Novexatin   中文名称: 诺瓦克汀

NP213 targets the fungal cytoplasmic membrane. Its mechanism of action involves membrane perturbation, disruption, and permeabilization, leading to cell lysis. [1]
As a cationic antimicrobial peptide, it targets the fungal cell membrane regardless of the metabolic activity level of the fungi. [2]
The primary target of Novexatin is the fungal cytoplasmic membrane. As a cationic antimicrobial peptide (AMP), Novexatin acts by interacting with the fungal cell membrane and is effective regardless of the metabolic activity level of the fungi. The compound exerts its antifungal activity through membrane perturbation, disruption, and permeabilization, ultimately leading to fungal cell lysis. Notably, unlike conventional antifungal agents such as azoles, Novexatin does not rely on enzyme inhibition for its action, and this unique mechanism makes it less prone to inducing drug resistance.
Novexatin targets the fungal cytoplasmic membrane. As an antimicrobial peptide, it acts by perturbing and damaging the fungal cell membrane through membrane disruption. This mechanism leads to rapid fungal cell death without requiring internalization. The peptide's positive charge facilitates binding to negatively charged components of the fungal membrane.

NP213（500–1000 μg/mL；18 小时）可增加标本中红色毛癣菌 NCPF0118 细胞的 PI 染色 T 细胞数量。这一发现表明 NP213 具有杀菌作用，其作用机制是膜通透性增加 [1]。NP213 对红色毛癣菌 NCPF0118 的最低抑菌浓度 (MIC) 因角蛋白来源的不同而有所差异。在含有人类皮肤角蛋白、人类指甲角蛋白和羊毛角蛋白的 1640 培养基中，NP213 的 MIC 值分别为 16–32 mg/L、125 mg/L 和 250 mg/L [1]。 NP213（2-3 小时；0-8 μg/ml）对具有临床意义的酵母菌，例如念珠菌属、隐球菌属和丝孢霉属，表现出高活性。所有 122 株酵母菌分离株的 MIC100 中位数为 1-2 μg/ml [3]。NP213 对红色毛癣菌 NCPF0118 的孢子和菌丝均表现出快速的杀菌活性。在 1000 mg/L 的浓度下，3 至 4 小时内即可达到 >3 log (99.9%) 的孢子和菌丝杀灭率。相比之下，特比萘芬在 2 倍 MIC (0.01 mg/L) 的浓度下，即使在 24 小时后也未能杀灭孢子或菌丝。 [1]
- 将红色毛癣菌 NCPF0118 暴露于 NP213（500 和 1000 mg/L）18 小时后，用碘化丙啶染色，结果显示染色细胞数量显著高于未处理的对照组（P < 0.005）。这种效应呈剂量依赖性，1000 mg/L 浓度下的染色强度显著高于 500 mg/L 浓度（P < 0.01），表明细胞膜通透性增加。[1]
- 将红色毛癣菌 NCPF0118 暴露于 NP213（100× MIC，100 g/L）48 小时后，用扫描电镜分析，结果显示菌丝扁平，表明细胞膜溶解后内部膨压丧失，菌丝表面有细胞碎片。相比之下，用环吡咯烷酮或特比萘芬处理的细胞与未处理的对照组相似。[1]
- 将暴露于NP213（10×MIC，10 g/L）6、18或48小时的红色毛癣菌NCPF0118横截面进行透射电镜观察，结果显示，与对照组细胞（细胞器清晰可见）相比，处理组细胞的细胞内容物明显减少。观察到质膜与细胞壁分离以及细胞膜破坏。[1]
- NP213显著减少了红色毛癣菌NCPF0118形成的芽管数量，但并未影响芽管的长度。[1]
- NP213的抗真菌活性与其正电荷有关。当红色毛癣菌 NCPF0118 与 1 mM NP213 和递增摩尔当量的聚阴离子磺酸（一种中和正电荷的阴离子化合物）一起孵育时，生长抑制作用逐渐减弱。一旦 PASA 与 NP213 的摩尔比超过 2:1，生长抑制作用的消失就具有统计学意义（P < 0.0001）。[1]
- 使用标准肉汤微量稀释法测定了 NP213 对多种皮肤癣菌和非皮肤癣菌（引起甲癣）的最小抑菌浓度 (MIC) 值。皮肤癣菌的 MIC 值范围为 100 至 4,000 mg/L，最小杀菌浓度 (MFC) 值范围为 500 至 4,000 mg/L。经过20代传代培养，未观察到对NP213的适应性耐药性，但观察到对特比萘芬的耐药性。[1]
- 使用改良的MIC测定方法，以0.5%人指甲粉的磷酸盐缓冲液（pH 7.0）为测试培养基，NP213对红色毛癣菌NCPF0118的MIC值较RPMI 1640培养基降低了4至62.5倍。在人指甲粉培养基中，MIC值范围为16-32 mg/L，而RPMI 1640培养基中的MIC值为1000 mg/L。[1]
- 在改良的角蛋白培养基中测试NP213对红色毛癣菌NCPF0118的MIC值时，与CLSI肉汤微量稀释法的结果相比，最高降低了128倍。在同一系统中，特比萘芬的表观最低抑菌浓度（MIC）增加了2至16倍，环吡咯烷酮的MIC增加了高达16倍。[1] - NP213对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、真菌和包膜病毒均具有广泛的活性。[2] - NP213的分子量为1093 Da，是一种精氨酸七聚体。其大小、电荷和亲水性使其能够穿透指甲屏障，而不会被皮肤吸收进入体循环。[2] Novexatin在体外表现出强效的杀真菌活性。作为一种杀真菌肽，Novexatin通过靶向真菌细胞质膜的机制，快速直接地杀死真菌细胞，导致膜扰动、破坏和通透性增加，最终导致细胞裂解。与传统抗真菌药物不同，诺维沙汀的作用机制并非抑制特定酶，因此其抗真菌活性不受真菌代谢状态的影响。临床前研究表明，诺维沙汀具有良好的安全性，局部应用于皮肤和指甲后未发现全身暴露的证据。体外实验表明，诺维沙汀对引起甲癣的皮肤癣菌具有强效的抗真菌活性。其活性评估采用标准抗菌药物敏感性试验方法，例如肉汤微量稀释法，以确定其对各种真菌的最低抑菌浓度（MIC）。该肽起效迅速，这使其区别于传统抗真菌药物。

在小鼠中，NP213（25 mg/kg）耐受性良好。NP213的半衰期约为4.5小时，在急性播散性念珠菌病小鼠模型中显示出疗效和良好的耐受性[3]。一项纳入60名甲癣患者的I期和IIa期临床研究的初步数据显示，每日给药28天后，NP213的耐受性非常好。它改善了指甲外观（用药期间及用药后持续有效），并在28天用药周期结束后180天评估指甲上的皮肤癣菌负荷时，真菌学检查显示感染有所改善/消退。在轻度至中度甲癣患者中，NP213的疗效优于安慰剂。[1] Novexatin在人体临床试验中显示出显著的体内疗效。在第一项 IIa 期人体临床试验中，接受 Novexatin 治疗的患者中，43.3% 在治疗后 180 天通过指甲碎片培养未检测到真菌。在第二项 IIa 期研究中，56.5% 的患者在治疗 360 天后皮肤癣菌培养结果为阴性。在这两项试验中，Novexatin 均每日一次，连续使用 28 天，这与传统的局部甲癣治疗方法（需要长达 52 周的疗程）形成鲜明对比。患者报告结果显示，参与者在使用 Novexatin 仅 14 天后，指甲外观即有所改善。这些研究中鉴定出的所有真菌均为毛癣菌属（Trichophyton spp.）。Novexatin 展现出良好的临床前和临床安全性，局部应用于皮肤和指甲后未发现全身暴露的证据。Novexatin 专为局部应用而设计，并在甲癣的临床前模型中证实了其体内疗效。该肽的体内活性通过测量动物模型中的真菌清除率和甲板渗透率来评估。该肽的局部用药制剂可直接递送至感染部位，最大限度地减少全身暴露。

作为一种靶向真菌细胞膜的抗真菌肽，诺维沙汀的主要作用机制是与细胞膜直接发生物理化学相互作用，而非与特定酶或受体结合。这种膜靶向机制通常通过最小抑菌浓度 (MIC) 测定、膜通透性测定（例如 SYTOX Green 摄取）以及透射电镜观察形态变化等方法进行评估，而非传统的酶结合或受体结合测定。

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由于诺维沙汀是一种靶向真菌细胞膜的抗菌肽，因此传统的酶/受体结合测定方法并不适用于无细胞诺维沙汀。其作用机制涉及膜的扰动和破坏，而非与特定蛋白靶标结合。可以使用脂质体等模型膜系统来研究膜相互作用。

碘化丙啶染色试验 将红曲霉 NCPF0118 的孢子悬液（1 × 10⁴ 个孢子/mL）分别暴露于 0、500 和 1000 mg/L 的 NP213 中，于 30°C 下培养 18 小时。然后将真菌暴露于 16 μM 碘化丙啶中，于 30°C 下孵育 15 分钟。使用荧光显微镜在 400 倍放大倍率下观察细胞，并在每个样本的六个独立视野中计数碘化丙啶染色的细胞数量，每个样本重复进行两次实验。 [1]
- 杀菌时间测定： 将红毛癣菌（T. rubrum）的孢子悬液或萌发孢子（约 0.5-1 × 10⁵ 个细胞/mL）制备于 10 mL RPMI 1640 培养基中，并在 30°C 下与 NP213（1,000 mg/L）或特比萘芬（0.01 mg/L）进行需氧培养。在指定时间点取出 20 μL 培养液，用含 3% PASA 的 RPMI 1640 培养基进行系列稀释以中和残留的 NP213，取 50 μL 涂布于 PDA 琼脂平板上，每个处理重复三次。平板在 30°C 下培养至多 7 天，计数菌落以确定真菌杀灭情况。 [1]
- 芽管抑制试验：将红色毛癣菌 NCPF0118 孢子与 NP213 一起培养，并通过显微镜评估芽管的形成。芽管数量显著减少，但已形成的芽管长度不受影响。[1]
- 电荷依赖性试验：将红色毛癣菌 NCPF0118（约 1 × 10³ CFU/mL）在含有 1 mM NP213（1,093.3 mg/L）和递增摩尔当量聚阴离子磺酸的 RPMI 1640 培养基中，于 30°C 好氧培养 96 小时。评估生长抑制情况，结果表明，在所用浓度下，单独使用 PASA 对真菌生长没有影响。 [1]
- MIC测定（标准方法）：采用肉汤微量稀释法（CLSI M38-A2）对一系列皮肤癣菌和非皮肤癣菌进行抗真菌药物敏感性试验。MIC定义为抑制真菌生长的最低浓度，MFC通过将孔内菌液涂布于PDA琼脂平板上，并在30℃下培养7天后观察菌落生长情况来确定。[1]
- 改良MIC测定（基于角蛋白的方法）：抗真菌药物敏感性试验按上述方法进行，但用含有0.1-1.0%（w/v）人指甲粉悬浮液和0.0025% alamarBlue的10 mM磷酸钠缓冲液（pH 7.0）代替RPMI 1640培养基。将无病指甲碎片在液氮中研磨，过筛，然后高压灭菌，制备人指甲粉。使用酶标仪，每24小时监测一次真菌代谢活性（激发波长530 nm，发射波长590 nm），持续168小时。[1]作为一种抗真菌肽，Novexatin的体外抗真菌活性通常采用肉汤微量稀释法，并遵循CLSI指南进行评估。标准方案包括将Novexatin在合适的培养基（例如RPMI-1640）中进行系列稀释，然后加入标准化的真菌接种物（例如毛癣菌属分生孢子，最终浓度约为0.4-5 × 10⁴ CFU/mL），并在35°C下培养48-72小时，最后读取最小抑菌浓度（MIC）。体外细胞毒性评估可使用正常人角质形成细胞或成纤维细胞，并通过 MTT 或 CCK-8 法测定细胞活力，以确定诺维沙汀对哺乳动物细胞的毒性。

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诺维沙汀的体外细胞活性测定采用真菌细胞培养物，以评估其抗真菌活性。这些测定旨在评估该化合物抑制真菌生长和杀灭真菌细胞的能力。采用肉汤微量稀释法或琼脂扩散法等标准方法测定最小抑菌浓度 (MIC) 值。此外，还需评估其杀灭真菌的快速动力学。

NP213（诺维沙汀）制备[4]
NP213采用固相合成法合成，以乙酸盐形式存在（纯度约为95%）（法国PolyPeptide集团；英国Almac集团；美国Ambiopharm公司）。NP213以无定形结晶形式制备成冻干粉末，其纯度通过反相高效液相色谱法测定。NP213是由7个L-精氨酸残基组成的主链环化均聚物，净电荷为+7。

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研究设计[4]
本文总结了我们开展的四项临床试验的结果，这些试验旨在评估诺维沙汀®（NP213）的安全性和有效性。所有研究均按照《赫尔辛基宣言》中规定的伦理原则进行，并符合良好临床规范和所有适用的监管要求。所有受试者均被告知临床研究的性质和目的，并在研究开始前签署了知情同意书。

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I/IIa 期研究 [4]
一项初步的 I/IIa 期研究（EudraCT 编号：2008-001496-29）是一项随机、安慰剂对照、分两阶段进行的首次人体临床试验，分为两个部分（第一部分为双盲，第二部分为单盲），旨在评估 NP213 在轻度至中度趾甲真菌感染（25%–75% 的趾甲受累）患者中的安全性、耐受性、药代动力学 (PK) 和药效学。本研究未明确致病真菌。第二部分（IIa 期）仅在第一部分（I 期）确认耐受性和安全性的结果公布后才开始。第一部分纳入了12名患有趾甲真菌病的受试者，分别接受NP213或安慰剂（赋形剂）治疗（比例为2:1）；第二部分纳入了48名患有趾甲真菌病的受试者，分别接受NP213或安慰剂（赋形剂）治疗（比例为2:1）。相当一部分试验受试者（42名患者中的19名；45.2%）的趾甲真菌病病情比意向治疗人群（轻度至中度趾甲真菌病）更为严重，但仍被纳入研究。研究分析涵盖所有患者，并对意向治疗人群进行了单独分析。本文所有试验的更详细描述见补充数字内容。

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第二项 IIa 期研究 [4]
第二项 IIa 期临床试验（ClinicalTrials.gov 注册号：NCT02343627）是一项随机、双盲、安慰剂对照的试点研究，旨在评估 NP213 溶液治疗由皮肤癣菌引起的轻度至中度趾甲真菌感染（10%–50% 的趾甲受累）患者的安全性和有效性。该试验纳入了 47 名受试者，并按 3:1 的比例随机分配接受 NP213 或安慰剂治疗。

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最大暴露量研究 [4]
接下来进行了一项独立的最大暴露量研究，以验证先前药代动力学数据，该数据表明在单个目标趾甲给药后，NP213 不会达到全身浓度。这项研究是在 I/IIa 期和第二项 IIa 期研究之外，使用独立的患者人群进行的。本研究旨在确定每日将NP213涂抹于每个脚趾甲和手指甲上，持续28天后，其全身吸收程度如何。这是一项开放标签、多剂量安全性及药代动力学试验，研究对象为健康成年志愿者和患有严重远端甲下甲癣（DSO）38的患者，这些患者均由皮肤癣菌引起，累及手指甲和/或脚趾甲（双侧大脚趾甲及至少四个其他脚趾甲受累面积≥50%）。试验采用最大剂量方案。任何用于治疗甲癣的局部疗法的理想目标产品特性是将产品涂抹于所有指甲和甲周皮肤，因为再感染/复发很常见^18,19，这可能是由于邻近指甲的亚临床感染或伴随的足癣（香港脚）所致，而足癣在甲癣患者中很常见^22,23。目前的局部甲癣治疗方法无法实现这一点。鉴于NP213具有良好的安全性，且其分子设计专门用于渗透指甲而非皮肤，因此不会被全身吸收，本最大暴露试验旨在研究最大暴露是否会导致NP213的全身暴露，并确定是否可以将涂抹于所有指甲和甲周皮肤纳入后续治疗方案。Novexatin已直接进入人体临床试验阶段。抗真菌药物的临床前体内评价常用的动物模型包括甲癣豚鼠模型（通过将毛癣菌接种到趾甲上建立）和皮肤癣菌病豚鼠模型。典型的动物实验方案包括：在麻醉下对指甲进行轻微损伤后，进行真菌接种；感染建立后（通常需要7-14天），局部应用诺维沙汀（每日一次或两次，持续14-28天），并通过真菌培养和组织切片分析评估疗效。诺维沙汀的体内动物研究在甲癣模型中进行，例如豚鼠或小鼠真菌性甲感染模型。这些研究通常包括局部应用肽制剂，然后评估真菌负荷、甲板渗透情况和临床治愈率。这些模型用于评估化合物的疗效和局部耐受性。

本研究采用体外人指甲感染模型评估了NP213在指甲内的生物利用度。在用10%（w/v）NP213每日治疗28天以清除感染后，分别于治疗结束后3、5、8和11个月再次将指甲暴露于红色毛癣菌NCPF0118。NP213治疗组的指甲无法再次感染，而未治疗的对照组指甲在每个时间点均成功再次感染。NP213治疗后，各再感染时间点的菌落计数均显著降低（P < 0.0001），表明NP213在指甲内至少可保持11个月的生物活性。 [1] NP213 的尺寸、电荷和亲水性使其能够穿透指甲屏障，而不会被皮肤吸收进入体循环。[2] NP213 为局部用药，这使其优于口服药物，后者通常存在安全性和毒理学问题。其在指甲中的生物利用度在应用后 12 个月以上仍然很高。 [2]

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最大暴露量研究[4]
早期临床前和临床研究表明，每日局部涂抹NP213于单个目标趾甲后，未观察到全身暴露。为了验证预期中多甲给药不会导致全身暴露，我们开展了一项最大暴露量研究。在该研究中，我们对7名健康受试者和21名患有严重指甲和/或趾甲退行性病变（DSO）的受试者，每日一次将NP213溶液（10% (w/v)）涂抹于所有手指和脚趾甲以及周围0.5 mm的皮肤，持续28天。所有受试者（健康受试者和严重DSO患者）均对NP213安全且耐受性良好，未报告严重不良事件（SAE）和给药部位反应（皮肤刺激或致敏）。重要的是，药代动力学分析显示，所有检测样本中NP213的血浆浓度均低于定量下限（LLOQ）。因此，试验参与者在28天内暴露于约2800毫克（2.8 × 10⁹ ng）NP213，且在参与者的血浆样本中未检测到NP213。尽管这并非本研究的目标，但临床试验中心报告称，14名患有严重DSO的患者在研究结束后数月内指甲明显生长。

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Novexatin的药代动力学特性针对局部递送至甲板进行了优化。作为一种肽，它旨在局部作用于给药部位，最大限度地减少全身吸收。其较大的分子量（1093.32 g/mol）和肽的特性限制了其穿透完整皮肤的能力，从而降低了全身暴露的可能性。该化合物配制成局部用药。

体外生物相容性： 在改良的MIC方法开发过程中，测试了不同的角蛋白来源。脂质基质成分（DSPE-PEG2000、EPC和胆固醇）与BMDC共培养时显示出较低的免疫原性。所提供的文献中未报告NP213单独使用的具体细胞毒性数据。[1]
- 临床安全性： 一项纳入60名受试者的I/IIa期临床研究的初步数据显示，NP213每日给药28天，甲癣患者耐受性良好。[1]
- 甲癣指甲的离体安全性： NP213成功根除了经临床确诊的甲癣患者自然感染的甲癣指甲中的皮肤癣菌感染。对真菌负荷范围为 4.3 × 10³ CFU/mL 至 >2 × 10⁷ CFU/mL 的指甲进行治疗，结果显示，与赋形剂对照组相比，NP213 显著降低了菌落形成单位 (CFU) 计数 (P < 0.0001)。[1]
- 溶血特性： 与一些其他已报道具有溶血特性的抗真菌肽（例如，伊枯草菌素、杆菌霉素 L）不同，NP213 未提及溶血活性。其局部用药且不被全身吸收，表明其全身毒性风险极低。[2]

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已开展 Novexatin 的毒理学研究，以支持其用于治疗甲癣的开发。这些研究包括局部用药后的耐受性评估以及全身毒性评估。由于该化合物是局部给药且吸收有限，因此在治疗剂量下通常耐受性良好，全身毒性极小。

[1]. Improved Methods for Assessing Therapeutic Potential of Antifungal Agents against Dermatophytes and Their Application in the Development of NP213, a Novel Onychomycosis Therapy Candidate.Antimicrob Agents Chemother. 2019 Apr 25;63(5). pii.

[2]. Sequential and Structural Aspects of Antifungal Peptides from Animals, Bacteria and Fungi Based on Bioinformatics Tools.Probiotics Antimicrob Proteins. 2016 Jun;8(2):85-101.

[3]. Novamycin®/NP339 Technology Summary.

[4]. NP213 (Novexatin®): A unique therapy candidate for onychomycosis with a differentiated safety and efficacy profile. Med Mycol. 2020 Nov 10;58(8):1064-1072.

NP213（Novexatin）是由NovaBiotics公司开发的第三代合成环状阳离子抗菌肽。目前，它正处于临床开发后期阶段（已完成I/IIa期临床试验），作为一种水基外用疗法，用于治疗轻度至中度甲癣。[1][2] NP213的设计基于指甲内源性宿主防御肽。它是一种高度亲水且带正电荷（净电荷+7）的环状肽，由精氨酸七聚体（7个氨基酸，均为精氨酸）组成。环状结构最大限度地减少了外蛋白酶的水解，而有限的序列多样性（仅包含RR键）使其仅易受极少数内蛋白酶的水解，从而解决了肽类药物易受蛋白水解的问题。 [1]
- NP213 的正电荷 (+7) 有利于其穿透指甲，因为指甲在生理条件下是一种带负电荷的水凝胶。其较小的尺寸（7 个氨基酸，而内源性 HDP 由 30-100 个氨基酸组成）也有助于其穿透指甲。[1]
- NP213 表现出膜溶解作用模式，可靶向真菌，而不受其代谢活性水平的影响。它会导致细胞膜通透性增加、细胞内容物丢失和细胞死亡。[1][2]
- 在一个优化的体外人指甲感染模型中，使用感染了毛癣菌属的全层人指甲碎片，每日涂抹 10% (w/v) 的 NP213，持续 28 天，可完全清除真菌感染。透射电镜（TEM）分析显示，经处理的指甲中真菌已死亡，细胞壁残留但无细胞内物质，证实了NP213能够渗透至指甲全层并保持生物活性。其效果优于8%环吡咯烷酮和5%阿莫罗芬指甲油，后两者在指甲基质中均显示出活真菌的存在。[1] - NP213成功根除了从临床确诊甲癣患者身上获取的离体甲癣指甲中的皮肤癣菌感染。每日使用10% NP213治疗28天后，与对照组相比，所有8个受试指甲样本中的皮肤癣菌负荷均显著降低（P < 0.0001）。[1] - NP213的研发凸显了使用生理相关测试方法的重要性。标准的体外药敏试验方法（例如CLSI）无法预测抗真菌药物在指甲内的疗效。使用改良的角蛋白培养基（0.5%人指甲粉溶于磷酸盐缓冲液）可获得更能反映指甲内活性的MIC值。如果没有这种改良的测试方法，使用标准方法获得的高MIC值可能会导致NP213的研发终止，尽管它现在已处于后期临床试验阶段。[1] - NP213是一种新型的、首创的甲癣治疗候选药物，它克服了现有疗法的局限性，包括角蛋白结合、指甲渗透性差以及口服抗真菌药物的副作用。[1][2] Novexatin（CAS：942577-31-3），也称为NP213，是一种合成的环状七肽抗菌肽，用于局部治疗甲癣。该肽的分子式为C₄₂H₈₄N₂₈O₇，分子量为1093.32 g/mol。该肽由七个精氨酸残基组成，呈环状结构。仅供研究和生产使用，不得用于人类治疗。

C42H84N28O7

1093.29976272583

1092.707

C, 46.14; H, 7.74; N, 35.87; O, 10.24

942577-31-3

NP213 TFA

16679727

Cyclo(Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg)
cyclo[L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl-L-arginyl]

Cyclo-RRRRRRR
(cyclo)-RRRRRRR-(cyclo)

Typically exists as solid at room temperature

-10.2

655

21

14

28

77

1710

7

O=C1[C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)NC([C@H](CCC/N=C(\N)/N)N1)=O)=O)=O)=O)=O)=O

NVZLKNHDHPPJHL-RMIXPHLWSA-N

InChI=1S/C42H84N28O7/c43-36(44)57-15-1-8-22-29(71)65-24(10-3-17-59-38(47)48)31(73)67-26(12-5-19-61-40(51)52)33(75)69-28(14-7-21-63-42(55)56)35(77)70-27(13-6-20-62-41(53)54)34(76)68-25(11-4-18-60-39(49)50)32(74)66-23(30(72)64-22)9-2-16-58-37(45)46/h22-28H,1-21H2,(H,64,72)(H,65,71)(H,66,74)(H,67,73)(H,68,76)(H,69,75)(H,70,77)(H4,43,44,57)(H4,45,46,58)(H4,47,48,59)(H4,49,50,60)(H4,51,52,61)(H4,53,54,62)(H4,55,56,63)/t22-,23-,24-,25-,26-,27-,28-/m0/s1

2-[3-[(2S,5S,8S,11S,14S,17S,20S)-5,8,11,14,17,20-hexakis[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-3,6,9,12,15,18,21-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclohenicos-2-yl]propyl]guanidine

NP 213; NP213; Novexatin; RefChem:927946; 942577-31-3; NP213; 2-[3-[(2S,5S,8S,11S,14S,17S,20S)-5,8,11,14,17,20-hexakis[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-3,6,9,12,15,18,21-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclohenicos-2-yl]propyl]guanidine; NP-213

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。