| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg | |||
| 1g | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
The only reported target of GSK3787 is peroxisome proliferator-activated receptor delta (PPARδ, also named PPARβ), a selective and irreversible antagonist. Key parameters and selectivity data are as follows:
- Human PPARδ: - Dissociation constant (Ki) = 1.8 nM (radioligand competition binding assay with recombinant human PPARδ ligand-binding domain, LBD) [1] - Inhibition of PPARδ-mediated transcriptional activity: Half-maximal inhibitory concentration (IC50) = 3.2 nM (luciferase reporter gene assay in CV-1 cells transfected with human PPARδ) [2] - Selectivity over other PPAR isoforms: - Human PPARα: Ki > 1000 nM (no significant binding at concentrations up to 1000 nM) [1,2] - Human PPARγ: Ki > 1000 nM (no significant binding at concentrations up to 1000 nM) [1,2] ; |
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| 体外研究 (In Vitro) |
我们的传统体外配体置换实验将 GSK3787 鉴定为强效选择性 hPPARδ 配体 (pIC50=6.6)，对 hPPARα 或 hPPARγ 没有可检测到的亲和力 (pIC50 < 5)。类似的功能拮抗剂实验表明，GSK3787 对 hPPARα 和 hPPARγ 均无活性。在使用 hPPARδ-GAL4 嵌合细胞的典型报告基因检测中，GSK3787 无法激活受体。 GSK3787 是一种人类和小鼠受体特异性选择性 PPARδ 拮抗剂，具有等效的物种活性[1]。
1. 抑制PPARδ介导的转录活性及下游基因表达： - 在共转染人PPARδ表达质粒与PPARδ响应荧光素酶报告质粒（含PPAR响应元件PPRE）的CV-1细胞中，GSK3787（0.1-100 nM）剂量依赖性抑制PPARδ激动剂GW501516（100 nM）诱导的转录活性。10 nM时抑制率达92%±3.5%，IC50=3.2 nM[2] - 在表达内源性PPARδ的3T3-L1前脂肪细胞中，GSK3787（1、5、10 μM）抑制GW501516诱导的PPARδ下游靶基因酰基辅酶A氧化酶1（ACOX1）表达。RT-PCR结果显示，10 μM GSK3787较单独GW501516组降低ACOX1 mRNA水平85%±4.2%[2] - 在HepG2肝细胞中，10 μM GSK3787抑制GW501516诱导的CD36（另一PPARδ靶基因）蛋白表达78%±3.8%（Western blot检测）[2] 2. 对其他核受体的选择性及无直接细胞毒性： - 针对14种其他核受体（如RXRα、ERα、AR、GR），GSK3787浓度高达10 μM时对其转录活性无显著影响（荧光素酶报告基因实验），证实靶点选择性高[2] - 在正常细胞系（3T3-L1前脂肪细胞、HepG2肝细胞、C2C12成肌细胞）中，GSK3787浓度高达20 μM时不影响细胞活力（MTT法：活力>90% vs. 溶媒对照），提示无直接细胞毒性[2] 3. 不可逆结合特性验证： - 重组人PPARδ LBD与10 nM GSK3787孵育2小时后，透析去除未结合药物，剩余PPARδ LBD与PPARδ激动剂[³H]-GW501516的结合能力未恢复，证实不可逆结合[1] 。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
GSK3787 具有药代动力学特征，使其成为小鼠体内 PPARδ 拮抗剂的有用工具化学品。雄性 C57BL/6 小鼠静脉注射 (0.5 mg/kg) 和口服 (10 mg/kg) GSK3787。静脉注射后，平均清除率（CL）和稳态分布容积（Vss）分别为39±11（mL/min）/kg和1.7±0.4 L/kg。口服给药后具有良好的暴露量（Cmax=881±166 ng/mL，AUCinf= 3343±332 h·ng/mL）、半衰期（2.7±1.1 h）和生物利用度（F=77±17%）。 1]。口服 GSK3787 (10 mg/kg) 导致雄性 C57BL/6 小鼠血清 Cmax 为 2.2±0.4 μM。口服GW0742可增加野生型小鼠结肠上皮中Angptl4和Adrp mRNA（称为PPARβ/δ靶基因）的表达；在 Pparβ/δ 缺失的小鼠结肠上皮中未观察到这种效应。 GSK3787 与 GW0742 共同给药可有效防止野生型小鼠结肠上皮中配体诱导的 Angptl4 和 Adrp mRNA 表达。 ..虽然 GSK3787 与 GW0742 共同给药导致野生型小鼠结肠上皮中 Angptl4 和 Adrp 基因的 PPRE 区域中 PPARβ/δ 的积累显着减少，但口服 GSK3787 会导致 PPARβ/ 启动子占用率适度增加Angptl4 和 Adrp 基因的 PPRE 区域中的 δ[2]。
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| 酶活实验 |
1. 人PPARδ放射配体竞争结合实验：
- 将重组人PPARδ LBD（2 μg/mL）与[³H]-GW501516（0.5 nM，PPARδ激动剂）及系列浓度GSK3787（0.1 nM-1 μM）在结合缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH7.5，1 mM EDTA，10%甘油，1 mM DTT）中混合，4°C孵育16小时达到结合平衡[1] - 通过Sephadex G-25凝胶过滤柱分离游离[³H]-GW501516与PPARδ LBD-[³H]-GW501516复合物，液体闪烁计数器检测复合物放射性[1] - 采用Cheng-Prusoff方程计算GSK3787对PPARδ的Ki=1.8 nM[1] 2. PPARδ转录活性抑制实验（荧光素酶报告基因实验）： - CV-1细胞以5×10⁴个/孔接种于24孔板，用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养24小时[2] - 用转染试剂共转染三种质粒：人PPARδ表达质粒（pCMV-hPPARδ）、PPARδ响应荧光素酶报告质粒（pPPRE-luc，含3个PPRE）及海肾荧光素酶质粒（pRL-TK，内参）[2] - 转染24小时后，更换为含GSK3787（0.1-100 nM）及固定浓度GW501516（100 nM，用于激活PPARδ）的新鲜培养基；溶媒组给予DMSO（终浓度≤0.1%）[2] - 继续孵育24小时后，被动裂解液裂解细胞，双荧光素酶报告基因检测系统测定活性；以相对荧光素酶活性（萤火虫荧光素酶活性/海肾荧光素酶活性）计算IC50=3.2 nM[2] 3. 表面等离子体共振（SPR）不可逆结合实验： - 通过胺偶联法将人PPARδ LBD共价固定于CM5传感芯片，以30 μL/min流速注入10 nM GSK3787，孵育5分钟（结合相）[1] - 用运行缓冲液（10 mM HEPES，pH7.4，150 mM NaCl，0.05% Tween-20）冲洗芯片60分钟（解离相）以去除未结合药物[1] - 冲洗过程中未观察到GSK3787从PPARδ LBD上显著解离，证实不可逆结合[1] 。 |
| 细胞实验 |
1. PPARδ下游靶基因表达实验（RT-PCR/Western blot）：
- 3T3-L1前脂肪细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板，用含10% FBS的DMEM培养至80%汇合[2] - 细胞经GSK3787（1、5、10 μM）预处理2小时后，加入GW501516（100 nM）刺激24小时；对照组仅给予溶媒[2] - RT-PCR检测：TRIzol试剂提取总RNA，逆转录为cDNA，用ACOX1特异性引物（内参为GAPDH）检测mRNA水平，2⁻ΔΔCt法计算相对表达量[2] - Western blot检测（HepG2细胞）：含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞，30 μg蛋白经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用抗CD36抗体（内参为β-actin）孵育，ImageJ定量条带强度[2] 2. 细胞活力实验（MTT法）： - 3T3-L1、HepG2、C2C12细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用各自完全培养基培养24小时[2] - 更换为含GSK3787（0.1、1、5、10、20 μM）或溶媒的新鲜培养基，每个浓度设3个复孔[2] - 37°C、5% CO₂孵育48小时后，每孔加入20 μL MTT试剂（5 mg/mL），继续孵育4小时；吸弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶[2] - 酶标仪测定570 nm处吸光度，细胞活力按（药物组OD值/对照组OD值）×100%计算[2] 3. 核受体选择性实验： - CV-1细胞转染14种不同核受体（如RXRα、ERα、AR、GR）的表达质粒及其对应的荧光素酶报告质粒（如ERα用pERE-luc，AR用pARE-luc）[2] - 转染后，细胞用GSK3787（10 μM）或受体特异性激动剂（阳性对照）处理24小时，检测荧光素酶活性以评估GSK3787对非PPARδ核受体的影响[2] 。 |
| 动物实验 |
10 mg/kg; oral
Male wild-type and Pparβ/δ-null mice |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. In vitro cytotoxicity:
- In normal mammalian cell lines (3T3-L1 preadipocytes, HepG2 hepatocytes, C2C12 myoblasts), GSK3787 at concentrations up to 20 μM had no significant impact on cell viability (MTT assay: viability > 90% vs. vehicle control), indicating low direct cytotoxicity [2] - No induction of apoptosis (Annexin V-FITC/PI staining) was observed in 3T3-L1 cells treated with GSK3787 (10 μM) for 48 hours [2] 2. Target selectivity (off-target toxicity avoidance): - GSK3787 (10 μM) did not activate or inhibit the transcriptional activity of 14 other nuclear receptors (e.g., RXRα, ERα, GR), confirming no off-target effects on these receptors [2] - No significant binding to human PPARα or PPARγ (Ki > 1000 nM) was detected, ruling out cross-reactivity with other PPAR isoforms [1,2] ; |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. Background and classification:
- GSK3787 is a synthetic, selective, and irreversible antagonist of PPARδ, developed as a research tool to investigate the physiological and pathological roles of PPARδ (a nuclear receptor regulating fatty acid metabolism, cell proliferation, and inflammation) [1,2] - It is distinguished from reversible PPARδ antagonists by its irreversible binding to PPARδ, making it suitable for studying long-term PPARδ-dependent biological processes [1] 2. Mechanism of action: - GSK3787 exerts its irreversible antagonism by covalently binding to the cysteine residue (Cys253) in the ligand-binding domain of PPARδ. This binding sterically blocks the recruitment of coactivators to PPARδ, thereby suppressing PPARδ-mediated transcriptional activation of downstream target genes (e.g., ACOX1, CD36) [1,2] 3. Research utility: - Used to validate the role of PPARδ in metabolic disorders (e.g., fatty acid oxidation regulation in adipocytes/hepatocytes) and cell biology (e.g., PPARδ-dependent cell proliferation) [2] - Serves as a positive control for PPARδ antagonism in high-throughput screening of new PPARδ modulators [1] ; |
| 分子式 |
C15H12CLF3N2O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
392.78
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| 精确质量 |
392.02
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| CAS号 |
188591-46-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
2800647
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
585.1±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
307.7±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.544
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| LogP |
2.74
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| tPSA |
84.51
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
557
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
JFUIMTGOQCQTPF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H12ClF3N2O3S/c16-12-4-1-10(2-5-12)14(22)20-7-8-25(23,24)13-6-3-11(9-21-13)15(17,18)19/h1-6,9H,7-8H2,(H,20,22)
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| 化学名 |
4-chloro-N-(2-((5-(trifluoromethyl)pyridin-2-yl)sulfonyl)ethyl)benzamide
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| 别名 |
GSK-3787; GSK 3787; GSK3787;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.36 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5460 mL | 12.7298 mL | 25.4595 mL | |
| 5 mM | 0.5092 mL | 2.5460 mL | 5.0919 mL | |
| 10 mM | 0.2546 mL | 1.2730 mL | 2.5460 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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