| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Akt
GSK2110183 analog HCl targets the serine/threonine protein kinase Akt (protein kinase B), specifically the Akt1, Akt2, and Akt3 isoforms. It is a potent inhibitor with Ki values of 0.08 nM for Akt1, 2 nM for Akt2, and 2.6 nM for Akt3. It acts as an ATP-competitive inhibitor. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
激酶活性测定：测定化合物对 Akt 酶的抑制效力。由于 GSK2110183 和 GSK2141795 是 Akt 三种亚型的高效抑制剂，因此首先在低酶浓度（0.1 nM Akt1、0.7 nM Akt2 和 0.2 nM Akt3）下，使用滤膜结合法测定抑制剂的真实抑制效力 (Ki)，然后通过进程曲线分析进行验证。在滤膜结合法中，将酶和抑制剂的预混合物孵育 1 小时，然后加入 GSKα 肽（Ac-KKGGRARTSSFAEPG-酰胺）和 [γ33P] ATP。反应 2 小时后终止，并将放射性标记的 Akt 肽产物捕获在磷酸纤维素滤板上。进程曲线分析采用Sox-Akt-tide底物（Ac-ARKRERAYSF-d-Pro-Sox-Gly-NH2）进行产物生成的连续实时荧光检测。
细胞实验：使用CellTiter-Glo进行为期3天的增殖实验，以测量化合物在0-30 μM浓度下的生长抑制率。细胞生长以未处理（DMSO）对照组为参照进行测定。EC50值通过Assay Client应用程序中的4参数或6参数拟合算法，根据抑制曲线计算得出。所用细胞：血液细胞系和实体瘤细胞系。 Afuresertib抑制E17K AKT1突变蛋白的激酶活性，EC50值为0.2 nM。阿弗瑞替尼对多种 AKT 底物磷酸化水平表现出浓度依赖性效应，包括 GSK3β、PRAS40、FOXO 和 Caspase 9。总体而言，65% 的血液细胞系对阿弗瑞替尼敏感（EC50 < 1 μM）。在测试的实体瘤细胞系中，21% 的细胞系对阿弗瑞替尼的 EC50 < 1 μM。体外实验表明，GSK2110183 类似物 HCl 能有效抑制 Akt 激酶活性，对 Akt1、Akt2 和 Akt3 的 Ki 值分别为 0.08 nM、2 nM 和 2.6 nM。它抑制 Akt 底物（如 GSK3β、PRAS40、FOXO 和 Caspase 9）的磷酸化。在细胞增殖试验中，它在 65% 的血液细胞系中显示出 EC₅₀ 值 <1 μM。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
携带BT474乳腺肿瘤异种移植瘤的小鼠分别口服给予赋形剂或GSK2110183（剂量分别为10、30或100 mg/kg/天），持续21天，肿瘤生长抑制率（TGI）分别为8%、37%和61%。小鼠对GSK2110183耐受性良好，给药5天后体重下降1-3%，并在研究过程中逐渐恢复。研究人员还探索了其他具有Akt通路激活的肿瘤异种移植瘤模型，以进一步验证该化合物的疗效。用10、30和100 mg/kg GSK2110183治疗的小鼠，其SKOV3异种移植瘤的TGI分别为23%、37%和97%。体内实验表明，该化合物在异种移植瘤模型中具有抗肿瘤活性。作为一种强效的Akt抑制剂，它能够抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡。该化合物已被研究用于治疗多种癌症，包括血液系统恶性肿瘤和实体瘤。该化合物具有口服生物利用度。
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| 酶活实验 |
激酶活性测定[1]
化合物对AKT酶的抑制效力按先前所述方法测定。由于GSK2110183和GSK2141795是AKT三种亚型的高效抑制剂，因此首先在低酶浓度（0.1 nM AKT1、0.7 nM AKT2和0.2 nM AKT3）下，使用滤膜结合法测定抑制剂的真实效力（Ki*），然后通过进程曲线分析进行验证。在滤膜结合法中，将酶和抑制剂的预混合物孵育1小时，然后加入GSKα肽（Ac-KKGGRARTSSFAEPG-酰胺）和[γ33P]ATP。反应2小时后终止，并将放射性标记的AKT肽产物捕获在磷酸纤维素滤板上。利用 Sox-AKT-tide 底物 (Ac-ARKRERAYSF-d-Pro-Sox-Gly-NH2) 进行连续实时荧光检测，分析了反应进程曲线。[1] GSK2110183 和 GSK2141795 针对多种激酶活性进行了测试。首先，在所有可用的激酶活性测试中，以 0.5 µM 和 10 µM 的浓度测试了这些化合物，随后针对部分在 0.5 µM 浓度下表现出强抑制作用的酶（这些酶没有内部测试方法）绘制了完整的 IC50 曲线。 GSK2110183 类似物 HCl 的体外激酶活性测试用于测定其对 Akt 酶的抑制效力。在低酶浓度（0.1 nM Akt1、0.7 nM Akt2 和 0.2 nM Akt3）下，采用滤膜结合法进行测试。将酶和抑制剂的预混合物孵育 1 小时，然后加入肽底物和 [γ³³P] ATP。反应 2 小时后终止，并捕获放射性标记产物。 |
| 细胞实验 |
细胞凋亡检测[2]
按照先前描述的方法25，通过基于AxV-FITC/PI双染的FACS分析评估细胞凋亡。简而言之，将ACC-MESO-4和MSTO-211H细胞接种于六孔板中（细胞密度为1 × 105个细胞/孔），并在37°C下孵育24小时。然后，将细胞与指定浓度的afuresertib孵育，随后在室温下与AxV-FITC和PI（10 μg/mL）孵育15分钟。使用FACSCantoII流式细胞仪测定荧光强度。 细胞周期分析[2] 按照先前描述的方法26，通过基于PI染色的FACS分析评估细胞周期。将ACC-MESO-4和MSTO-211H细胞接种于六孔培养板中（细胞密度为1 × 105个细胞/孔），并培养24小时。随后，将细胞与指定浓度的afuresertib孵育24小时。进行FACS分析时，在血清处理24小时后，使用胰蛋白酶消化细胞，并在冰冷的70%乙醇中固定过夜。固定后，用RNase A（100 μg/mL）处理细胞，并用PI（10 μg/mL）染色。使用FlowJo软件测量细胞周期中亚G1期、G1期、S期和G2-M期细胞的百分比。 使用 CellTiter-Glo 进行为期 3 天的增殖试验，以测定化合物在 0-30 μM 浓度下的生长抑制作用。细胞生长速率与未处理（DMSO）对照组进行比较。在 Assay Client 应用程序中，使用 4 参数或 6 参数拟合算法，根据抑制曲线计算 EC50 值。[1] GSK2110183 类似物 HCl 的体外细胞试验采用 CellTiter-Glo 进行为期 3 天的增殖试验。细胞用 0-30 µM 的化合物处理，并测定其相对于未处理对照组的生长情况。EC₅₀ 值根据抑制曲线计算。使用血液学和实体瘤细胞系。该化合物对 Akt 底物磷酸化表现出浓度依赖性效应。 |
| 动物实验 |
溶于 20% 聚乙二醇 (PEG) 400/1% DMSO；10、30 或 100 mg/kg；口服
携带 BT474 乳腺肿瘤异种移植的小鼠 携带 SKOV3 或 BT474 肿瘤的雌性无胸腺裸鼠和 SCID 小鼠[1] 100 mg/kg 口服 体内异种移植实验[1] 将细胞（SKOV3、CAPAN-2 和 HPAC）或肿瘤碎片（BT474）皮下注射到 6-8 周龄的雌性无胸腺裸鼠（SKOV3）和 SCID 小鼠（其他所有小鼠）体内，诱导肿瘤形成。当肿瘤体积达到 120 至 300 mm³ 时，根据肿瘤体积将小鼠随机分组，每组 n = 7-10 只小鼠。 GSK2110183 和 GSK2141795 每日以不同剂量通过灌胃给药。在联合用药实验中，GSK1120212 也每日通过灌胃给药。每周测量两次肿瘤体积和体重，肿瘤体积使用游标卡尺测量，并使用以下公式计算：肿瘤体积 (mm³) = (长度 × 宽度)²/2。结果以给药结束时的抑制率表示 = 100 × [1 - 药物治疗组平均生长量 / 载体对照组平均生长量]。[1] 体内剂量反应药效学分析[1] 携带 BT474 肿瘤异种移植瘤的 SCID 小鼠在末次给药后 2 小时收集组织前，每日分别接受载体、GSK2110183 或 GSK2141795 治疗 7 天。根据上述方法，使用磷酸化 PRAS40 ELISA 分析蛋白裂解物。采用乙腈蛋白沉淀法分析组织和血液中测试化合物的浓度，然后使用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC/MS/MS）进行分析，电离方式为正离子大气压化学电离或Turbo离子喷雾电离。化合物的最低检测限为10 ng/mL，检测范围在100倍至1000倍药物浓度范围内呈线性关系。 已在多种癌症的异种移植模型中进行了GSK2110183类似物盐酸盐的体内动物实验。动物经口服给药后，测量肿瘤生长抑制情况。评估肿瘤组织中Akt磷酸化等药效学标志物。评价该化合物的抗肿瘤疗效和耐受性。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于 GSK2110183 类似物盐酸盐仍处于研究阶段，其毒理学数据有限。在标准的临床前安全性评估中，将对其潜在的脱靶效应和一般毒性进行评估。该化合物仅供研究使用，不得用于人类治疗。
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| 参考文献 |
:Cancer Chemother Pharmacol.2015 Jan;75(1):183-9;Blood.2014Oct 2;124(14):2162-3.
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| 其他信息 |
GSK2110183类似物盐酸盐是一种用于研究Akt在癌症生物学中作用的研究工具。它是临床阶段Akt抑制剂afuresertib的类似物。它已被用于研究PI3K/Akt信号通路及其在肿瘤细胞增殖和凋亡中的作用。目前尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C18H17CL3F2N4OS
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|---|---|
| 分子量 |
481.774586439133
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| 精确质量 |
480.015
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| 元素分析 |
C, 44.88; H, 3.56; Cl, 22.07; F, 7.89; N, 11.63; O, 3.32; S, 6.65
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| CAS号 |
2070009-64-0
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| 相关CAS号 |
GSK2110183 analog 1;1047634-63-8; GSK2110183 analog 1 hydrochloride;2070009-64-0; 1047644-62-1 ; 1047645-82-8 (HCl);
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| PubChem CID |
92044396
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
101Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
552
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CN1C(=C(C=N1)Cl)C2=C(SC(=C2)C(=O)N[C@@H](CC3=CC(=C(C=C3)F)F)CN)Cl.Cl
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| InChi Key |
BCVQLTLODHPIJM-PPHPATTJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H16Cl2F2N4OS.ClH/c1-26-16(12(19)8-24-26)11-6-15(28-17(11)20)18(27)25-10(7-23)4-9-2-3-13(21)14(22)5-9;/h2-3,5-6,8,10H,4,7,23H2,1H3,(H,25,27);1H/t10-;/m0./s1
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| 化学名 |
N-[(2S)-1-Amino-3-(3,4-difluorophenyl)propan-2-yl]-5-chloro-4-(4-chloro-2-methylpyrazol-3-yl)thiophene-2-carboxamide hydrochloride
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| 别名 |
Afuresertib-F hydrochloride; Afuresertib-F; GSK2110183-analog; GSK-2110183-analog; GSK 2110183-analog; Afuresertib-F HCl
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0757 mL | 10.3784 mL | 20.7568 mL | |
| 5 mM | 0.4151 mL | 2.0757 mL | 4.1514 mL | |
| 10 mM | 0.2076 mL | 1.0378 mL | 2.0757 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Status | Interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01445587 | Withdrawn | Drug: Part 1; Cohort 1 Drug: Part 1; Cohort 2 |
Cancer | GlaxoSmithKline | November 2011 | Phase 2 |
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
