Brigatinib (AP26113)   中文名称: 布格替尼

ALK (IC50 = 0.37 nM); ROS1 (IC50 = 1.9 nM); FLT3 (IC50 = 2.1 nM); IGF1R (IC50 = 24.9 nM); EGFR(C797S/del19) (IC50 = 39.9 nM)

体外活性：AP26113 对敏感和耐药 H3122 细胞均具有高度活性，以剂量依赖性方式减少细胞生长、抑制 ALK 磷酸化并诱导细胞凋亡。 AP26113 降低 H3122 和 H3122 CR 细胞中的 p-ALK，IC50 值分别为 7.4 和 16.8 nM。 AP26113 减少表达天然或突变 EML4-ALK 的 Ba/F3 细胞中的细胞数量，IC50 分别为 10 nM 和 24 nM。 AP26113 抑制 SU-DHL-1、H3122 和 Ba/F3-EML4-ALK v1 细胞系的细胞生长，GI50 分别为 9 nM、4 nM 和 13 nM。 AP26113 在 Karpas-299、SU-DHL-1 和 L-82 细胞系中抑制 ALK 磷酸化，IC50 分别为 3.2 nM、1.5 nM 和 2.1 nM。 AP26113 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 和 H3122 细胞中 ALK 和 ERK 的磷酸化。 AP26113 抑制 Ba/F3 系（天然 EML4-ALK）和 Ba/F3 系（EML4-ALK G1269S 突变体）中的细胞生长，IC50 分别为 11 nM 和 16 nM。 AP26113 抑制 Ba/F3 系（天然 EML4-ALK）和 Ba/F3 系（EML4-ALK E1210K 突变体）中的 ALK 磷酸化，IC50 分别为 74 nM 和 335 nM。 AP26113 (10 mg/kg-75 mg/kg) 在 PF-02341066 耐药 EML4-ALK 突变小鼠异种移植模型中有效。 AP26113 分别以 25 mg/kg、50 mg/kg 和 50 mg/kg 剂量诱导表达天然 EML4-ALK 以及 G1269S 和 L1196M 突变体的肿瘤消退。在表达 EGFR-DEL 的 Ba/F3 细胞中，AP26113 抑制 EGFR 磷酸化和活力，IC50 分别为 75 nM 和 114 nM。在表达 EGFR-DEL/T790M 的 Ba/F3 细胞中，AP26113 抑制 EGFR 磷酸化和活力，IC50 分别为 15 和 281 nM。 AP26113 在表达 EGFR-DEL (HCC827) 的 NSCLC 系中抑制 EGFR 磷酸化，IC50 为 62 nM，抑制细胞生长，GI50 为 165 nM。 AP26113 在表达 EGFR-DEL/T790M 的 HCC827 细胞中抑制 EGFR 磷酸化，IC50 为 59 nM，抑制细胞生长，GI50 为 245 nM。 AP26113 在 HCC78 NSCLC 细胞中以剂量依赖性方式有效抑制 SLC34A2-ROS 驱动的信号传导和增殖。激酶测定：对 289 种激酶进行体外 HotSpotSM 激酶分析。该测定在 10 μM [33P]-ATP 存在下进行，使用 brigatinib 浓度范围为 0.05 nM 至 1 μM。细胞测定：使用 Cell Titer 96 Aqueous One Solution 细胞增殖测定或 CyQuant 细胞增殖测定评估细胞生长。铺板后 24 小时，用 AP26113 处理细胞并生长 72 小时。引起 50% 生长抑制 (GI50) 的浓度通过校正零时间（处理时间）的细胞计数并使用 XLfit 版本 4.2.2 for Microsoft Excel 将数据绘制为相对于媒介物 (DMSO) 处理的细胞的生长百分比来确定。使用 SU-DHL-1、H3122 和 Ba/F3-EML4-ALK v1 细胞系。

AP26113 (< 50 mg/kg) 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 异种移植小鼠模型肿瘤中的 p-ALK。 AP26113 (< 50 mg/kg) 剂量依赖性地抑制 Karpas-299 异种移植小鼠模型和 H3122 异种移植小鼠模型中的肿瘤生长。 AP26113 表现出良好的特性，包括中等的体外血浆蛋白结合（在人、大鼠、小鼠中为 47%、70% 和 76%），对主要 CYP 亚型的抑制可忽略不计。 AP26113 (10 mg/kg) 在大鼠中具有良好的耐受性，Cmax 为 2587 ng/mL，AUC 为 41120 hr.ng/mL。 AP26113 (25 mg/kg) 导致 HCC827(EGFR-DEL) 或 HCC827(EGFR-DEL/T790M) 异种移植小鼠模型中的肿瘤消退。

在体外对 289 种激酶进行 HotSpot^SM 激酶谱分析。该实验在 10 μM [³³P]-ATP 存在的情况下，使用浓度范围为 0.05 nM 至 1 μM 的布加替尼进行。

将指定的抑制剂连续稀释并添加到含有 15,000 个细胞的每个孔中。刃天青在 72 小时后测量细胞的活力。通过将数据拟合到对数（抑制剂浓度）与标准化响应（可变斜率）的方程中，使用 GraphPad Prism 6.0 确定 IC50 值。每个实验均进行两份，至少进行三次。

Mice: (1) Female SCID/beige mice, aged eight to ten weeks, receive intravenous injections of 5x10⁶ H3122 cells each. After the tumor size reaches approximately 300 mm³ on day zero, the mice are randomized into ten treatment groups. Treatments are taken orally at a dose volume of 10 mL/kg for a maximum of 21 days in a row. Tumors under the skin are measured twice or three times a week. The formula (L×W²)/2 is used to calculate the tumor volume (in mm³). The animal is put to sleep by CO₂ asphyxiation when a tumor weighs 10% of its body weight. (2) Female SCID/beige mice, aged eight to ten weeks, receive subcutaneous injections of 2.5 ×10⁶ Karpas-299 cells per mouse. After the tumors reach approximately 180 mm³ on day zero, the mice are randomly assigned to one of ten treatment groups. Oral treatment is given for 14 days in a row at a dose volume of 10 mL/kg. The measurement and computation of tumor volume follow the guidelines for the H3122 model.

[1]. The Potent ALK Inhibitor Brigatinib (AP26113) Overcomes Mechanisms of Resistance to First- and Second-Generation ALK Inhibitors in Preclinical Models. Clin Cancer Res. 2016 Nov 15;22(22):5527-5538.

[2]. Discovery of Brigatinib (AP26113), a Phosphine Oxide-Containing, Potent, Orally Active Inhibitor of Anaplastic Lymphoma Kinase. J Med Chem. 2016 May 26;59(10):4948-64.

[3]. Brigatinib, an anaplastic lymphoma kinase inhibitor, abrogates activity and growth in ALK-positive neuroblastoma cells, Drosophila and mice. Oncotarget. 2016 May 17;7(20):29011-22.

C₂₉H₃₉CLN₇O₂P

584.09

583.26

C, 59.63; H, 6.73; Cl, 6.07; N, 16.79; O, 5.48; P, 5.30

1197953-54-0

Brigatinib-13C6

Light yellow solid powder

CN1CCN(CC1)C2CCN(CC2)C3=CC(=C(C=C3)NC4=NC=C(C(=N4)NC5=CC=CC=C5P(=O)(C)C)Cl)OC

AILRADAXUVEEIR-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C29H39ClN7O2P/c1-35-15-17-37(18-16-35)21-11-13-36(14-12-21)22-9-10-24(26(19-22)39-2)33-29-31-20-23(30)28(34-29)32-25-7-5-6-8-27(25)40(3,4)38/h5-10,19-21H,11-18H2,1-4H3,(H2,31,32,33,34)

5-chloro-4-N-(2-dimethylphosphorylphenyl)-2-N-[2-methoxy-4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)piperidin-1-yl]phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

AP-26113; AP 26113; Brigatinib-analog; AP26113; Brigatinib; Alunbrig.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

NMP+polyethylene glycol 300 (10+90, v+v): 1 mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。