（2014年）的临床试验中均报告了伴有黄疸的肝损伤病例，但未提供详细信息。因此，布加替尼可能导致伴有黄疸的急性肝损伤，但即使发生，也应该非常罕见。
可能性评分：E（未经证实，但怀疑是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于布加替尼在哺乳期临床应用的信息。制造商建议在布加替尼治疗期间以及末次给药后 1 周内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
66% 的布加替尼剂量与血浆蛋白结合，血药浓度与血浆浓度之比为 0.69。

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在为期 28 天的 H3122-G1202R 异种移植研究中（100 mg/kg/天，口服）：未出现显著体重减轻（>8%）；血清ALT = 29 ± 5 U/L，AST = 51 ± 7 U/L（正常范围：ALT 20-40 U/L，AST 40-60 U/L）[1]
- 在为期14天的大鼠研究中（30 mg/kg/天，口服）：6只大鼠中有1只出现轻度腹泻（第7天缓解）；肝脏/肾脏未见组织病理学改变[2]
- 在为期21天的SH-SY5Y小鼠模型中（50 mg/kg/天，口服）：未见治疗相关死亡；8只小鼠中有2只出现轻度脱发（治疗后恢复）[3]

[1]. The Potent ALK Inhibitor Brigatinib (AP26113) Overcomes Mechanisms of Resistance to First- and Second-Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models. Clin Cancer Res. 2016 Nov 15;22(22):5527-5538.

[2]. Discovery of Brigatinib (AP26113), a Phosphine Oxide-Containing, Potent, Orally Active Inhibitor of Anaplastic Lymphoma Kinase. J Med Chem. 2016 May 26;59(10):4948-64.

[3]. Brigatinib, an anaplastic lymphoma kinase inhibitor, abrogates activity and growth in ALK-positive neuroblastoma cells, Drosophila and mice. Oncotarget. 2016 May 17;7(20):29011-22.

布加替尼（Brigatinib），原名AP26113，是一种可逆的间变性淋巴瘤激酶（ALK）和表皮生长因子受体（EGFR）双重抑制剂。与野生型EGFR相比，它对EGFR突变体具有选择性。此外，它还对9种不同的克唑替尼耐药的EML4-ALK融合基因突变体具有选择性，该融合基因在易感肺实质的转化过程中起着关键作用。布加替尼由武田药品工业株式会社的子公司Ariad Pharmaceuticals开发，并于2017年4月28日获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准。
布加替尼是一种激酶抑制剂。布加替尼的作用机制是作为酪氨酸激酶抑制剂和细胞色素P450 3A诱导剂。
布加替尼是一种酪氨酸激酶受体抑制剂和抗肿瘤药物，用于治疗某些类型的晚期非小细胞肺癌。布加替尼治疗期间血清转氨酶水平会出现中等程度的短暂升高，但尚未发现与临床上明显的急性肝损伤病例相关。
布加替尼是一种口服的受体酪氨酸激酶抑制剂，可抑制间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 和表皮生长因子受体 (EGFR)，具有潜在的抗肿瘤活性。布加替尼可与ALK激酶及其融合蛋白以及EGFR及其突变体结合并抑制其活性。这导致ALK激酶和EGFR激酶活性受到抑制，从而破坏其信号通路，最终抑制易感肿瘤细胞的生长。此外，AP26113似乎能够克服基于突变的耐药性。ALK属于胰岛素受体超家族，在神经系统发育中发挥重要作用；ALK失调和基因重排与一系列肿瘤相关。EGFR在多种癌细胞类型中过表达。

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药物适应症
间变性淋巴瘤激酶阳性转移性非小细胞肺癌（ALK+ NSCLC）仅占NSCLC病例的3-5%，但ALK突变、过表达以及在实体瘤和血液肿瘤中多种致癌融合蛋白中的存在，凸显了其作为癌症治疗靶点的重要性和潜力。ALK相关的NSCLC病例与融合基因EML4-ALK的存在有关，该融合基因将ALK蛋白与棘皮动物微管相关蛋白样蛋白4（EML4）融合，EML4的原始功能是促进微管的正确形成。异常融合蛋白的存在会导致异常信号传导，从而促进细胞生长、增殖和存活。克唑替尼适用于治疗此类病例，但ALK激酶结构域突变的存在会导致耐药。因此，布加替尼适用于治疗对克唑替尼不耐受的ALK阳性非小细胞肺癌（NSCLC）患者。
FDA标签
Alunbrig适用于作为单药疗法，用于治疗既往未接受过ALK抑制剂治疗的间变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性晚期非小细胞肺癌（NSCLC）成人患者。 Alunbrig适用于既往接受过克唑替尼治疗的ALK阳性晚期非小细胞肺癌成人患者的单药治疗。
治疗间变性大细胞淋巴瘤、治疗炎性肌纤维母细胞瘤、治疗非小细胞肺癌

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作用机制
Brigitanib是一种酪氨酸激酶抑制剂，对多种激酶具有活性，包括ALK、ROS1、胰岛素样生长因子1受体以及EGFR缺失和点突变。其作用机制是通过抑制ALK磷酸化和下游信号蛋白的激活。

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药效学
Brigitanib可抑制表达EML4-ALK融合蛋白的细胞以及17种克唑替尼耐药的ALK突变体的增殖和体外活力。其作用范围扩展至表达 EGFR 缺失、ROS1-L2026M、FLT3-F691L 和 FLT3-D835Y 的细胞。在 EML4-ALK 异种移植小鼠模型中，Brigitanib 可剂量依赖性地抑制肿瘤生长、减轻肿瘤负荷并延长生存期。 Brigatinib 的时间进程和暴露-反应研究仍不清楚。

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Brigatinib (AP26113) 是一种 ATP 竞争性 ALK/EGFR 双重抑制剂，旨在通过对 ALK 耐药突变体（例如 G1202R）的高亲和力来克服对第一代（克唑替尼）和第二代（阿来替尼）ALK 抑制剂的耐药性 [1][2]。
- 它具有强大的血脑屏障穿透性（小鼠脑脊液/血浆浓度比为 0.72），这解释了其对伴有脑转移的 ALK 阳性非小细胞肺癌的疗效 [1]。
- 在神经母细胞瘤模型中，Brigatinib 与 MEK 抑制剂曲美替尼具有协同作用（该文献中没有定量数据）[3]。
- 临床前数据支持 Brigatinib 作为治疗获得性耐药或脑转移的 ALK 阳性癌症的候选药物。 [1][2][3]

C₂₉H₃₉CLN₇O₂P

584.09

583.259

C, 59.63; H, 6.73; Cl, 6.07; N, 16.79; O, 5.48; P, 5.30

1197953-54-0

Brigatinib-13C6

68165256

Light yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

781.8±70.0 °C at 760 mmHg

426.6±35.7 °C

0.0±2.7 mmHg at 25°C

1.641

0.43

95.67

2

9

8

40

835

0

ClC1=C([H])N=C(N=C1N([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1P(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])=O)N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1OC([H])([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C1([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H]

AILRADAXUVEEIR-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C29H39ClN7O2P/c1-35-15-17-37(18-16-35)21-11-13-36(14-12-21)22-9-10-24(26(19-22)39-2)33-29-31-20-23(30)28(34-29)32-25-7-5-6-8-27(25)40(3,4)38/h5-10,19-21H,11-18H2,1-4H3,(H2,31,32,33,34)

5-chloro-4-N-(2-dimethylphosphorylphenyl)-2-N-[2-methoxy-4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)piperidin-1-yl]phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

AP-26113; AP 26113; Brigatinib-analog; AP26113; Brigatinib; Alunbrig.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (1.71 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，将 100 μL 10.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入到 400 μL PEG300 中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (1.71 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (1.71 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液添加到 900 μL 玉米油中并充分混合。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 5 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 6 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (0.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 7 中的溶解度: NMP+polyethylene glycol 300 (10+90, v+v): 1 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。