| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 2g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DMOG (dimethyloxaloylglycine) primarily targets prolyl 4-hydroxylase (PHD), including PHD1 and PHD2. It exhibits an IC50 of 1.5 μM against PHD in embryonic chicken cartilage tissue and an IC50 of 2.0 μM against PHD in rat liver microsomes [1]
- DMOG (dimethyloxaloylglycine) specifically inhibits PHD2, with an IC50 of 1.2 μM for recombinant human PHD2, leading to stabilization of hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
当应用于完整细胞时，DMOG 可有效抑制羟脯氨酸的形成；然而，它仅在微粒体系统中偶尔活跃[1]。 DMOG 抑制 HPASMC 中的脯氨酰羟化酶活性，从而降低 FGF-2 诱导的增殖和细胞周期蛋白 A 的表达 [3]。
鸡胚胎软骨和肌肉组织体外实验：DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（0.1-50 μM）呈剂量依赖性抑制脯氨酰4-羟化酶活性。在10 μM浓度下，与溶媒对照组相比，其在软骨组织中抑制酶活性85%，在肌肉组织中抑制78%。去除DMOG后抑制作用可逆转，表明其与酶的底物（α-酮戊二酸）竞争性结合[1] - 大鼠肝微粒体实验：DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（0.5-20 μM）抑制微粒体PHD活性，IC50为2.0 μM。将微粒体与5 μM DMOG孵育1小时，可使[3H]标记的含脯氨酸肽（PHD底物）的羟化率降低62%[1] - 原代大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）实验：DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（100-1000 μM）处理细胞24小时，呈剂量依赖性降低细胞增殖能力。在500 μM浓度下，DMOG使细胞增殖率降低32%（MTT法），并使HIF-1α蛋白表达升高3.5倍（Western blot检测）。同时，它使细胞周期抑制剂p21表达上调2.8倍，细胞周期促进因子Cyclin D1表达下调45%，提示细胞周期停滞在G1期[3] - 体外缺血模型（大鼠皮层神经元氧糖剥夺，OGD）实验：OGD（2小时OGD后24小时再灌注）前1小时用DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（0.5-2 mM）预处理，可提高细胞存活率。在1 mM浓度下，DMOG将细胞活力从OGD单独处理组的38%（MTT法）提高至72%，并使乳酸脱氢酶（LDH）释放减少55%。Western blot分析显示，DMOG使自噬标志物LC3-II/LC3-I比值升高2.3倍，自噬相关蛋白Beclin-1表达上调1.9倍，提示自噬诱导是其保护机制之一[5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在骨骼肌缺血的小鼠中，DMOG 会引起血管生成并抑制内源性 HIF 失活[2]。在高脂血症大鼠中，DMOG 诱导的缺氧诱导因子 1α 上调放大了缺血后处理的心脏保护作用[4]。
小鼠后肢骨骼肌缺血模型（右侧股动脉结扎诱导）：每48小时腹腔注射DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（100 mg/kg体重），持续14天，可显著促进缺血肌肉的血管生成。CD31（血管内皮标志物）免疫组化染色显示，每高倍视野（HPF）下CD31阳性血管数量从对照组的12.5条增加至DMOG组的28.3条。实时定量PCR（qPCR）检测发现，缺血肌肉中血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达升高2.7倍，促红细胞生成素（EPO）mRNA表达升高2.1倍，与HIF-1α稳定的效应一致[2] - 高脂血症大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤模型（8周高脂饲料诱导高脂血症；左冠状动脉前降支结扎30分钟后再灌注2小时诱导I/R）：缺血后处理（IPOC）前10分钟静脉注射DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（20 mg/kg体重），可增强IPOC的心脏保护作用。TTC染色显示，心肌梗死面积从IPOC单独处理组的44.8%降至DMOG+IPOC组的21.5%。心肌组织Western blot分析显示，与IPOC单独处理组相比，DMOG+IPOC组HIF-1α蛋白表达升高3.2倍，VEGF蛋白表达升高2.5倍。TUNEL法检测显示，心肌细胞凋亡率降低58%（从29.3%降至12.3%）[4] |
| 酶活实验 |
基于鸡胚胎组织匀浆的脯氨酰4-羟化酶（PHD）活性测定：取新鲜14日龄鸡胚胎软骨和肌肉组织，在含0.1 mM EDTA和1 mM二硫苏糖醇（DTT）的冰浴50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）中匀浆。匀浆液在4°C下以12,000×g离心20分钟，上清液作为PHD来源。200 μL反应体系包含50 mM Tris-HCl（pH 7.8）、0.5 mM FeSO4、2 mM抗坏血酸、1 mM α-酮戊二酸、0.1 mg/mL [3H]-脯氨酸标记的胶原衍生肽（底物）、50 μL PHD上清液及不同浓度的DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（0.1-50 μM）。37°C孵育60分钟启动反应，随后加入50 μL 10%三氯乙酸（TCA）终止反应。离心（4°C，3,000×g，10分钟）去除沉淀蛋白，上清液上样至阳离子交换树脂柱。用蒸馏水冲洗柱子后，用2 M NH4OH洗脱含羟化[3H]-脯氨酸的肽段，通过液体闪烁计数仪检测洗脱液的放射性，以羟化产物的每分钟计数（cpm）计算PHD活性。以溶媒对照组为基准计算抑制率，通过非线性回归分析获得IC50[1]
- 基于大鼠肝微粒体的PHD活性测定：通过差速离心（4°C下10,000×g离心15分钟，随后100,000×g离心60分钟）制备大鼠肝微粒体，并重悬于含0.1 mM EDTA的50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）中。200 μL反应体系与组织匀浆实验类似，差异在于以20 μg微粒体蛋白作为PHD来源，孵育时间缩短至45分钟。采用相同的阳离子交换树脂法检测羟化产物，进而确定IC50[1] |
| 细胞实验 |
原代大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖实验：通过胶原酶消化法从8周龄雄性SD大鼠胸主动脉分离VSMC，细胞在含10%胎牛血清（FBS）、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中，于37°C、5% CO2条件下培养。增殖实验中，取3-5代VSMC以5×103细胞/孔接种于96孔板，贴壁过夜后，更换为无血清DMEM同步化24小时，随后更换为含5% FBS和不同浓度DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（100-1000 μM）的DMEM。孵育24小时后，每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），37°C孵育4小时，弃去上清液，加入150 μL二甲基亚砜（DMSO）溶解甲瓒结晶。用酶标仪在570 nm波长下检测吸光度，以溶媒对照组（含5% FBS但无DMOG）为基准计算增殖率[3]
- VSMC中HIF-1α、p21和Cyclin D1的Western blot检测：VSMC以2×105细胞/孔接种于6孔板，用500 μM DMOG（二甲基草酰甘氨酸）处理24小时。用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度。取30 μg等量蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜。膜用5%脱脂牛奶室温封闭1小时，随后与抗HIF-1α、p21、Cyclin D1及β-肌动蛋白（内参）的一抗在4°C孵育过夜。TBST洗涤后，膜与辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗室温孵育1小时，采用增强化学发光（ECL）试剂盒检测蛋白条带，ImageJ软件定量条带灰度值[3] - 大鼠皮层神经元体外缺血（OGD）模型实验：从E18大鼠胚胎分离皮层神经元，在含2% B27添加剂、0.5 mM谷氨酰胺、100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的Neurobasal培养基中，于37°C、5% CO2条件下培养。体外培养7天（DIV 7）后，神经元分为三组：对照组（正常培养基）、单纯OGD组（培养基更换为无糖DMEM，在含95% N2和5% CO2的缺氧培养箱中孵育2小时）、DMOG预处理组（OGD前1小时在正常培养基中加入1 mM DMOG（二甲基草酰甘氨酸））。OGD后，神经元用正常培养基复氧24小时。MTT法检测细胞活力，商品化LDH试剂盒检测LDH释放。自噬标志物检测时，裂解神经元后进行Western blot，测定LC3-II/LC3-I比值和Beclin-1表达，以β-肌动蛋白为内参[5] |
| 动物实验 |
mg DMOG 溶于 0.5 ml 生理盐水；8 mg/只小鼠；腹腔注射
C57BL/6 小鼠 小鼠后肢骨骼肌缺血模型：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄，20-25 g）饲养于受控环境（22±2°C，12 小时光照/黑暗循环）中，可自由摄取食物和水。小鼠用异氟烷麻醉（诱导浓度 2%，维持浓度 1%）。通过大腿腹侧切口暴露右侧股动脉，并用 6-0 丝线在两点结扎（腹股沟韧带近端和股浅动脉分支远端）。切口用 4-0 可吸收缝线缝合。小鼠被随机分为两组：对照组（腹腔注射生理盐水，10 mL/kg）和DMOG组（腹腔注射溶于生理盐水的DMOG，100 mg/kg）。术后立即开始，每48小时注射一次，共注射7次（14天）。第14天，用二氧化碳处死小鼠，取右侧腓肠肌（缺血组织）和左侧腓肠肌（非缺血对照）。组织经4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片（5 μm），并进行CD31免疫组织化学染色。 mRNA分析中，将新鲜肌肉组织匀浆，提取总RNA，用于qPCR检测VEGF和EPO的表达[2] - 高脂血症大鼠心肌缺血再灌注（I/R）和缺血后适应（IPOC）模型：雄性SD大鼠（6周龄，180-200 g）喂食高脂饮食（2%胆固醇，10%猪油，0.2%胆酸，87.8%基础饮食）8周以诱导高脂血症。然后用戊巴比妥钠（40 mg/kg，腹腔注射）麻醉大鼠，插管，并用小动物呼吸机进行通气。在第四肋间隙开胸，并识别左前降支冠状动脉（LAD）。采用5-0丝线结扎左前降支（LAD）诱导心肌缺血（心肌苍白和心电图ST段抬高证实）。缺血30分钟后，进行IPOC（3个循环，每个循环包括10秒再灌注和10秒缺血）。将大鼠随机分为两组：IPOC组（IPOC前10分钟静脉注射生理盐水，5 mL/kg）和DMOG+IPOC组（IPOC前10分钟静脉注射溶于生理盐水的DMOG，20 mg/kg）。再灌注2小时后，经腹主动脉采集血液，并取出心脏。将左心室切成 2 mm 厚的横切片，用 1% TTC 染色（37°C 染色 15 分钟），并使用 ImageJ 软件分析梗死面积（白色区域）。对于 Western blot 和 TUNEL 检测，收集并处理缺血区域的心肌组织 [4]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠腹腔注射DMOG（二甲基草酰甘氨酸）（100 mg/kg）14天的研究中[2]，未观察到明显的体重减轻、行为异常或主要器官（肝脏、肾脏、心脏）的组织病理学改变。然而，这五篇文献[2]均未进行系统的毒性评估（例如，LD50、长期毒性、药物相互作用或血浆蛋白结合）。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
二甲基草酰甘氨酸（DMOG）是一种甘氨酸衍生物，它是N-草酰甘氨酸的羧基与两分子甲醇缩合形成的二酯。它具有神经保护作用，并且是EC 1.14.11.29（缺氧诱导因子-脯氨酸双加氧酶）抑制剂。DMOG是一种甘氨酸衍生物、甲酯和仲酰胺。它在功能上与N-草酰甘氨酸相关。DMOG是一种细胞渗透性脯氨酰4-羟化酶（PHD）的竞争性抑制剂，PHD是介导HIF-1α氧依赖性羟基化的关键酶。DMOG通过抑制PHD，阻止HIF-1α的蛋白酶体降解，从而稳定HIF-1α并使其转位至细胞核。稳定的HIF-1α随后与靶基因（例如VEGF、EPO、GLUT1）启动子区域的缺氧反应元件（HRE）结合，从而调节血管生成、红细胞生成和葡萄糖代谢[1,2,3,4,5]。
- 在鸡胚组织中的研究[1]首次证明DMOG以剂量依赖性和可逆的方式有效抑制内源性PHD活性，为体外研究HIF介导的信号通路提供了基础工具[1]。 - 在小鼠后肢缺血模型[2]中，DMOG诱导的血管生成与VEGF和EPO表达增加相关，表明其具有作为外周动脉疾病（PAD）治疗药物的潜力，PAD中血管生成不足是导致组织缺血的原因之一[2]。 - 在原代血管平滑肌细胞（VSMC）[3]中，DMOG限制细胞增殖。通过 HIF-1α 依赖性上调 p21 促进增殖，表明其在抑制异常血管重塑（例如动脉粥样硬化或血管成形术后的再狭窄）中发挥作用[3] - 在高脂血症大鼠模型中[4]，DMOG 通过稳定 HIF-1α 和减少心肌细胞凋亡增强 IPOC 的心脏保护作用，从而改善了 IPOC 在代谢紊乱（例如高脂血症）中的疗效，并扩大了其临床应用范围[4] - 在体外 OGD 模型中[5]，DMOG 通过诱导自噬（通过 HIF-1α 介导的 Beclin-1 上调）发挥细胞保护作用，揭示了 PHD 抑制剂在促进血管生成之外，对抗缺血性损伤的新机制[5] |
| 分子式 |
C6H9NO5
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|---|---|---|
| 分子量 |
175.14
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| 精确质量 |
175.048
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| CAS号 |
89464-63-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
560326
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
46-48ºC
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| 折射率 |
1.440
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| LogP |
-0.56
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| tPSA |
81.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
200
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
BNJOZDZCRHCODO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C6H9NO5/c1-11-4(8)3-7-5(9)6(10)12-2/h3H2,1-2H3,(H,7,9)
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| 化学名 |
methyl 2-[(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]-2-oxoacetate
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 150 mg/mL (856.46 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7097 mL | 28.5486 mL | 57.0972 mL | |
| 5 mM | 1.1419 mL | 5.7097 mL | 11.4194 mL | |
| 10 mM | 0.5710 mL | 2.8549 mL | 5.7097 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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