| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EPAC2 ( IC50 = 0.43 μM )
EPAC2 (Exchange protein directly activated by cAMP 2) antagonist (IC50: 0.43 ± 0.05 μM for EPAC2 GEF activity inhibition). [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
ESI-05 (0.01 μM-1 nM) 抑制 cAMP 介导的 EPAC2 GEF 活性，IC50 为 0.43 μM，但对抑制 EPAC1 GEF 活性完全空白[1]。 ESI-05 (1、5、10 和 25 μM；5 Western Blot Analysis[1] Cell Line: HEK293 cells Concentration: 1, 5, 10, and 25 μM Incubation Time: 5 min 结果: 导致剂量依赖性。 EPAC 选择性 cAMP 类似物 (007-AM) 诱导 Rap1 激活的减少。
ESI-05 在生化实验中抑制 cAMP 介导的 EPAC2 鸟嘌呤核苷酸交换因子活性，其表观 IC50 为 0.43 ± 0.05 μM。[1] 在使用 8-NBD-cAMP 的竞争结合实验中，ESI-05 与荧光 cAMP 类似物竞争结合纯化的 EPAC2 蛋白，其表观 IC50 为 0.4 ± 0.1 μM，亲和力约为 cAMP（IC50 ~40 μM）的 100 倍。[1] ESI-05 (25 μM) 在 100 μM cAMP 存在或不存在的情况下，均未显著改变 I 型或 II 型蛋白激酶 A 全酶的活性，而选择性 PKA 抑制剂 H89 则完全阻断了 PKA 活性。[1] 在稳定表达全长 EPAC2 的 HEK293 细胞中，用 ESI-05 (1, 5, 10, 25 μM) 预处理可剂量依赖性地减少 EPAC 选择性 cAMP 类似物 007-AM 诱导的 Rap1 活化。单独使用 ESI-05 (25 μM) 对基础 Rap1 活化无影响。[1] 在稳定表达基于 EPAC2 的 FRET 传感器（EPAC2-FL）的 HEK293 细胞中，ESI-05 (10 μM) 完全阻断了由 3 μM 007-AM 诱导的 FRET 降低（指示 EPAC2 激活）。[1] 在活细胞成像实验中，ESI-05 (10 μM) 也阻断了由 cAMP 升高剂 forskolin 和 isobutylmethylxanthine 诱导的 EPAC2-FL FRET 传感器激活。[1] ESI-05 (10 μM) 未能阻断基于 EPAC1 的 FRET 传感器（EPAC1-FL 或 EPAC1-camps）对 007-AM 或 forskolin/isobutylmethylxanthine 的响应激活。[1] ESI-05 未抑制基于 PKA 的 FRET 传感器（AKAR3）对 8-Br-cAMP 的响应激活。[1] 氘交换质谱分析表明，结构相关的化合物 ESI-07（可推论至 ESI-05）结合于 EPAC2 的两个 cAMP 结合结构域之间的界面，稳定其自抑制构象。该结合位点在只含一个 CBD 的 EPAC1 中不存在，这解释了其亚型特异性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
ESI-05 (2、4 和 8 mg/kg) 在体内通过抑制 p38/BIM 减少神经细胞[2]。 动物模型：颅内出血（ICH）模型[2] 剂量：2、4、8 mg/kg 给药： 结果：皮质神经细胞凋亡率降低，磷酸化 p38、Bcl-2like 蛋白 11 (BIM) 和 caspase-3 蛋白表达相应降低。
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| 酶活实验 |
初级高通量筛选实验：建立了一种基于荧光的检测方法，其中荧光 cAMP 类似物 8-NBD-cAMP 与纯化的全长 EPAC2 蛋白结合会导致荧光显著增加。该实验在 384 孔板中进行，用于筛选化合物库中能竞争性结合 8-NBD-cAMP 并抑制 EPAC2 活性的化合物。[1]
次级生化 GEF 活性实验：测量纯化的重组全长 EPAC1 或 EPAC2 蛋白的鸟嘌呤核苷酸交换因子活性。该实验监测预载有荧光 GDP 类似物（MantGDP）的 Rap1 蛋白在 cAMP 和测试化合物存在下与未标记的 GDP 交换时荧光强度的降低。通过将动力学曲线拟合为单指数衰减来计算反应速率，以确定抑制效力（IC50）。[1] 竞争结合实验：评估化合物与 8-NBD-cAMP 竞争结合纯化 EPAC2 的能力。将不同浓度的测试化合物或未标记的 cAMP 加入到固定浓度的 EPAC2 和 8-NBD-cAMP 混合体系中。监测 8-NBD-cAMP 荧光的剂量依赖性降低，以确定竞争性结合的表观 IC50。[1] PKA 反向筛选实验：使用偶联酶法分光光度法测量重建的 I 型和 II 型 PKA 全酶的激酶活性。使用合成肽底物（Kemptide）。该实验在 96 孔板中进行，以确定测试化合物在 cAMP 存在或不存在的情况下是否影响 PKA 活性。[1] |
| 细胞实验 |
细胞系：HEK293 细胞
浓度：1、5、10 和 25 μM 孵育时间：5 分钟 结果：导致 EPAC 选择性 cAMP 类似物 (007-AM ）诱导 Rap1 激活。 细胞 Rap1 活化实验（Pull-down）：将稳定表达全长人 EPAC1 或小鼠 EPAC2 的 HEK293 细胞进行血清饥饿处理，用 ESI-05 或溶剂预处理，然后用 EPAC 选择性激动剂 007-AM 刺激。使用 Ral-GDS-RBD-GST 亲和珠对细胞裂解液进行下拉实验，分离 GTP 结合的 Rap1（Rap1GTP）。通过 Rap1 特异性抗体进行免疫印迹检测 Rap1GTP 和总细胞 Rap1 的水平。[1] 基于 FRET 的细胞活化实验：使用稳定表达基因编码的 FRET 生物传感器（EPAC1-FL、EPAC2-FL、EPAC1-camps 或 AKAR3）的 HEK293 细胞。对于 EPAC 传感器（EPAC1/2-FL, EPAC1-camps），激动剂（如 007-AM, forskolin/isobutylmethylxanthine）激活会导致 FRET 降低，表现为 CFP/YFP 发射比（485/535 nm）升高。对于 PKA 传感器（AKAR3），激活会导致 FRET 增加，表现为发射比降低。将细胞接种于 96 孔板中，使用酶标仪或活细胞成像实时监测 FRET 变化。使用 ESI-05 预处理来评估其阻断激动剂诱导的传感器激活的能力。[1] |
| 动物实验 |
Intracranial hemorrhage (ICH) model
2, 4, and 8 mg/kg |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ESI-05 is a non-cyclic nucleotide small molecule identified as an EPAC2-specific antagonist. [1]
It was discovered through a high-throughput screen of a drug-like compound library using a fluorescence-based assay targeting EPAC2. [1] The proposed mechanism of action involves binding to an allosteric site at the interface of the two cAMP-binding domains (CBD-A and CBD-B) unique to the EPAC2 isoform, thereby locking the protein in its inactive, autoinhibited conformation. This explains its exclusive specificity for EPAC2 over EPAC1. [1] ESI-05 (along with ESI-07) represents the first reported isoform-specific pharmacological probes for EPAC proteins, providing valuable tools to dissect the distinct biological functions of EPAC1 and EPAC2. [1] |
| 分子式 |
C16H18O2S
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|---|---|
| 分子量 |
274.37792
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| 精确质量 |
274.103
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| 元素分析 |
C, 70.04; H, 6.61; O, 11.66; S, 11.68
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| CAS号 |
5184-64-5
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| PubChem CID |
272513
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.129g/cm3
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| 沸点 |
426.7ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
250ºC
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| 折射率 |
1.562
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| LogP |
4.833
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| tPSA |
42.52
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
376
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=CC=C(C=C1)S(=O)(=O)C2=C(C=C(C=C2C)C)C
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| InChi Key |
CGPHOZWFSFNOEQ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H18O2S/c1-11-5-7-15(8-6-11)19(17,18)16-13(3)9-12(2)10-14(16)4/h5-10H,1-4H3
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| 化学名 |
1,3,5-trimethyl-2-(4-methylphenyl)sulfonylbenzene
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| 别名 |
ESI-05; NSC-116966; ESI05; NSC116966; ESI 05; NSC 116966
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50~55 mg/mL (182.2~200.5 mM)
Ethanol: ~55 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.6446 mL | 18.2229 mL | 36.4458 mL | |
| 5 mM | 0.7289 mL | 3.6446 mL | 7.2892 mL | |
| 10 mM | 0.3645 mL | 1.8223 mL | 3.6446 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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