Dendrobine

别名: Dendrobine; (–)-Dendrobine 石斛碱;石斛碱(标准品);石斛碱(石槲碱); 品牌 石斛碱对照品;金钗石斛提取物-石斛碱;石斛碱 Dendrobine;石斛碱标准品;石斛碱对照品;石槲碱
目录号: V31688 纯度: ≥98%
石斛碱是从金钗石斛中提取的生物碱。
Dendrobine CAS号: 2115-91-5
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10 mM * 1 mL in DMSO
1mg
5mg
10mg
50mg
100mg
250mg
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纯度/质量控制文件

纯度: =99.87%

产品描述
石斛碱是从金钗石斛中提取的生物碱。 Dendrobine 对甲型流感病毒具有抗病毒作用,对 A/FM-1/1/47 (H1N1)、A/Puerto Rico/8/34 H274Y (H1N1) 和 A/Aichi/2/68 (H3N2) 的 IC50值分别为 3.39 μM、2.16 μM 和 5.32 μM。
生物活性&实验参考方法
靶点
IC50s: 3.39 μM for A/FM-1/1/47, 2.16 μM for A/Puerto Rico/8/34 H274Y, 5.32 μM for A/Aichi/2/68
体外研究 (In Vitro)
石斛碱是石斛的主要成分,因其在保健领域的广泛应用而日益受到人们的关注。Dendrobine对甲型流感病毒(包括A/FM-1/1/47(H1N1)、A/Puerto Rico/8/34 H274Y(H1N1)和A/Aichi/2/68(H3N2))具有抗病毒活性,IC50值分别为3.39±0.32、2.16±0.91和5.32±1.68μg/mL。机制研究表明,树状宾抑制病毒复制周期的早期阶段。值得注意的是,树状突蛋白可以与病毒核蛋白(NP)的高度保守区结合,从而抑制病毒核蛋白的核输出及其低聚。总之,树状宾显示出作为一种有前途的治疗流感病毒感染的药物的潜力。更重要的是,这些结果为“shihu”中药的全面应用提供了宝贵的信息[1]。
酶活实验
神经氨酸酶抑制试验[1]
通过NA抑制试验来评估树状宾对病毒颗粒释放的影响。简言之,如前所述,将15μL流感病毒A/Aichi/2/68(H3N2)溶液与5μL 2倍稀释的树状宾或扎那米韦(阳性对照)在37°C的96孔黑板中混合30分钟。然后,将30μL溶于稀释缓冲液(32.5 mM MES和4 mM CaCl2,pH 6.5)中的20μM MU-NANA(2-(4-甲基伞形花序基)-α-d-N-乙酰神经氨酸钠,Sigma-Aldrich)底物溶液添加到每个孔中。将平板在37°C的黑暗中进一步孵育1小时,然后加入50μL的14mM NaOH以结束酶反应。使用微孔板读取器在340nm的激发波长和440nm的发射波长下记录产物4-甲基伞形酮的荧光强度

迷你复制子测定[1]
如前所述,通过使用小基因组测定法测定树状突蛋白对病毒核糖核蛋白复合物(vRNP)活性的影响。简言之,使用Lipofectamine 2000,用50ng的NP和病毒聚合酶质粒(pHW2K-NP、pHW2K-PA、pHW2K-PB1、pHW2K-PB2)、pPolI-Fluc(萤火虫萤光素酶报告质粒)以及10ng的hRluc-TK(Renilla萤光素酶质粒)转染在24孔板中生长的293T细胞。转染后5小时,上清液用含有不同浓度的树状宾、扎那米韦或0.1%DMSO的10%FBS的新鲜DMEM置换。转染后24小时,用细胞裂解物(Promega)裂解细胞20分钟,并如上所述测量荧光素酶活性。[1]

表面等离子体共振(SPR)分析[1]
根据我们之前的论文,通过PlexArray HT系统检测流感病毒NP和树状突宾的结合亲和力,并进行了微小的修改。在使用光交联将树状宾固定在芯片表面上后,以2μL/s的流速、300 s的接触时间和300 s的解离时间注射2倍系列稀释的重组流感NP。运行缓冲液是含有137mM NaCl、2.7mM KCl和0.05%吐温-20的10mM磷酸盐缓冲液。芯片平台用甘氨酸–HCl(pH 2.0)再生,并用运行缓冲液洗涤。使用PlexeraDE软件通过使用Langmuir方程的曲线拟合来计算亲和力或KD值。
细胞实验
细胞毒性测定[1]
采用MTT法测定了树状宾的细胞毒性。简言之,将96孔板中约90%的融合细胞暴露于2倍系列稀释液的树状突宾中。孵育48小时后,加入100μL MTT溶液,用培养基稀释至0.5 mg/mL,并在37°C下保留4小时。随后,去除上清液,加入150μL DMSO以溶解甲酰胺产物。使用Tecan Genios Pro微孔板读取器(美国马萨诸塞州贝德福德)在570nm处测量每个孔的吸光度。使用CalcuSyn软件计算半数最大细胞毒性浓度(CC50)。[1]

抗病毒检测和显微镜检查[1]
为了测定树状突蛋白的抗病毒活性,将融合的MDCK细胞在37°C下以0.01的多重感染率(MOI)感染病毒1小时。随后,在用PBS洗去未吸收的病毒后,将非细胞毒性浓度的树状突蛋白添加到细胞中,并将细胞再培养48小时。在培养结束时,评估如前所述的基于MTT的测定法的树状突肽的抗病毒活性。通过显微镜观察病毒感染细胞的细胞病变效应。[1]

菌斑测定[1]
用A/Aichi/2/68(H3N2)菌株在37°C下以0.01的MOI接种MDCK细胞的汇合单层1小时。在去除未结合的病毒后,如前所述,将细胞在含有1μg/mL TPCK胰蛋白酶(Sigma-Aldrich)、2%琼脂(SigmaAldrich)和不同浓度的树状宾的1.5mL无血清MEM(2×)中培养72小时。通过噬菌斑的数量来确定树状宾对病毒噬菌斑形成的影响。
参考文献

[1]. Anti-influenza A Virus Activity of Dendrobine and Its Mechanism of Action. J Agric Food Chem. 2017 May 10;65(18):3665-3674.

其他信息
Dendrobine is a member of indoles.
Dendroban-12-one has been reported in Dendrobium linawianum, Dendrobium chrysanthum, and Dendrobium nobile with data available.
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C16H25NO2
分子量
263.3752
精确质量
263.188
元素分析
C, 72.97; H, 9.57; N, 5.32; O, 12.15
CAS号
2115-91-5
PubChem CID
442523
外观&性状
White to yellow solid powder
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
374.6±25.0 °C at 760 mmHg
熔点
135-136℃
闪点
132.8±14.0 °C
蒸汽压
0.0±0.8 mmHg at 25°C
折射率
1.526
来源
Pyrrole Alkaloids from Dendrobium nobile
LogP
1.88
tPSA
29.54
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
19
分子复杂度/Complexity
435
定义原子立体中心数目
7
SMILES
O1C([C@@]2([H])[C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])[C@]1([H])[C@]1([H])[C@@]3(C([H])([H])[H])[C@@]([H])(C([H])([H])N1C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]32[H])=O
InChi Key
RYAHJFGVOCZDEI-UFFNCVEVSA-N
InChi Code
InChI=1S/C16H25NO2/c1-8(2)11-12-10-6-5-9-7-17(4)14(16(9,10)3)13(11)19-15(12)18/h8-14H,5-7H2,1-4H3/t9-,10+,11+,12-,13-,14-,16+/m1/s1
化学名
(2aS,2a1R,4aS,5R,8R,8aS,9S)-9-isopropyl-2a1,4-dimethyldecahydro-7H-6-oxa-4-aza-5,8-methanocyclopenta[cd]azulen-7-one
别名
Dendrobine; (–)-Dendrobine
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~33.33 mg/mL (~126.55 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.7968 mL 18.9840 mL 37.9680 mL
5 mM 0.7594 mL 3.7968 mL 7.5936 mL
10 mM 0.3797 mL 1.8984 mL 3.7968 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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