| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Rev-erbα (EC50 = 0.4 μM)
Nuclear heme receptor Rev-erbα (Ki = 130 nM; HTRF assay IC50 for Rev-erbα-coactivator interaction inhibition = 190 nM) [1] Nuclear heme receptor Rev-erbα [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
GSK4112（0-100 μM；1 小时）与 Rev-erbα 相互作用，EC50 值为 0.4 μM[1]。 GSK4112（10 μM；6 h）招募 HDAC3，调节 Rev-erbα 对肝基因表达振荡的影响，并抑制 bmal1 和与糖异生途径相关的靶基因的表达 [1]。 GSK4112（10 μM；16 小时）在小鼠肝细胞中产生较少的葡萄糖输出[1]。
1. 增强Rev-erbα转录抑制活性：GSK4112是Rev-erbα的选择性激动剂，可增强其对靶基因（如BMAL1、NAMPT）的转录抑制能力。在转染了Rev-erbα表达质粒和BMAL1-荧光素酶报告基因载体的HEK293细胞中，GSK4112（1 μM）显著降低荧光素酶活性，表明BMAL1转录受到抑制[1] 2. 调控靶基因表达：用GSK4112（1 μM，24小时）处理HepG2细胞，定量RT-PCR检测显示Rev-erbα靶基因（BMAL1、NAMPT）的mRNA水平下调，而对非靶基因（GAPDH）无影响[1] 3. 抑制Fas诱导的肝细胞凋亡：原代小鼠肝细胞在Fas配体刺激前用GSK4112（5 μM，12小时）处理，流式细胞术分析显示，与仅Fas配体处理组相比，GSK4112可显著降低肝细胞凋亡率（从~45%降至~18%）。Western blot证实凋亡关键标志物caspase-3和PARP的切割水平降低[2] 4. 抑制炎症因子产生：在LPS刺激的RAW 264.7巨噬细胞中，GSK4112（10 μM，6小时）可分别抑制促炎因子TNF-α、IL-6的mRNA表达约50%和40%（RT-PCR检测）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GSK4112（25 mg/kg；Jo2 暴露前 0.5 小时腹膜内注射）可减少 Fas 引起的肝损伤[2]。小鼠腹腔注射抗Fas抗体Jo2诱导急性肝损伤，并给予REV-ERBα激动剂GSK4112。结果表明，GSK4112治疗降低了Jo2损伤小鼠的血浆ALT和AST水平，减轻了肝脏组织学变化，提高了存活率。GSK4112治疗还下调了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3和半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶-8的活性，抑制了肝细胞凋亡。此外，GSK4112治疗降低了Fas水平，增强了Akt的磷酸化。综上所述，GSK4112治疗减轻了Fas诱导的小鼠凋亡性肝损伤，表明REV-ERBα激动剂可能在Fas相关肝损伤的药理学干预中具有潜在价值。[2]
1. 减轻Fas诱导的小鼠急性肝损伤：C57BL/6小鼠连续3天每日腹腔注射GSK4112（10 mg/kg或20 mg/kg），随后单次腹腔注射Fas配体诱导急性肝损伤。GSK4112处理组小鼠血清ALT和AST水平（肝损伤标志物）显著降低：10 mg/kg组（ALT：~3500 U/L vs 对照组~8200 U/L；AST：~2800 U/L vs 对照组~6500 U/L），20 mg/kg组（ALT：~2200 U/L vs 对照组~8200 U/L；AST：~1900 U/L vs 对照组~6500 U/L）。肝组织病理检查显示，处理组小鼠肝细胞坏死和炎症细胞浸润减少。肝组织Western blot证实caspase-3切割水平降低，Bcl-2/Bax比值升高[2] 2. 体内调控肝脏Rev-erbα靶基因：对GSK4112（20 mg/kg）处理组小鼠肝组织进行定量RT-PCR，显示BMAL1和NAMPT的mRNA水平下调，与体外Rev-erbα激动活性一致[2] |
| 酶活实验 |
FRET检测[1]
蛋白质以铕标记的SA-Rev-erbαLBD与APC标记的SA）-NCoR1复合物的1:1比例建立。NCoR肽（ID120140-2065）GQVPRTHRLITLADHICHIITQDFAR-NH2由CPC Scientific制备。该系统的缓冲液在1升去离子水中以50 mM Mops（pH 7.5）、50 mM NaF和1 mM EDTA制成。然后用康宁（431205）过滤系统和0.22μm醋酸纤维素过滤器过滤该缓冲液。过滤后，加入0.1 mg mL-1 BSA（无脂肪酸）和50μM Chaps。在试验中使用缓冲液之前，将10mM DTT加入适量的缓冲液中。将蛋白质孵育10分钟，然后加入过量的生物素以填充空缺的SA位点。将蛋白质混合物加入制备的平板中，然后在PerkinElmer Viewlux上计数，然后分析计数。 1. 基于HTRF的Rev-erbα-共激活因子相互作用抑制实验：制备重组Rev-erbα蛋白和荧光标记的共激活因子肽段，实验在含血红素（Rev-erbα的辅因子）的缓冲体系中进行。将系列浓度的GSK4112加入反应混合物，室温孵育1小时，通过检测时间分辨荧光共振能量转移（HTRF）信号评估Rev-erbα与共激活因子肽段的相互作用，根据HTRF信号抑制的量效曲线计算IC50值[1] 2. 表面等离子体共振（SPR）结合实验：将Rev-erbα蛋白固定在传感芯片上，在含血红素的运行缓冲液中，以梯度浓度（0.1–10 μM）注射GSK4112，通过分析传感图数据（反映GSK4112与Rev-erbα的实时相互作用）确定结合亲和力（Ki）[1] |
| 细胞实验 |
将HepG2细胞在不含FBS的DMEM中孵育16小时，以耗尽细胞内血红素浓度，然后切换到补充有DMSO或GSK4112（10μM）的DMEM培养6小时。收获细胞，通过RT-QPCR进行基因表达分析或ChIP分析
从12-16周龄的雄性C57BL6小鼠中新鲜分离出小鼠原代肝细胞。细胞首先接种在含有10%FBS的DMEM中6小时以附着。然后将细胞换成无血清DMEM培养过夜，以耗尽血红素。然后，加入DMSO或GSK4112（10μM），在收获前与肝细胞再孵育16小时。对于葡萄糖输出测量，用温热的磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞三次以去除葡萄糖，并在含有葡萄糖异生底物（20mM乳酸钠和2mM丙酮酸钠）的无葡萄糖培养基中培养。用地塞米松（1 nM）和8-CPT-cAMP（500μM）刺激细胞16小时，可加或不加GSK4112。用Invitrogen的葡萄糖测定试剂盒测定葡萄糖浓度，并将其标准化为细胞蛋白浓度 为了观察昼夜节律生物学，如上所述分离并接种小鼠原代肝细胞。附着6小时后，将细胞切换到无血清DMEM 16小时，然后与100nM地塞米松同步2小时（T2）。然后将细胞切换回含有DMSO或GSK4112（10μM）的无血清DMEM。然后在时间T6、T21.5、T26.5和T31.5收获细胞，用于RNA提取和RT-QPCR分析。 1. Rev-erbα转录活性报告基因实验：将HEK293细胞接种到96孔板，转染Rev-erbα表达质粒、BMAL1-荧光素酶报告基因质粒和海肾荧光素酶内参质粒。转染24小时后，加入梯度浓度（0.01–10 μM）的GSK4112，继续孵育24小时。采用双荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性，以海肾荧光素酶活性作为内参校正转染效率，通过与溶媒对照组比较相对荧光素酶活性，评估GSK4112对Rev-erbα介导的转录抑制的影响[1] 2. 肝细胞凋亡实验：分离原代小鼠肝细胞并接种到6孔板，贴壁后用GSK4112（1–10 μM）处理12小时，再用Fas配体刺激6小时。收集细胞，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术检测凋亡率；制备细胞裂解物，经SDS-PAGE电泳分离后，用抗切割型caspase-3、PARP和β-肌动蛋白（内参）抗体进行Western blot检测[2] 3. 炎症因子表达实验：将RAW 264.7巨噬细胞接种到6孔板，过夜培养。用GSK4112（1–20 μM）预处理细胞2小时，再用LPS刺激4小时。提取总RNA并逆转录为cDNA，通过定量RT-PCR检测TNF-α、IL-6和GAPDH（管家基因）的mRNA水平，采用2^(-ΔΔCt)法计算细胞因子的相对表达量[2] |
| 动物实验 |
为了建立Fas诱导的急性肝损伤模型，我们采用腹腔注射（ip）的方式，给BALB/c小鼠注射Jo2（0.5 μg/g，溶于生理盐水）。为了评估GSK4112对Fas诱导的肝损伤的影响，我们将32只小鼠随机分为四组（每组8只）。在Fas组中，我们用Jo2处理小鼠以建立Fas诱导的肝损伤模型。在GSK4112+Fas组中，我们在Jo2处理前0.5 h腹腔注射GSK4112（25 mg/kg，溶于DMSO）。GSK4112的剂量是根据预实验确定的。对照组和GSK4112组分别注射等剂量的溶剂或GSK4112。动物在接受 Jo2 或 NS 处理 6 小时后处死。采集血液用于检测血浆指标，例如 ALT 和 AST。收集肝脏用于评估形态学变化和其他分析。为了评估 GSK4112 对死亡率的影响，将 40 只小鼠随机分为两组（每组 20 只），即 Fas 组和 GSK4112+Fas 组。在给予 Jo2 后，每 6 小时观察小鼠 7 天，并分析其存活率[2]。
1. Fas 诱导的急性肝损伤小鼠模型：将雄性 C57BL/6 小鼠（6-8 周龄）随机分为三组：对照组、GSK4112 10 mg/kg 组和 GSK4112 20 mg/kg 组（每组 n=6）。将GSK4112溶解于DMSO和生理盐水的混合溶液中（最终DMSO浓度≤5%），并连续3天每日腹腔注射一次。第3天，末次给药1小时后，小鼠腹腔注射Fas配体以诱导急性肝损伤。Fas配体注射24小时后，麻醉小鼠，通过眼眶静脉窦穿刺采集血样，检测血清ALT和AST水平。取出肝脏，一部分用4%多聚甲醛固定，用于组织病理学检查（H&E染色），另一部分保存于-80℃，用于Western blot和RT-PCR分析[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外肝细胞毒性：GSK4112（浓度高达 20 μM）对原代小鼠肝细胞无显著细胞毒性，CCK-8 检测显示细胞存活率 >90% [2]
2. 体内急性毒性：腹腔注射 GSK4112（10–20 mg/kg）3 天后，小鼠体重或一般健康状况（例如活动量、食物摄入量）未见显著变化。对治疗小鼠的肝脏和肾脏组织进行组织病理学检查，未见明显的毒性病变（例如坏死、炎症）[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
鉴定孤儿核受体Rev-erbα的非卟啉配体将有助于研究其作为血红素传感器以及代谢和昼夜节律信号调节器的作用。我们描述了一种用于测量Rev-erbα与核受体共抑制因子-1 (NCoR) 肽段相互作用的生化分析方法的开发。该方法用于鉴定Rev-erbα的小分子配体GSK4112 (1)，该配体与血红素具有竞争性结合能力。在细胞中，化合物1表现出Rev-erbα激动剂的特性，能够抑制昼夜节律靶基因bmal1的表达。此外，化合物1还能抑制肝细胞中糖异生基因的表达，并降低原代肝细胞的葡萄糖输出。因此，化合物1可作为一种化学工具，用于研究Rev-erbα在转录抑制、昼夜节律调控和代谢通路中的功能。此外，化合物 1 可作为设计具有体内药理活性的 Rev-erbα 化学探针的起点。[1]
Fas 诱导的细胞凋亡是急性和慢性肝脏疾病中肝细胞损伤的核心机制。越来越多的证据表明，生物钟在细胞命运调控中起着关键作用。本研究探讨了生物钟核心成分 REV-ERBα 在 Fas 诱导的急性肝损伤中的潜在意义。我们向小鼠腹腔注射抗 Fas 抗体 Jo2 以诱导急性肝损伤，并给予 REV-ERBα 激动剂 GSK4112。结果表明，GSK4112 治疗降低了 Jo2 损伤小鼠的血浆 ALT 和 AST 水平，减轻了肝脏组织学改变，并提高了小鼠的存活率。 GSK4112治疗还能下调caspase-3和caspase-8的活性，抑制肝细胞凋亡。此外，GSK4112治疗还能降低Fas的水平，并增强Akt的磷酸化。总之，GSK4112 治疗减轻了小鼠 Fas 诱导的细胞凋亡性肝损伤，表明 REV-ERBα 激动剂可能在 Fas 相关肝损伤的药物干预中具有潜在价值。[2] 1. 药物分类和作用：GSK4112 是一种选择性小分子激动剂和化学探针，可靶向 Rev-erbα，Rev-erbα 是一种核受体，可调节昼夜节律、代谢和炎症。[1] 2. 作用机制：GSK4112 与 Rev-erbα 结合（以血红素依赖的方式），并增强其对辅阻遏复合物的募集，从而抑制参与昼夜节律（例如 BMAL1）、代谢（例如 NAMPT）和炎症的靶基因的转录。在急性肝损伤中，GSK4112 通过抑制 Fas 诱导的细胞凋亡和炎症细胞因子生成发挥保肝作用 [1][2] 3. 研究应用：GSK4112 被广泛用作研究 Rev-erbα 生物学的化学工具，包括其在昼夜节律调节、代谢紊乱和炎症性疾病中的作用 [1] 4. 治疗潜力：GSK4112 在 Fas 诱导的急性肝损伤中的保肝作用表明其具有治疗急性肝损伤和其他炎症性肝病的潜力 [2] |
| 分子式 |
C18H21CLN2O4S
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|---|---|
| 分子量 |
396.888342618942
|
| 精确质量 |
396.091
|
| 元素分析 |
C, 54.47; H, 5.33; Cl, 8.93; N, 7.06; O, 16.12; S, 8.08
|
| CAS号 |
1216744-19-2
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| 相关CAS号 |
1216744-19-2
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| PubChem CID |
50905018
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
486.7±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
248.1±28.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.591
|
| LogP |
5.47
|
| tPSA |
103.6
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
487
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC(OC(=O)CN(CC1SC([N+](=O)[O-])=CC=1)CC1C=CC(Cl)=CC=1)(C)C
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| InChi Key |
WYSLOKHVFKLWOU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H21ClN2O4S/c1-18(2,3)25-17(22)12-20(10-13-4-6-14(19)7-5-13)11-15-8-9-16(26-15)21(23)24/h4-9H,10-12H2,1-3H3
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| 化学名 |
tert-butyl 2-[(4-chlorophenyl)methyl-[(5-nitrothiophen-2-yl)methyl]amino]acetate
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| 别名 |
GSK4112; SR6452; SR-6452; GSK 4112; tert-butyl 2-[(4-chlorophenyl)methyl-[(5-nitrothiophen-2-yl)methyl]amino]acetate; CHEMBL1961795; Tert-butyl 2-((4-chlorobenzyl)((5-nitrothiophen-2-yl)methyl)amino)acetate; GSK-4112
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 25~68 mg/mL (63.0~171.3 mM)
Ethanol: ~3 mg/mL (~7.6 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.30 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5196 mL | 12.5979 mL | 25.1959 mL | |
| 5 mM | 0.5039 mL | 2.5196 mL | 5.0392 mL | |
| 10 mM | 0.2520 mL | 1.2598 mL | 2.5196 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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