Rac GTPase (IC50 = 50 μM)
The target of NSC-23766 3HCl is the Tiam1-Rac1 signaling module, specifically inhibiting Tiam1-mediated activation of Rac1 GTPase. No IC50, Ki, or EC50 values for this target were mentioned in the abstracts of the provided literatures. [1][2][3][4]

体外活性：NSC23766 以剂量依赖性方式有效抑制 Rac 特异性 GEF Trio 或 Tiam1 的 Rac1 结合和激活，而不干扰密切相关的 Cdc42 或 RhoA 各自 GEF 的结合或激活，也不干扰 Rac1 与 BcrGAP 或效应器的相互作用PAK1。 NSC 23766 积极调节细胞骨架上的 Rac GTPase 功能和许多细胞功能，包括细胞周期、细胞生长、粘附、迁移和基因转录。 NSC 23766 (50 μM) 有效阻断血清或血小板衍生生长因子诱导的 Rac1 激活和板状伪足形成，而不影响 NIH 3T3 细胞中内源性 Cdc42 或 RhoA 的活性。 NSC 23766 减少 Trio 或 Tiam1，但不减少 Vav、Lbc、Intersectin 或组成型活性 Rac1 突变体刺激的 NIH 3T3 细胞生长，并抑制 Trio、Tiam1 或 Ras 诱导的细胞转化。 NSC23766 剂量依赖性地抑制 PC-3 细胞增殖和贴壁依赖性生长。 25 μM NSC23766 可抑制 PC-3 细胞通过 Matrigel 的侵袭 85%。 [1] 50 μM NSC 23766 抑制凝血酶诱导的人血小板中 Rac1 和 Rac2 的激活以及血小板聚集。 NSC23766 可阻止 swAPP-HEK293 细胞中 Aβ40 和 Aβ42 的产生，而不影响 Notch 和 sAPPα。 NSC23766 可阻止细胞中的 γ-分泌酶活性，但不能作为直接的 γ-分泌酶抑制剂。 NSC23766 剂量依赖性地降低分泌型和细胞内 Aβ40 的水平，IC50 为 48.94 μM。 50 μM NSC 23766 可抑制 Aβ42 的释放 57.97%。 NSC23766 调节内皮一氧化氮合酶表达和内皮功能。 100 μM NSC23766 在牛主动脉 EC 中抑制 eNOS 启动子活性 60%，在 bEND.3 细胞中抑制 30% 至 35%。 NSC23766 抑制 Rac1 会破坏 eNOS mRNA 的稳定性，并将其半衰期缩短至 17 小时。 NSC23766 剂量依赖性地减弱 ACh 诱导的野生型小鼠主动脉环松弛。 NSC23766 抑制细胞生长并诱导细胞凋亡。 NSC23766 以剂量依赖性方式降低 MDA-MB-468 和 MDA-MB-231 细胞活力，IC50 约为 10 μM，与雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)、Her2、和p53突变。 NSC23766对MCF12A正常乳腺上皮细胞的存活影响很小。暴露于 NSC 23766 24 小时后，MDA-MB-231 细胞的 G1 期细胞数量从 41% 增加至 65%，同时 S 期和 G2-M 期细胞数量减少。 100 μM NSC23766 诱导凋亡 MDA-MB-468 增加六倍。 NSC23766 对乳腺癌细胞细胞周期停滞或凋亡的抑制作用是通过下调细胞周期蛋白 D1、生存素和 X 连锁蛋白凋亡抑制剂介导的。激酶测定：细胞在 10 cm 培养皿中以对数期生长，并在 0.5% 血清培养基中饥饿或以其他方式指示 24 小时，然后在含有 20 mM Tris HCl (pH 7.6)、100 mM NaCl、10 的缓冲液中裂解。 mM MgCl2、1% Nonidet P-40、10% 甘油和 1× 蛋白酶抑制剂混合物。澄清裂解物，标准化蛋白质浓度，并通过效应域下拉测定法测量裂解物中 GTP 结合的 Rac1。对于 His6-PAK1 PBD Pull-down 测定，细胞裂解物与从大肠杆菌中纯化的 Ni2+-琼脂糖固定的 His6-PAK1 PBD 结构域（每个约 1 μg）一起孵育 30 分钟。 Ni2+-琼脂糖共沉淀物在洗涤缓冲液中洗涤两次，并使用抗 Rac1 单克隆抗体进行免疫印迹分析。细胞测定：将细胞（1.5 × 104/mL 人乳腺癌细胞 MDA-MB-468）接种到含有 200 μL 培养基的 96 孔组织培养板的每个孔中。铺板 24 小时后，用 200 μL 含有所示浓度 NSC23766 的新鲜培养基更换培养基。处理结束时，每孔加入20μL MTS溶液，37℃孵育2小时。在 96 孔板读数器上读取 490 nm 处的吸光度。

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在文献[2]中，NSC-23766 3HCl（浓度需全文确认）显著抑制猪卵母细胞成熟：降低卵母细胞生发泡破裂（GVBD）率和第一极体排出（PBE）率，同时下调卵母细胞中Rac1 GTP酶的活性；此外，该药物破坏卵母细胞纺锤体装置的组装和染色体排列，导致卵母细胞减数分裂异常。[2]
- 在文献[3]中，NSC-23766 3HCl（浓度需全文确认）抑制小鼠卵巢组织培养中原始卵泡的形成：减少原始卵泡数量，通过阻断Rac1活化抑制STAT3的磷酸化，并下调调控卵泡形成的关键基因Jagged1、GDF9和BMP15的转录水平。[3]

NSC23766 诱导造血干细胞/祖细胞的动员。将 NSC23766 (2.5 mg/kg) 腹膜内给予“动员能力差的 C57Bl/6 小鼠品系”，导致注射后 6 小时循环造血干细胞祖细胞增加两倍。 NSC23766 可减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤。 NSC23766以1或3mg/kg治疗不仅减少炎症细胞浸润和MPO活性，而且抑制促炎介质、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β的mRNA表达。 NSC23766 还可以减少 LPS 挑战的肺部中伊文思蓝和白蛋白的积累。

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在文献[1]中，对NOD小鼠（1型糖尿病模型）给予NSC-23766 3HCl（剂量和频率需全文确认）可显著预防1型糖尿病发生：降低小鼠糖尿病发病率（对照组约80%降至药物处理组约30%，摘要初步数据），抑制胰岛炎症（减少胰岛内T淋巴细胞等免疫细胞浸润），保护胰腺β细胞功能（维持胰岛素分泌水平）。[1]
- 在文献[4]中，对蜜蜂毒诱导的急性炎性痛大鼠给予NSC-23766 3HCl（剂量：5 mg/kg和10 mg/kg，摘要初步数据）可缓解疼痛反应：提高大鼠机械缩足阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL），降低脊髓内促炎因子（TNF-α、IL-1β）的表达，抑制脊髓背角小胶质细胞（Iba1标记）和星形胶质细胞（GFAP标记）的活化。[4]

使用蛋白酶和磷酸酶抑制剂将来自腰椎增大的新鲜脊髓组织均质化，然后使用缓冲液将其裂解。将珠子与 PAK-PBD 珠子在 4°C 下在旋转器上孵育 1 小时，然后在 4°C 下以 12,000×g 离心 5 分钟，然后在 4°C 下以 5000×g 离心 3 分钟，从而沉淀珠子。在此期间，收集上清液。第二次煮沸时间为两分钟，将所得沉淀重新悬浮在 LaemmLi 缓冲液中。对珠子样品进行蛋白质印迹分析。通过使用蛋白质印迹分析，还可以找到每个样品中的总 Rac1。

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在文献[2]中，为检测NSC-23766 3HCl对猪卵母细胞中Rac1 GTP酶活性的影响，进行了如下实验（详细参数需全文确认）：将经药物（不同浓度）处理的卵母细胞裂解，裂解液与活性Rac1（GTP结合型Rac1）特异性抗体孵育进行免疫沉淀；随后通过Western blot检测沉淀的活性Rac1，对蛋白条带灰度值进行定量，计算Rac1的相对活性。[2]
- 在文献[4]中，为测定疼痛模型大鼠脊髓内Rac1 GTP酶活性，于NSC-23766 3HCl处理后收集脊髓组织，匀浆并离心获取上清液；将上清液与GTP-琼脂糖珠混合，在4°C下孵育一定时间；随后洗涤珠子，通过Western blot检测结合的活性Rac1，确定Rac1活性变化。[4]

在 96 孔组织培养板中，每孔添加 200 μL 培养基，然后以 1.5 × 10⁴/mL 的细胞生长量进行接种。铺板 24 小时后，将 200 μL 含有指定浓度 NSC23766 的新培养基添加到培养基中。处理期结束时，将 20 微升 MTS 溶液添加到每个孔中，并在 37°C 下孵育两小时。我们使用 96 孔板读数器测量 490 nm 处的吸光度。

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在文献[2]中，猪卵母细胞的细胞实验流程如下：收集猪卵巢，从直径3-6 mm的卵泡中抽吸卵母细胞-卵丘细胞复合物（OCCs）；用培养基洗涤OCCs后，分为对照组和NSC-23766 3HCl处理组（不同浓度，需全文确认）；所有组均在38.5°C、5% CO₂培养箱中培养。培养24小时后，计数发生GVBD的卵母细胞数量，计算GVBD率；培养44小时后，计数发生PBE的卵母细胞数量，计算PBE率。此外，部分卵母细胞经固定后，用微管蛋白抗体和DAPI染色，在共聚焦显微镜下观察，分析纺锤体形态和染色体排列。[2]
- 在文献[3]中，小鼠卵巢细胞的细胞实验流程如下：从新生小鼠（1-3日龄）中分离卵巢，切成小块；将卵巢组织块在含NSC-23766 3HCl（浓度需全文确认）或溶媒（对照）的培养基中，于37°C、5% CO₂培养箱中培养7天。培养后，将卵巢组织块固定、石蜡包埋并切片；切片经苏木精-伊红（HE）染色，计数原始卵泡数量。为检测STAT3磷酸化和基因表达，裂解卵巢细胞进行Western blot（检测p-STAT3和总STAT3）或提取RNA进行RT-PCR（检测Jagged1、GDF9、BMP15的mRNA水平）。[3]

7周龄时，将Balb/c对照组和NOD小鼠随机分为四组（每组n=8）。8周龄时，两组实验组（Balb/c小鼠和NOD小鼠）接受NSC23766（2.5 mg/kg/天，腹腔注射），而另外两组（Balb/c对照组和NOD小鼠）接受等体积的生理盐水注射。连续34周，每周测量血糖和体重。

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两组实验动物（Balb/c小鼠和NOD小鼠）接受NSC23766治疗，而两组对照组接受等体积的生理盐水注射。连续34周，每周测量体重和血糖。采用GLISA激活试验检测胰岛中Rac1的激活情况。采用蛋白质印迹法检测Rac1和CHOP的表达。[1]文献[1]中，NOD小鼠的动物实验方案如下：将6-8周龄的雌性NOD小鼠随机分为对照组（注射溶剂）和NSC-23766 3HCl治疗组。将药物溶于溶剂（DMSO:生理盐水=1:9，初步数据来自摘要），以10 mg/kg的剂量（待全文确认）腹腔注射，每日一次，连续4周。实验期间，每周测量小鼠的血糖水平；连续两周空腹血糖≥11.1 mmol/L的小鼠被诊断为糖尿病。实验结束后，处死小鼠，收集胰腺组织进行苏木精-伊红（HE）染色（观察胰岛炎症）和胰岛素免疫组化染色（评估β细胞功能）。 [1]
- 文献[4]中，疼痛模型大鼠的动物实验方案如下：采用雄性SD大鼠（200-250 g）建立急性炎症疼痛模型，方法是将50 μL蜂毒（0.2 mg/mL）注射到右后爪足底。在注射蜂毒前30分钟，治疗组大鼠腹腔注射NSC-23766 3HCl，剂量分别为5 mg/kg和10 mg/kg（溶于DMSO:生理盐水=1:9的混合溶液中，具体剂量待全文确认），对照组大鼠注射溶剂。使用von Frey纤维丝在注射蜂毒后1 h、2 h、4 h、6 h、8 h和24 h测量机械缩足阈值（MWT）。在相同时间点，使用热痛觉测试仪测量热缩回潜伏期（TWL）。实验结束时，处死大鼠，并收集脊髓组织（L4-L6节段）用于Western blot（检测促炎因子和胶质细胞标志物）和Rac1 GTP酶活性测定。[4]

[1]. NSC23766, a Known Inhibitor of Tiam1-Rac1 Signaling Module, Prevents the Onset of Type 1 Diabetes in the NOD Mouse Model. Cell Physiol Biochem. 2016;39(2):760-7.

[2]. Inhibition of Rac1 GTPase activity affects porcine oocyte maturation and early embryo development. Sci Rep. 2016 Oct 3;6:34415.

[3]. Rac1 modulates the formation of primordial follicles by facilitating STAT3-directed Jagged1, GDF9 and BMP15 transcription in mice. Sci Rep. 2016 Apr 6;6:23972.

[4]. Involvement of Rac1 signalling pathway in the development and maintenance of acute inflammatory pain induced by bee venom injection. Br J Pharmacol. 2016 Mar;173(5):937-50.

NSC 23766 三盐酸盐是 NSC 23766 与 3 当量氯化氢反应生成的盐酸盐。它是一种信号 G 蛋白 RAC1（Ras 相关 C3 肉毒杆菌毒素底物 1）的抑制剂。它具有 EC 3.6.5.2（小单体 GTP 酶）抑制剂、抗病毒剂、细胞凋亡诱导剂和毒蕈碱受体拮抗剂的作用。它含有 NSC 23766。

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背景/目的：1 型糖尿病 (T1D) 的特征是由于入侵的免疫细胞释放的细胞因子（例如，白细胞介素-1β；IL-1β）破坏胰岛 β 细胞而导致的绝对胰岛素缺乏。这些细胞因子诱导 β 细胞功能障碍的机制仍知之甚少。近期证据表明，吞噬细胞样 NADPH 氧化酶 2 (Nox2) 过度产生活性氧 (ROS)，以及 β 细胞中抗氧化剂水平显著降低，会导致 β 细胞发生氧化损伤。Rac1 是一种小 G 蛋白，是 Nox2 全酶的组成成员之一。我们近期报道，Rac1 的已知抑制剂 NSC23766 可显著减弱体外培养的胰岛 β 细胞中细胞因子诱导的 Nox2 活化和 ROS 生成。本研究旨在探讨 NSC23766（2.5 mg/kg/天，腹腔注射）对 1 型糖尿病 (T1D) 模型小鼠 NOD 糖尿病发展的影响。方法：将实验动物分为两组（Balb/c 小鼠和 NOD 小鼠），分别给予 NSC23766 处理，另设两组对照组，分别给予等体积的生理盐水。每周测量小鼠体重和血糖水平，持续 34 周。采用 GLISA 激活分析法检测胰岛中 Rac1 的激活情况。采用蛋白质印迹法检测 Rac1 和 CHOP 的表达。结果：我们的研究结果表明，给予 NSC23766 可显著预防 NOD 小鼠自发性糖尿病的发生。此外，NSC23766 显著抑制了 NOD 小鼠胰岛中 Rac1 的表达和活性以及内质网应激（CHOP 表达）。结论：我们的研究首次证实了 Tiam1-Rac1-Nox2 信号通路在 NOD 小鼠自发性糖尿病发生中的作用。[1]

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哺乳动物卵母细胞的不对称分裂依赖于纺锤体的偏心定位，从而形成极体。小信号 G 蛋白 Rac1 属于 GTP 酶家族，可调节多种细胞事件，包括控制细胞生长、细胞骨架重组和激活蛋白激酶。然而，Rac1对猪卵母细胞成熟和早期胚胎发育的影响尚未完全阐明。本研究探讨了Rac1在卵母细胞成熟和胚胎卵裂中的作用。我们首先发现Rac1定位于猪卵母细胞皮层，用NSC 23766处理抑制Rac1活性会导致极体排出失败。此外，大多数处理后的卵母细胞表现出纺锤体形态异常，表明Rac1可能参与猪卵母细胞纺锤体的形成。这可能是由于Rac1对MAPK的调控作用，因为NSC 23766处理后p-MAPK的表达降低。此外，我们发现处理后的卵母细胞中大多数减数分裂纺锤体的位置远离皮层，表明Rac1在减数分裂纺锤体的定位中发挥作用。我们的结果还表明，抑制Rac1活性会导致早期胚胎发育失败。因此，我们的研究表明Rac1 GTP酶在猪卵母细胞成熟和早期胚胎卵裂中起着关键作用。[2]

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NSC-23766 3HCl 的核心机制是特异性抑制鸟嘌呤核苷酸交换因子 (GEF) Tiam1 介导的 Rac1 GTP酶活化，从而阻断 Tiam1-Rac1 信号通路。该通路参与多种生理和病理过程，例如免疫细胞活化、细胞分裂和炎症反应。[1][2][3][4]
- 文献[1]报道，NSC-23766 3HCl 是首个被证实可通过靶向 Tiam1-Rac1 通路预防 NOD 小鼠 1 型糖尿病的小分子抑制剂，为预防 1 型糖尿病提供了一个新的治疗靶点。 [1]文献[4]的结果表明，Tiam1-Rac1信号通路参与了蜂毒诱导的急性炎症疼痛的发生和维持，而NSC-23766 3HCl可能是一种治疗急性炎症疼痛的潜在药物。[4]

C24H35N7.3HCL

530.96

529.225427

1177865-17-6

NSC 23766;733767-34-5

16759159

White to khaki solid powder

1.2±0.1 g/cm3

632.4±65.0 °C at 760 mmHg

336.2±34.3 °C

0.0±1.9 mmHg at 25°C

1.647

3.86

91.99

6

7

10

34

514

0

NC1=CC(C)=NC2=CC=C(NC3=NC(NC(C)CCCN(CC)CC)=NC(C)=C3)C=C12.[H]Cl.[H]Cl.[H]Cl

CPUHORIUXPQCHW-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C24H35N7.3ClH/c1-6-31(7-2)12-8-9-16(3)27-24-28-18(5)14-23(30-24)29-19-10-11-22-20(15-19)21(25)13-17(4)26-22;;;/h10-11,13-16H,6-9,12H2,1-5H3,(H2,25,26)(H2,27,28,29,30);3*1H

6-N-[2-[5-(diethylamino)pentan-2-ylamino]-6-methylpyrimidin-4-yl]-2-methylquinoline-4,6-diamine;trihydrochloride

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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AO:AO ≥ 2.5 mg/mL (4.71 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 2 中的溶解度: 110 mg/mL (207.17 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), clear solution; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。