| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
C12-200 is a formulation excipient that facilitates intracellular delivery of nucleic acids. It does not have a protein or enzyme target. No IC50, Ki, EC50, or binding affinity values are provided. [1][2][3]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- 乳腺癌细胞系（MCF-7、MDA-MB-231、BT-549）中的细胞相容性： 细胞与C12-200/siGAPDH LNP（50 nM siRNA，转染4小时）孵育。转染后24小时使用ATP检测试剂盒测量细胞活力，与未处理对照组相比，活力>95%。阳性对照PEI（50 μg/mL）将活力降至20%。[1]
- 原代大鼠背根神经节（DRG）神经元中的细胞相容性： 细胞与C12-200/siTRPV1 LNP（50 nM siRNA，转染4小时）孵育。转染后24小时细胞活力约100%。[1] - MDA-MB-231细胞中的剂量递增细胞相容性： 细胞与递增浓度的负载siGFP的C12-200 LNP（10、25、50、75和100 nM siRNA）孵育。转染后24小时细胞活力保持>85%。[1] - 原代大鼠皮层神经元中Cy5 siRNA的细胞摄取（流式细胞术）： 负载Cy5 siRNA的C12-200 LNP（含PEG-DMG，50 nM siRNA，孵育24小时）导致94-96%的细胞呈Cy5阳性。不含PEG-DMG的LNP导致81-83%的细胞呈Cy5阳性。裸Cy5 siRNA的摄取率为44-46%。Lipofectamine RNAiMAX（阳性对照）的摄取率为94-96%，但伴有可见的细胞毒性。[1] - 人皮层神经元细胞系（HCN-2）中的细胞摄取（荧光显微镜）： HCN-2细胞与C12-200 LNP（50或100 nM Cy5 siRNA）孵育2、4或24小时。含PEG-DMG的LNP显示Cy5 siRNA摄取呈时间依赖性增加，24小时时几乎所有细胞均显示荧光。不含PEG-DMG的LNP摄取较低。Lipofectamine RNAiMAX在2小时内即引起细胞毒性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 小鼠（CD-1）中hEPO蛋白的产生： 静脉注射负载hEPO mRNA的C12-200 LNP（1.0 mg/kg，基于封装mRNA）后6小时，血清hEPO水平达到约11 μg/mL（超过正常生理水平125,000倍）。72小时时仍可检测到水平（约47 ng/mL），1周时略高于正常水平（约120 pg/mL）。起效迅速：30分钟时约190 ng/mL。[2]
- 小鼠血细胞比容（Hct）增加： 用负载hEPO mRNA的C12-200 LNP处理的野生型小鼠（单次30 μg剂量或第1、3、5天三次10 μg剂量）在15天内Hct增加约20%，证明MRT衍生的EPO蛋白具有生理活性。[2] - 食蟹猴中hEPO蛋白的产生： 雄性食蟹猴（约4 kg）单次静脉注射负载hEPO mRNA的C12-200 LNP，剂量为0.025或0.050 mg/kg。血清hEPO水平在6小时达到峰值（0.050 mg/kg剂量时约9000 pg/mL），并在72小时仍可检测到。未观察到不良临床症状；ALT/AST水平在正常范围内。[2] - 野生型小鼠（CD-1）中hFIX蛋白的产生： 静脉注射负载hFIX mRNA的C12-200 LNP（1.0 mg/kg）后12小时，血浆hFIX水平达到约4.4 μg/mL，持续72小时。[2] - FIX敲除（血友病B）小鼠中hFIX蛋白的产生： FIX KO小鼠单次静脉注射负载hFIX mRNA的C12-200 LNP，剂量为0.25或0.50 mg/kg。12小时时血浆hFIX水平：约400 ng/mL（0.25 mg/kg）和约1.77 μg/mL（0.50 mg/kg）。FIX活性达到野生型水平的40.9%（0.25 mg/kg）和87%（0.50 mg/kg）。[2] - 血友病B小鼠模型（切口模型）中的疗效： 用负载hFIX mRNA的C12-200 LNP（0.25或0.50 mg/kg）处理的FIX KO小鼠在给药后12小时接受1 cm背部切口。切口后12小时（给药后24小时）的Hct水平为36.1%（0.25 mg/kg）和39.0%（0.50 mg/kg），而盐水处理的KO小鼠为17.9%（处理前Hct约47.7%）。这表明活性FIX蛋白减少了出血。[2] - 小鼠中荧光素酶mRNA的递送： 负载萤火虫荧光素酶mRNA的C12-200 LNP（15 μg总mRNA，静脉注射），优化配方（C-35）的肝脏发光量比原始配方高约3倍。表达主要发生在肝脏。[3] - 小鼠中siRNA递送（因子VII沉默）： 静脉注射负载FVII siRNA的C12-200 LNP，剂量为0.01至0.1 mg/kg。原始配方和优化配方（C-35）的ED50均约为0.03 mg/kg总siRNA。两种配方之间的沉默效果无显著差异。[3] |
| 酶活实验 |
对表达蛋白进行了以下体内活性测定：
- FIX活性测定： 分析FIX KO小鼠的血浆样本，使用显色因子IX活性测定试剂盒。活性以野生型（C57Bl/6）盐水处理小鼠为基准归一化（100%活性）。FIX KO盐水处理小鼠显示约1.15%活性。用负载hFIX mRNA的C12-200 LNP（0.50 mg/kg）处理后，活性恢复至野生型水平的87%。[2]
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| 细胞实验 |
- 细胞活力（ATP检测）： 细胞接种于96孔板。与LNP（除特别说明外为50 nM siRNA）转染4小时并孵育24小时后，向每孔加入60 μL CellTiter-Glo 2.0试剂和60 μL完全培养基。在室温摇床上避光孵育15分钟后，将60 μL混合物转移至白色不透明板，测量发光值。相对ATP水平（%）通过归一化至未处理细胞计算。[1]
- Cy5 siRNA摄取的流式细胞术： 原代大鼠皮层神经元（24孔板中50,000细胞/孔）与负载Cy5 siRNA的LNP（50 nM，24小时）孵育。收集细胞，离心（300 g，5分钟），重悬于PBS，在声波聚焦细胞仪上分析（激发638 nm，发射720/30 nm）。记录30,000个事件。未处理细胞用于设置Cy5阴性群体的门。[1] - Cy5 siRNA摄取的荧光显微镜检查： 人皮层神经元（HCN-2，48孔板中7,000细胞/孔）培养1-2周。细胞与负载Cy5 siRNA的LNP（50或100 nM）孵育2、4或24小时。细胞用PBS洗涤，使用倒置荧光显微镜成像（激发651 nm，发射670 nm）。[1] - mRNA检测的原位杂交（ISH）： 分析用负载hEPO或hFIX mRNA的LNP处理的小鼠的肝脏组织，使用专有探针设计技术进行单分子可视化。探针设计与小鼠、大鼠、猪和恒河猴无交叉反应。在给药后30分钟至72小时，在肝细胞和窦状隙细胞中观察到阳性染色。[2] - 荧光素酶测定： 小鼠静脉注射负载Luc mRNA的LNP（15 μg总mRNA）。注射后6小时，采集器官，使用IVIS成像系统定量荧光素酶表达（发光总通量）。[3] |
| 动物实验 |
- 小鼠（CD-1、C57BL/6、FIX KO）： 使用6-8周龄（CD-1）或10-12周龄（C57BL/6、FIX KO）雄性小鼠。所有配方通过尾静脉单次推注给药。剂量：hEPO mRNA 1.0 mg/kg；hFIX mRNA 0.25、0.50或1.0 mg/kg；siRNA 0.01-0.1 mg/kg；荧光素酶mRNA每只小鼠15 μg总mRNA。在指定时间点通过面部静脉穿刺、尾尖或终末心脏穿刺采集血样。血清：血液在室温下凝集≥30分钟，9300 g离心10分钟。血浆：血液收集到锂肝素或枸橼酸盐包被管中。[2][3]
- 食蟹猴： 雄性猴子（约4 kg体重）通过耳静脉单次静脉注射，剂量为0.025或0.050 mg/kg（负载hEPO mRNA的LNP）或0.025 mg/kg（对照不可翻译mRNA）。总剂量体积为1 mL。在72小时内采集血样。测量ALT/AST水平以评估耐受性。[2] - 血友病B小鼠模型切口操作： FIX KO小鼠在给药后12小时用异氟烷麻醉。背部胸区（预先剃毛）用碘伏和酒精无菌准备。做一个约1.0 cm的手术皮肤切口并用手术缝合线闭合。在切口后12小时（给药后24小时）采集血样用于Hct测量。[2] - 血细胞比容测量： 将全血样本收集到肝素化微毛细管中，在环境温度下以10,000-15,000 g离心5分钟。计算细胞压积与总体积的比值。[2] - LNP配制（通用方法）： 将C12-200、辅助脂质（DSPC、DOPE或DSPE）、胆固醇和PEG-脂质（DMG-PEG-2K）以特定摩尔比溶解于乙醇中。在柠檬酸盐缓冲液（10 mM，pH 4.0-4.5）中制备mRNA（或siRNA）水溶液。将脂质溶液快速注入mRNA水溶液中并振荡，得到20%乙醇的最终悬浮液。将所得纳米颗粒悬浮液过滤，用1× PBS（pH 7.4）渗滤，浓缩，并在2-8°C下储存。典型封装效率：75-78%；粒径：86-102 nm；多分散性：0.14-0.16。[2][3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
- 体外细胞相容性： 在50 nM siRNA剂量下，C12-200 LNP在MCF-7、MDA-MB-231、BT-549乳腺癌细胞和原代大鼠DRG神经元中显示>85-95%的细胞活力。在MDA-MB-231细胞中剂量递增至100 nM siRNA（以及相应更高的脂质剂量）保持>85%的活力。[1]
- 小鼠体内耐受性： 在测试剂量下（hEPO mRNA高达1.0 mg/kg；hFIX mRNA高达1.0 mg/kg；siRNA高达0.1 mg/kg），所有C12-200 LNP配方在小鼠中均耐受良好，未观察到不良事件。[2][3] - 食蟹猴体内耐受性： 用C12-200 LNP（0.025或0.050 mg/kg）处理的猴子未显示临床症状，ALT/AST水平正常。对照猴子（不可翻译mRNA 0.025 mg/kg）也未显示不良效应。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
- 化学结构： C12-200为1,1'-((2-(4-(2-((2-(双(2-羟基十二烷基)氨基)乙基)(2-羟基十二烷基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)乙基)氮烷二基)双(十二烷-2-醇)。它是一种可电离阳离子脂质样材料，pKa约为6.96-7.25。[1][2][3]
- 在LNP中的作用： C12-200是可电离阳离子脂质样组分，通过静电作用与带负电的核酸（siRNA/mRNA）复合，促进细胞摄取，并由于其pH依赖性电荷（酸性pH下带正电，生理pH下中性）促进内体逃逸。[1][2][3] - 配方优化： 使用实验设计（DOE）方法（部分因子设计和确定性筛选设计），开发了优化的mRNA递送配方（C-35），参数为：C12-200:mRNA重量比10:1；摩尔组成：35% C12-200、16% DOPE、46.5%胆固醇、2.5% PEG-DMG；粒径102 nm；封装效率43%；pKa 6.96；zeta电位-5.0 mV。该配方使hEPO产量比原始siRNA优化配方提高了7倍。[3] - siRNA与mRNA递送的比较： 优化的mRNA配方（C-35）与原始siRNA优化配方相比，未改善siRNA递送（FVII沉默）（两者的ED50均约为0.03 mg/kg）。这表明siRNA和mRNA递送的最佳配方参数空间不同。[3] |
| 分子式 |
C70H145N5O5
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|---|---|
| 分子量 |
1136.9308
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| 精确质量 |
1136.124
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| 元素分析 |
C, 73.95; H, 12.86; N, 6.16; O, 7.04
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| CAS号 |
1220890-25-4
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| 相关CAS号 |
1226777-45-2; 1226552-44-8
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| PubChem CID |
49785165
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
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| LogP |
22.3
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| tPSA |
117
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
64
|
| 重原子数目 |
80
|
| 分子复杂度/Complexity |
1160
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C([H])([H])N(C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])O[H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])O[H])C([H])([H])C([H])([H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])O[H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])O[H])C([H])([H])C1([H])[H]
|
| InChi Key |
URQSMTPJROAUPK-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C70H145N5O5/c1-6-11-16-21-26-31-36-41-46-65(76)61-74(62-66(77)47-42-37-32-27-22-17-12-7-2)53-51-69(70(80)50-45-40-35-30-25-20-15-10-5)71-52-54-72-55-57-73(58-56-72)59-60-75(63-67(78)48-43-38-33-28-23-18-13-8-3)64-68(79)49-44-39-34-29-24-19-14-9-4/h65-71,76-80H,6-64H2,1-5H3
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| 化学名 |
1,1-((2-(4-(2-((2-(bis(2-hydroxydodecyl)amino)ethyl)(2-hydroxydodecyl) amino)ethyl)piperazin-1-yl)ethyl)azanediyl)bis(dodecan-2-ol)
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| 别名 |
C12-200; Tech G 1; C12 200; MFCD32062847; 1,1'-((2-(4-(2-((2-(Bis(2-hydroxydodecyl)amino)ethyl)(2-hydroxydodecyl)amino)ethyl)piperazin-1-yl)ethyl)azanediyl)bis(dodecan-2-ol); 1-[2-[bis(2-hydroxydodecyl)amino]ethyl-[2-[4-[2-[bis(2-hydroxydodecyl)amino]ethyl]piperazin-1-yl]ethyl]amino]dodecan-2-ol; C12200; C 12200; C 12-200; C-12-200; C-12200
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~87.96 mM)
Ethanol : ~100 mg/mL (~87.96 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入400 μL PEG300 中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: 2.5 mg/mL (2.20 mM) in 10% EtOH + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 25.0mg/mL澄清EtOH储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 6 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.20 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8796 mL | 4.3978 mL | 8.7956 mL | |
| 5 mM | 0.1759 mL | 0.8796 mL | 1.7591 mL | |
| 10 mM | 0.0880 mL | 0.4398 mL | 0.8796 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AOH-1996
hMAO-B-IN-3
Flupyrimin
阿曲库铵
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