| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
NP213 targets the fungal cytoplasmic membrane. Its mechanism of action involves membrane perturbation, disruption, and permeabilization, leading to cell lysis. [1]
As a cationic antimicrobial peptide, it targets the fungal cell membrane regardless of the metabolic activity level of the fungi. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- NP213对红色毛癣菌的孢子和菌丝均表现出快速杀真菌活性。在1000 mg/L浓度下，对孢子和菌丝达到>3-log的杀灭效果仅需3至4小时。相比之下，2倍MIC的特比萘芬即使24小时后也未能杀灭孢子和菌丝。[1]
- 用NP213处理红色毛癣菌18小时后进行碘化丙啶染色，结果显示染色细胞数量显著高于未处理对照组。该效应呈剂量依赖性，表明膜通透化发生。[1] - 扫描电镜分析显示，用NP213处理48小时的红色毛癣菌菌丝变扁平，表明膜裂解后失去了内部膨胀压，菌丝表面有细胞碎片。而用环吡酮或特比萘芬处理的细胞与未处理对照组相似。[1] - 透射电镜分析显示，用NP213处理6、18或48小时的红色毛癣菌横截面，细胞内含物明显丢失，而对照细胞可见清晰的细胞器。观察到质膜与细胞壁分离和膜破坏。[1] - NP213显著减少了红色毛癣菌形成的芽管数量，但不影响已形成芽管的长度。[1] - NP213的抗真菌活性依赖于其正电荷。当红色毛癣菌与1 mM NP213和递增摩尔当量的聚茴香脑磺酸共孵育时，生长抑制作用变得不明显。一旦PASA与NP213的摩尔比超过2:1，生长抑制的缺失具有统计学显著性。[1] - 使用标准肉汤微量稀释法测定NP213对一系列引起甲癣的皮肤癣菌和非皮肤癣菌的MIC值。皮肤癣菌的MIC范围为100至4000 mg/L，MFC范围为500至4000 mg/L。在20次传代中未观察到对NP213的适应性耐药，但注意到对特比萘芬的耐药性。[1] - 使用含0.5%人指甲粉的磷酸盐缓冲液作为测试培养基的改良MIC测定法中，NP213对红色毛癣菌的MIC比在RPMI 1640培养基中获得的值降低了4至62.5倍。在人指甲粉基培养基中，MIC范围为16-32 mg/L，而在RPMI 1640中为1000 mg/L。[1] - 在改良的角蛋白基系统中对红色毛癣菌进行测试时，NP213的MIC比CLSI肉汤稀释法结果降低了多达128倍。在同一系统中，特比萘芬的表观MIC增加了2至16倍，环吡酮增加了多达16倍。[1] - NP213对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、真菌和有包膜病毒具有广泛的活性。[2] - NP213的分子量为1093 Da，是一种精氨酸七聚体。其大小、电荷和亲水性使其能够穿透指甲屏障，而不会通过皮肤吸收进入体循环。[2] NP213（500-1000 μg/mL；18 小时）会增加样品中用 PI 染色的红色毛癣菌 NCPF0118 细胞的数量。根据这些发现，NP213 具有杀菌特性并通过膜透化作用发挥作用[1]。 NP213 相对于红色毛癣菌 NCPF0118 表现出不同的最低抑制浓度 (MIC)，其中 MIC 取决于角蛋白来源。 NP213在分别含有人指甲角蛋白、人皮肤角蛋白和羊羔毛角蛋白的1640培养基中的MIC值为16-32 mg/L、125 mg/L和250 mg/L[1]。显示出良好的作用通过 NP213 TFA（2-3 小时；0-8 μg/ml）对抗临床相关的酵母，例如念珠菌属、隐球菌属和毛孢子菌属。所有 122 种酵母分离株的 MIC100 中值均为 1-2 µg/ml [3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 一项包含60名甲癣患者的I/IIa期临床研究的初步数据证实，每日给药28天，NP213耐受性非常好。它改善了指甲外观，并在28天给药周期后180天评估指甲真菌负荷时，观察到真菌学改善或感染消退。在轻度至中度甲癣患者中，NP213效果优于安慰剂。[1]
在小鼠中，NP213 TFA (25 mg/kg) 具有良好的耐受性。 NP213 的半衰期约为 4.5 小时，在急性播散性念珠菌病小鼠模型中具有良好的耐受性和有效性[3]。 |
| 细胞实验 |
细胞毒性测定[3]
细胞类型：临床相关酵母分离物 测试浓度： 0 μg/ml； 0.125微克/毫升； 0.25微克/毫升； 0.5微克/毫升； 1微克/毫升； 2微克/毫升； 4微克/毫升； 8 μg/ml 孵育时间：2 小时、2.5 小时、4 小时 实验结果：以剂量依赖性方式减少分离株生长。 - 碘化丙啶染色实验：将红色毛癣菌孢子悬液暴露于不同浓度的NP213中18小时。然后真菌与PI共孵育15分钟。通过荧光显微镜检查细胞，并计数PI染色细胞的数量。[1] - 时间-杀菌实验：制备红色毛癣菌孢子悬液或萌发孢子，在RPMI 1640培养基中与NP213或特比萘芬共孵育。在指定时间点取出等分试样，在含PASA的培养基中系列稀释以中和残留的NP213，然后涂布于PDA琼脂上。培养后计数菌落以确定真菌杀灭情况。[1] - 芽管抑制实验：将红色毛癣菌孢子与NP213孵育，显微镜下评估芽管形成。芽管数量显著减少，但已形成芽管的长度不受影响。[1] - 电荷依赖性实验：将红色毛癣菌在含NP213和递增摩尔当量PASA的RPMI 1640培养基中孵育96小时。评估生长抑制情况，所用浓度的PASA单独对真菌生长无影响。[1] - MIC测定：按照CLSI M38-A2丝状真菌肉汤稀释法对一系列皮肤癣菌和非皮肤癣菌进行抗真菌药敏试验。MIC确定为抑制生长的最低浓度，MFC通过将孔内容物涂布于PDA琼脂上并评估生长情况来确定。[1] - 改良MIC测定：抗真菌药敏试验按上述方法进行，但将RPMI 1640替换为含不同浓度人指甲粉悬液和alamarBlue的磷酸钠缓冲液。人指甲粉由无病指甲碎片在液氮中研磨、过筛并高压灭菌制备。每24小时用酶标仪监测真菌代谢活性，持续长达168小时。[1] |
| 动物实验 |
NP213（诺维沙汀）制剂[4]
NP213采用固相合成法合成，以乙酸盐形式存在（纯度约为95%）（法国PolyPeptide集团；英国Almac集团；美国Ambiopharm公司）。NP213以无定形结晶形式制备成冻干粉末，其纯度通过反相高效液相色谱法测定。NP213是由7个L-精氨酸残基组成的环状主链均聚物，净电荷为+7。 研究设计[4] 本文总结了我们开展的四项临床试验的结果，这些试验旨在评估诺维沙汀®（NP213）的安全性和有效性。所有研究均按照《赫尔辛基宣言》中规定的伦理原则进行，并符合良好临床规范和所有适用的监管要求。所有受试者均被告知临床研究的性质和目的，并在研究开始前签署了知情同意书。 I/IIa期研究[4] 一项初步的I/IIa期研究（EudraCT编号：2008-001496-29）是一项随机、安慰剂对照、分两阶段进行的首次人体临床试验，分为两个部分（第一部分为双盲，第二部分为单盲），旨在评估NP213在轻度至中度趾甲真菌感染（25%–75%的趾甲受累）患者中的安全性、耐受性、药代动力学(PK)和药效学。本研究未明确致病真菌。第二部分（IIa期）仅在第一部分（I期）确认耐受性和安全性的结果公布后才开始。第一部分纳入了12名患有趾甲真菌病的受试者，分别接受NP213或安慰剂（赋形剂）治疗（比例为2:1）；第二部分纳入了48名患有趾甲真菌病的受试者，分别接受NP213或安慰剂（赋形剂）治疗（比例为2:1）。相当一部分试验受试者（42名患者中的19名；45.2%）的趾甲真菌病病情比意向治疗人群（轻度至中度趾甲真菌病）更为严重，但仍被纳入研究。研究分析涵盖所有患者，并对意向治疗人群进行了单独分析。本文所有试验标准的更详细描述可在补充数字内容中找到。 第二项 IIa 期研究 [4] 第二项 IIa 期临床试验（ClinicalTrials.gov 注册号：NCT02343627）是一项随机、双盲、安慰剂对照的试点研究，旨在评估 NP213 溶液治疗由皮肤癣菌引起的轻度至中度趾甲真菌感染（10%–50% 的趾甲受累）患者的安全性和有效性。该试验纳入了 47 名受试者，并按 3:1 的比例随机分配接受 NP213 或安慰剂治疗。 最大暴露量研究 [4] 接下来进行了一项独立的最大暴露量研究，以验证先前的药代动力学数据，该数据表明在对单个目标趾甲给药后，NP213 不会达到全身浓度。本研究是在 I/IIa 期和第二项 IIa 期研究之外，采用独立患者人群开展的。本研究旨在确定每日将 NP213 涂抹于每个脚趾甲和手指甲，持续 28 天后，其全身吸收程度如何。本试验是一项开放标签、多剂量安全性及药代动力学试验，研究对象为健康成年志愿者和患有严重远端甲下甲癣 (DSO)38 的患者，这些患者由皮肤癣菌引起，累及手指甲和/或脚趾甲（双侧大脚趾甲及至少四个其他脚趾甲受累面积≥50%）。试验采用最大剂量方案，评估 10% (w/v) NP213 溶液的安全性及药代动力学。任何用于治疗甲癣的局部疗法的理想目标产品特性是将产品涂抹于所有指甲和甲周皮肤，因为再感染/复发很常见18,19，这可能是由于邻近指甲的亚临床感染或伴随的足癣（香港脚）所致，而足癣在甲癣患者中很常见22,23。目前的局部甲癣治疗方法无法实现这一点。鉴于NP213具有良好的安全性，且其分子设计专门用于渗透指甲而非皮肤，因此不会被全身吸收，本最大暴露试验旨在研究最大暴露是否会导致NP213的全身暴露，并确定是否可以将涂抹于所有指甲和甲周皮肤纳入后续的治疗方案。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C44H85F3N28O9
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|---|---|
| 分子量 |
1207.32
|
| 精确质量 |
1206.7006
|
| 相关CAS号 |
NP213;942577-31-3
|
| PubChem CID |
146047126
|
| 序列 |
Cyclo-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg
cyclo[Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg].TFA cyclo[L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl] trifluoroacetic acid |
| 短序列 |
Cyclo-RRRRRRR
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| tPSA |
692 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
22
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
19
|
| 可旋转键数目(RBC) |
28
|
| 重原子数目 |
84
|
| 分子复杂度/Complexity |
1790
|
| 定义原子立体中心数目 |
7
|
| SMILES |
C(C[C@H]1C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N1)CCCN=C(N)N)CCCN=C(N)N)CCCN=C(N)N)CCCN=C(N)N)CCCN=C(N)N)CCCN=C(N)N)CN=C(N)N.C(=O)(C(F)(F)F)O
|
| InChi Key |
RAWZYRRHFHWWGX-UZTLYUDCSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C42H84N28O7.C2HF3O2/c43-36(44)57-15-1-8-22-29(71)65-24(10-3-17-59-38(47)48)31(73)67-26(12-5-19-61-40(51)52)33(75)69-28(14-7-21-63-42(55)56)35(77)70-27(13-6-20-62-41(53)54)34(76)68-25(11-4-18-60-39(49)50)32(74)66-23(30(72)64-22)9-2-16-58-37(45)46;3-2(4,5)1(6)7/h22-28H,1-21H2,(H,64,72)(H,65,71)(H,66,74)(H,67,73)(H,68,76)(H,69,75)(H,70,77)(H4,43,44,57)(H4,45,46,58)(H4,47,48,59)(H4,49,50,60)(H4,51,52,61)(H4,53,54,62)(H4,55,56,63);(H,6,7)/t22-,23-,24-,25-,26-,27-,28-;/m0./s1
|
| 化学名 |
2-[3-[(2S,5S,8S,11S,14S,17S,20S)-5,8,11,14,17,20-hexakis[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-3,6,9,12,15,18,21-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclohenicos-2-yl]propyl]guanidine;2,2,2-trifluoroacetic acid
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| 别名 |
NP213 TFA; NP213 (TFA); NP213 TFA; Novexatin (NP213) TFA salt; NP213 TFA
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (82.8 mM）
H2O: ～100 mg/mL (82.8 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (82.83 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8283 mL | 4.1414 mL | 8.2828 mL | |
| 5 mM | 0.1657 mL | 0.8283 mL | 1.6566 mL | |
| 10 mM | 0.0828 mL | 0.4141 mL | 0.8283 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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463611831
