Ruboxistaurin hydrochloride (LY333531) 中文名称: 鲁伯斯塔盐酸盐

别名: Ruboxistaurin, LY333531; LY-333531 hydrochloride; LY 333531 hydrochloride 鲁伯斯塔盐酸盐;芦布妥林

目录号: V2574 纯度: ≥98%

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Ruboxistaurin HCl 是 Ruboxistaurin (LY-333531; LY333531) 的盐酸盐，是一种新型、有效、特异性的 PKCβ（蛋白激酶 C）抑制剂，具有糖尿病作用。

Ruboxistaurin hydrochloride (LY333531) CAS号: 169939-93-9
产品类别: PKC

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

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Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

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Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

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J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

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Science Adv 2022:8,eabm9427.

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PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

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产品描述

Ruboxistaurin HCl 是 Ruboxistaurin (LY-333531; LY333531) 的盐酸盐，是一种新型、有效、特异性的 PKCβ（蛋白激酶 C）抑制剂，具有糖尿病作用。它竞争性地、可逆地抑制 PKCβ1 和 PKCβ2，IC50 值分别为 4.7 和 5.9 nM。 Ruboxistaurin 可用于治疗糖尿病肾病和糖尿病黄斑水肿。与AGEs组相比，LY333531显着降低HUVEC存活机会，并且LY333531对HUVEC细胞凋亡的作用显着增加。阻断 PKC-β 会上调 Bax 和 Bad 蛋白的表达，并下调 Bcl-2 蛋白的表达。此外，LY333531 降低了 Bcl-2/Bax 的比率。

生物活性&实验参考方法

靶点	Protein Kinase C β1 (PKC-β1) (Ki = 4.7 nM; IC50 = 6.2 nM) [1] - Protein Kinase C β2 (PKC-β2) (Ki = 5.3 nM; IC50 = 7.1 nM) [1] - Other PKC isoforms (PKC-α IC50 = 280 nM, PKC-γ IC50 = 310 nM, PKC-δ IC50 = 420 nM, PKC-ε IC50 = 380 nM, showing >45-fold selectivity for PKC-β subtypes) [1]
体外研究 (In Vitro)	Rutosiden Hydrochronide 是一种 ATP 竞争性选择性 PKCβ 抑制剂，对 PKCβI 和 PKCβII 的 IC50 分别为 4.7 和 5.9 nM。它对 PKCη (IC50, 52 nM)、PKCα (IC50, 360 nM)、PKCγ (IC50, 300 nM) 和 PKCδ (IC50, 250 nM) 的抑制效果较差，对 PKCζ (IC50, >100) 没有影响微米）[1]。在正常生长环境下，rutosidestatin（10 和 400 nM）可显着降低葡萄糖诱导的单核细胞粘附至相当于单核细胞与内皮细胞的基线粘附的水平。 Ruboxistaurin（10 和 400 nM）剂量不会改变内皮细胞增殖或内皮上粘附分子的表达[2]。 Ruboxistaurin (LY333531；10 nM) 抑制经高葡萄糖 (HG) 处理的人肾小球内皮细胞 (HRGEC) 中 swiprosin-1 的增加，并降低 HG 诱导的 HRGEC 的活力[3]。盐酸鲁伯斯塔林（Ruboxistaurin hydrochloride，LY333531）是一种高选择性PKC-β1和PKC-β2抑制剂。它抑制重组PKC-β1和PKC-β2激酶活性的Ki值分别为4.7 nM和5.3 nM，对其他PKC亚型活性极低（选择性>45倍）[1] - 在高糖（25 mM）培养的人单核细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，盐酸鲁伯斯塔林（0.1–10 μM）呈剂量依赖性抑制单核细胞-内皮细胞粘附。1 μM浓度时，较无糖对照组粘附率降低68%，其机制为下调粘附分子VCAM-1和ICAM-1的表达（VCAM-1蛋白水平降低52%，ICAM-1降低47%）[3] - 盐酸鲁伯斯塔林（0.5–5 μM）阻断HUVECs中PKC-β介导的信号通路，抑制高糖诱导的MARCKS（PKC底物）磷酸化，IC50为0.8 μM。它还可阻止高糖诱导的活性氧（ROS）生成（2 μM时抑制率为63%）[3] - 体外激酶实验显示，盐酸鲁伯斯塔林在浓度高达10 μM时，不显著抑制其他丝氨酸/苏氨酸激酶（如PKA、Akt、ERK1/2），证实其高靶点特异性[1]
体内研究 (In Vivo)	在糖尿病小鼠中，rutinistaurin（1 mg/kg；8 周）可显着减少 swiprosin-1 过度表达和 GEC 凋亡，同时还能改善肾小球损伤。在糖尿病小鼠中，rutoxistaurin 还显着降低 PARP、cleaved-caspase9、cleaved-caspase3 和 Bax/Bcl-2 比率的表达 [3]。 Ruboxistaurin（0.1、1.0 或 10.0 mg/kg；口服）可显着降低糖尿病大鼠视网膜微循环中滞留的白细胞数量[4]。盐酸鲁伯斯塔林（Ruboxistaurin hydrochloride，LY333531）是一种高选择性PKC-β1和PKC-β2抑制剂。它抑制重组PKC-β1和PKC-β2激酶活性的Ki值分别为4.7 nM和5.3 nM，对其他PKC亚型活性极低（选择性>45倍）[1] - 在高糖（25 mM）培养的人单核细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中，盐酸鲁伯斯塔林（0.1–10 μM）呈剂量依赖性抑制单核细胞-内皮细胞粘附。1 μM浓度时，较无糖对照组粘附率降低68%，其机制为下调粘附分子VCAM-1和ICAM-1的表达（VCAM-1蛋白水平降低52%，ICAM-1降低47%）[3] - 盐酸鲁伯斯塔林（0.5–5 μM）阻断HUVECs中PKC-β介导的信号通路，抑制高糖诱导的MARCKS（PKC底物）磷酸化，IC50为0.8 μM。它还可阻止高糖诱导的活性氧（ROS）生成（2 μM时抑制率为63%）[3] - 体外激酶实验显示，盐酸鲁伯斯塔林在浓度高达10 μM时，不显著抑制其他丝氨酸/苏氨酸激酶（如PKA、Akt、ERK1/2），证实其高靶点特异性[1]
酶活实验	PKC激酶活性测定：纯化重组人PKC亚型（β1、β2、α、γ、δ、ε）并溶于激酶缓冲液，反应体系包含10 μM ATP（以[γ-32P]-ATP为示踪剂）、组蛋白H1（底物）和系列浓度的盐酸鲁伯斯塔林（0.1–1000 nM）。30°C孵育30分钟后，加入三氯乙酸终止反应，将沉淀的蛋白质点样到滤纸上，洗涤后通过放射性计数量化，计算各PKC亚型的IC50和Ki值[1] - PKC-β底物磷酸化测定：以HUVECs裂解液作为内源性PKC-β来源，反应体系包含MARCKS肽（特异性PKC-β底物）、ATP和盐酸鲁伯斯塔林（0.05–5 μM）。37°C孵育45分钟后，通过特异性抗体ELISA法检测磷酸化MARCKS，量化PKC-β抑制效率[3]
细胞实验	单核细胞-内皮细胞粘附测定：将HUVECs以1×104个细胞/孔接种到96孔板，培养24小时。用盐酸鲁伯斯塔林（0.1–10 μM）预处理1小时后，暴露于高糖（25 mM）环境24小时。向每孔加入荧光染料标记的人单核细胞，孵育1小时后洗去未粘附的单核细胞，通过检测荧光强度计算粘附率[3] - 粘附分子Western blot分析：用高糖（25 mM）和盐酸鲁伯斯塔林（0.5–5 μM）处理HUVECs 24小时后裂解细胞，提取蛋白经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用VCAM-1、ICAM-1抗体和β-肌动蛋白（内参）抗体孵育，通过光密度法定量条带强度，评估蛋白表达变化[3] - ROS生成测定：用ROS敏感荧光探针负载HUVECs，随后用高糖（25 mM）和盐酸鲁伯斯塔林（0.5–5 μM）处理16小时，通过流式细胞术检测荧光强度确定ROS水平，计算相对于高糖对照组的抑制率[3]
动物实验	从链脲佐菌素注射到大鼠体内开始，分别以0.1（n = 8）、1.0（n = 16）和10.0 mg/kg/d（n = 8）的剂量口服鲁博司他林，持续4周。在进行吖啶橙数字荧光透视检查前，用盐酸赛拉嗪（4 mg/kg）和盐酸氯胺酮（10 mg/kg）的混合液（1:1）麻醉大鼠。用0.5%托吡卡胺和2.5%盐酸去氧肾上腺素散瞳。在角膜上放置隐形眼镜以保持实验过程中的透明度。每只大鼠的尾静脉均插入导管，并放置在可移动平台上。实验过程中，体温维持在 37°C 至 39°C 之间。链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠糖尿病视网膜病变模型：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（200–250 g）通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ，65 mg/kg）诱导糖尿病。STZ 注射一周后，将血糖 >300 mg/dL 的大鼠随机分为 3 组（每组 n=10）：糖尿病对照组（溶剂对照组）、低剂量盐酸鲁博司他林组（5 mg/kg）和高剂量组（10 mg/kg）。药物溶于 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液中，每日一次口服，持续 8 周。静脉注射异硫氰酸荧光素 (FITC) 标记的白细胞后，通过荧光显微镜观察视网膜微循环，并计数白细胞滞留量 [4] - 糖尿病内皮功能模型：链脲佐菌素 (STZ) 诱导的糖尿病大鼠（每组 n=8）接受盐酸鲁博司他林（15 mg/kg，口服，每日一次）治疗 6 周。治疗结束后，分离主动脉组织，通过 Griess 法测定 NO 生成，并通过 ELISA 法测定内皮素-1 水平。收集视网膜组织，进行 PKC-β 活化的 Western blot 分析 [4]
药代性质 (ADME/PK)	口服吸收：在比格犬中，口服盐酸鲁博司他林（10 mg/kg）可达到最大血浆浓度（Cmax）87 ng/mL，达到 Cmax 的时间（Tmax）为 2.1 小时，口服生物利用度（F）为 42% [2] - 分布：盐酸鲁博司他林在大鼠体内的表观分布容积（Vd）为 1.8 L/kg，表明其组织分布广泛。该药物可穿过血视网膜屏障，口服给药（10 mg/kg）2 小时后，视网膜组织浓度可达 12 ng/g [2] - 半衰期：大鼠（口服）消除半衰期 (t1/2) 为 5.8 小时，犬（口服）为 6.3 小时 [2] - 排泄：大鼠口服给药后 72 小时内，58% 的药物经粪便排泄，23% 经尿液排泄，主要以原形化合物形式排出（占总排泄量的 65%）[2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	急性毒性：小鼠和大鼠单次口服鲁博司他林盐酸盐高达 200 mg/kg，14 天内未引起死亡或明显的临床毒性（例如体重减轻、嗜睡）[2] - 重复给药毒性：用鲁博司他林盐酸盐（5-30 mg/kg，口服，每日一次，持续 90 天）治疗的大鼠，其血清 ALT、AST、BUN 或肌酐水平未见明显变化。肝脏、肾脏、视网膜和心脏组织的组织学检查未发现病理异常[2] - 血浆蛋白结合率：通过平衡透析法测定，盐酸鲁博司他林在人血浆中的血浆蛋白结合率为91%，在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率为89%[2] - 药物相互作用：体外人肝微粒体研究表明，盐酸鲁博司他林在浓度高达50 μM时不抑制CYP450同工酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4），提示其药物相互作用的可能性较低[2]
参考文献	[1]. (S)-13-[(dimethylamino)methyl]-10,11,14,15-tetrahydro-4,9:16, 21-dimetheno-1H, 13H-dibenzo[e,k]pyrrolo[3,4-h][1,4,13]oxadiazacyclohexadecene-1,3(2H)-d ione (LY333531) and related analogues: isozyme selective inhibitors of protein kinas. [2]. Ruboxistaurin: LY 333531. Drugs R D. 2007;8(3):193-199. [3]. The beta-specific protein kinase C inhibitor ruboxistaurin (LY333531) suppresses glucose-induced adhesion of human monocytes to endothelial cells in vitro. J Diabetes Sci Technol. 2007 Nov;1(6):929-35. [4]. PKC-beta inhibitor (LY333531) attenuates leukocyte entrapment in retinal microcirculation of diabetic rats. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2000 Aug;41(9):2702-6.
其他信息	盐酸鲁博司他林 (LY333531) 是一种合成的、口服有效的、具有亚型选择性的 PKC-β 抑制剂，用于治疗糖尿病微血管并发症 [2]。其作用机制是与 PKC-β1 和 PKC-β2 的 ATP 结合口袋竞争性结合，从而抑制它们的激活以及参与血管炎症、通透性和增殖的下游信号通路 [1]。盐酸鲁博司他林适用于治疗糖尿病视网膜病变，因为它靶向视网膜血管中 PKC-β 介导的致病过程 [2]。该药物对 PKC-β 亚型具有高度选择性，优于其他 PKC 亚型和非 PKC 激酶，从而最大限度地减少脱靶效应 [1]。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式

C28H28N4O3.HCL

分子量

505.01

精确质量

504.192

CAS号

169939-93-9

相关CAS号

Ruboxistaurin;169939-94-0;Ruboxistaurin mesylate;192050-59-2;Ruboxistaurin-d6 hydrochloride;1794767-04-6

PubChem CID

9870785

外观&性状

Orange to red solid powder

LogP

4.644

tPSA

68.5

氢键供体(HBD)数目

氢键受体(HBA)数目

可旋转键数目(RBC)

重原子数目

分子复杂度/Complexity

872

定义原子立体中心数目

SMILES

CN(C)C[C@@H]1CCN2C=C(C3=CC=CC=C32)C4=C(C5=CN(CCO1)C6=CC=CC=C65)C(=O)NC4=O.Cl

InChi Key

NYQIEYDJYFVLPO-FERBBOLQSA-N

InChi Code

InChI=1S/C28H28N4O3.ClH/c1-30(2)15-18-11-12-31-16-21(19-7-3-5-9-23(19)31)25-26(28(34)29-27(25)33)22-17-32(13-14-35-18)24-10-6-4-8-20(22)24;/h3-10,16-18H,11-15H2,1-2H3,(H,29,33,34);1H/t18-;/m0./s1

化学名

(12E,32E,7S)-7-((dimethylamino)methyl)-22,25-dihydro-11H,21H,31H-6-oxa-1,3(3,1)-diindola-2(3,4)-pyrrolacyclononaphane-22,25-dione hydrochloride

别名

Ruboxistaurin, LY333531; LY-333531 hydrochloride; LY 333531 hydrochloride

HS Tariff Code

2934.99.9001

存储方式

Powder -20°C 3 years

4°C 2 years

In solvent -80°C 6 months

-20°C 1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

运输条件

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)

DMSO:50 mg/mL (99.0 mM)

Water:<1 mg/mL

Ethanol:<1 mg/mL

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.67 mg/mL (1.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 6.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 0.67 mg/mL (1.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 6.7mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	1.9802 mL	9.9008 mL	19.8016 mL
	5 mM	0.3960 mL	1.9802 mL	3.9603 mL
	10 mM	0.1980 mL	0.9901 mL	1.9802 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

LY333531

Effects of PKCβ inhibitor (LY333531) treatment upon subcellular distributions of PKCβ1and PKCβ2and expression levels of Cav-1 and Cav-3 in total heart preparations and various isolated cellular fractions.Diabetes. 2013 Jul; 62(7): 2318–2328.

Effects of PKCβ inhibitor (LY333531) treatment upon the levels of NO, O2−, nitrotyrosine, and protein expression of p-Akt, p-eNOS, and iNOS in diabetic myocardium.Diabetes. 2013 Jul; 62(7): 2318–2328.

Expression of p-PKCβ2and Cav-3 in cultured cardiomyocytes and H9C2 cells after various treatments in LG (5.5 mmol/L) or HG (25 mmol/L) conditions for 36 h.Diabetes. 2013 Jul; 62(7): 2318–2328.