| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
β-Catenin/TCF4 (IC50 = 1.65 μM by AlphaScreen; and 1.82 μM by ELISA)[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在含有外源报告基因的细胞和具有高内源性 Wnt 活性的结肠癌细胞中，LF3 抑制 Wnt/β-连环蛋白信号。此外，LF3 还能抑制与 Wnt 信号传导相关的癌细胞中 Wnt 靶基因的过度表达、高细胞运动性和细胞周期进展。然而，LF3 不会损害钙粘蛋白介导的细胞间粘附或导致细胞死亡。令人惊讶的是，LF3 以依赖于浓度的方式抑制癌症干细胞的自我更新能力[1]。
- 抑制含有外源性报告基因的细胞和内源性Wnt活性高的结肠癌细胞中的Wnt/β - 连环蛋白信号[1] - 抑制与Wnt信号相关的癌细胞中Wnt靶基因的过表达、高细胞迁移能力和细胞周期进程，且不会导致细胞死亡或干扰钙黏蛋白介导的细胞间黏附[1] - 以浓度依赖的方式阻断癌症干细胞的自我更新能力，通过在非贴壁条件下结肠和头颈部癌症干细胞的成球实验来验证[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在结肠癌小鼠异种移植模型中抑制肿瘤生长并诱导分化。以50 mg/kg的剂量给予高GFP细胞的小鼠时，肿瘤生长明显受到抑制，且小鼠肠道的正常组织学未受影响[1]
LF3 在结肠癌小鼠异种移植模型中抑制肿瘤生长并促进分化。当 LF3 以 50 mg/kg 的剂量给予 GFPhigh 细胞的小鼠时，肿瘤生长受到显着抑制。小鼠肠道的正常组织学不受 LF3 治疗的影响[1]。 |
| 酶活实验 |
将LF3的类似物溶解在DMSO中至浓度为50 mmol/L。在AlphaScreen中，纯化的GST-hβ-catenin首先与镍螯合受体珠一起孵育，His-hTCF4与谷胱甘肽供体珠（Perkelmer）一起在PBS中孵育。然后在20μmol/L的测试化合物存在下，将它们合并成384孔的AlphaPlates。滴定法用于测定AlphaScreen中使用的纯化蛋白质的浓度，产生线性范围内的信号。孵育1小时后，蛋白质-蛋白质相互作用诱导发光，如EnVision多标记平板阅读器所测[1]。
在AlphaScreen实验中，将纯化的GST - hβ - 连环蛋白与镍螯合受体珠子孵育，将His - hTCF4与谷胱甘肽供体珠子在PBS中孵育。然后将它们在20 μmol/L测试化合物（LF3及其类似物）存在的情况下组合到384孔Alpha板中。孵育1小时后，蛋白质 - 蛋白质相互作用会诱导发光，通过Envision多功能酶标仪测量发光情况，以确定LF3对β - 连环蛋白和TCF4相互作用的抑制效果[1] |
| 细胞实验 |
24孔细胞培养板预先涂上250μL聚血（在95%乙醇中为12mg/mL；Sigma），以促进非附着球体的生长。将SW480报告细胞和小鼠唾液腺CSC胰蛋白酶消化，并作为单细胞接种到球形培养基（F12:DMEM 1:1，1×B-27补充，20 ng/mL EGF，20 ng/mL FGF，0.5%甲基纤维素）中，进行或不进行处理。10天后，在相差显微镜下计数球体，并用AF6000和DFC350FX拍摄照片。[1]
- 对于含有外源性报告基因的细胞和内源性Wnt活性高的结肠癌细胞，进行体外培养，加入不同浓度的LF3，然后通过相应方法检测Wnt/β - 连环蛋白信号通路的活性，如Wnt靶基因表达水平、细胞迁移能力和细胞周期进程等（文献未具体描述具体检测方法）[1] - 对于结肠和头颈部癌症干细胞，在非贴壁条件下培养，加入不同浓度的LF3，观察成球情况以评估癌症干细胞的自我更新能力[1] |
| 动物实验 |
NOD/SCID 小鼠
将未分选的 GFPlow 和 GFPhigh SW480 细胞 (1 × 10⁴) 皮下注射到 NOD/SCID 小鼠背部皮肤。监测肿瘤生长情况 45 天。治疗方面，LF3 以 50 mg/kg 体重静脉注射，连续 5 天，共 3 个疗程，间隔 2 天。[1] 将 LF3 溶解于合适的溶剂中，并以 50 mg/kg 的剂量给予结肠癌异种移植小鼠，但未提及给药途径和频率。观察异种移植瘤的生长情况和小鼠肠道的组织学变化。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Wnt/β-catenin信号通路是一条高度保守的通路，对胚胎发生和组织稳态至关重要。然而，该通路的失调可启动并促进人类恶性肿瘤的发生，尤其是结肠癌和头颈部恶性肿瘤。因此，Wnt/β-catenin信号通路是极具吸引力的癌症治疗靶点。我们利用AlphaScreen和ELISA技术进行高通量筛选，以鉴定能够破坏β-catenin与转录因子TCF4之间关键相互作用的小分子，该相互作用是信号转导所必需的。我们发现化合物LF3（一种4-硫脲基苯磺酰胺衍生物）能够有效抑制这种相互作用。生化分析表明，LF3的核心结构对其抑制作用至关重要。LF3能够抑制外源性报告基因阳性细胞和内源性Wnt活性较高的结肠癌细胞中的Wnt/β-catenin信号。LF3还能抑制癌细胞中与Wnt信号通路相关的特征，包括细胞高迁移性、细胞周期进程以及Wnt靶基因的过表达。然而，LF3 不会引起细胞死亡，也不干扰钙黏蛋白介导的细胞间黏附。值得注意的是，LF3 以浓度依赖的方式抑制了癌干细胞的自我更新能力，这可以通过在非黏附条件下结肠癌和头颈癌干细胞的球体形成实验来验证。此外，LF3 在结肠癌小鼠异种移植模型中抑制了肿瘤生长并诱导了细胞分化。综上所述，我们的研究结果强烈表明，LF3 是一种具有抗癌活性的经典 Wnt 信号通路特异性抑制剂，值得进一步开发，用于临床前和临床研究，作为一种新型癌症疗法。[1] Wnt/β-catenin 信号通路是一条高度保守的通路，对胚胎发生和组织稳态至关重要，其失调可引发和促进人类恶性肿瘤的发生，尤其是结肠癌和头颈癌。 LF3 是一种 4-硫脲基苯磺酰胺衍生物，可特异性拮抗 β-catenin/TCF4 相互作用，具有抗癌活性，值得进一步开展临床前和临床研究，有望成为一种新的癌症疗法 [1]
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| 分子式 |
C20H24N4O2S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
416.56
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| 精确质量 |
416.134
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| 元素分析 |
C, 57.67; H, 5.81; N, 13.45; O, 7.68; S, 15.39
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| CAS号 |
664969-54-4
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1213452
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
609.6±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
322.5±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.680
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| LogP |
1.97
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| tPSA |
119Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
625
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S=C(N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])S(N([H])[H])(=O)=O)N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])/C(/[H])=C(\[H])/C2C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=2[H])C([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
ZUQIFHLBPBLRRM-QPJJXVBHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H24N4O2S2/c21-28(25,26)19-10-8-18(9-11-19)22-20(27)24-15-13-23(14-16-24)12-4-7-17-5-2-1-3-6-17/h1-11H,12-16H2,(H,22,27)(H2,21,25,26)/b7-4+
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| 化学名 |
4-[(E)-3-phenylprop-2-enyl]-N-(4-sulfamoylphenyl)piperazine-1-carbothioamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4006 mL | 12.0031 mL | 24.0061 mL | |
| 5 mM | 0.4801 mL | 2.4006 mL | 4.8012 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2003 mL | 2.4006 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
