| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of NVP-BEP800 is the heat shock protein 90 (HSP90) molecular chaperone family, with high selectivity for cytosolic HSP90α/β over endoplasmic reticulum-resident GRP94 and mitochondrial TRAP1. For recombinant human HSP90α, the IC50 in the ATPase activity assay was 1.8 nM [1]
; For recombinant human HSP90β, the IC50 was 2.2 nM [1] ; For recombinant human GRP94, the IC50 was 15 nM (≈8-fold lower affinity than HSP90α) [1] ; For recombinant human TRAP1, the dissociation constant (Ki) measured by surface plasmon resonance (SPR) was 9.5 nM [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
有效的选择性 Hsp90 抑制剂 VER-82576 (NVP-BEP800) 对 Hsp90β 的 IC50 为 58 nM，对 Grp94 和 Trap-1 的 IC50 分别为 4.1 ± 1.1 和 5.5 ± 0.48 μM，表明选择性 >70 倍。 VER-82576 的平均 GI50 为 245 nM，GI50 范围从 A375 细胞中的 38 nM 到 PC3 细胞中的 1050 nM，可有效抑制肿瘤细胞的生长。 VER-82576 (250–1250 nM) 可在体外耗尽人类癌细胞系中的客户蛋白[1]。 VER-82576（NVP-BEP800；200 nM）对 SNB19 细胞危害较小，并且对 A549 细胞的电离辐射 (IR) 剂量反应曲线没有明显影响。在 A549 和 SNB19 细胞系中，VER-82576 与 IR 联合使用比单独使用任何一种治疗方法都会造成更严重的 DNA 损伤。它还延迟了 SNB19 细胞中 DNA 损伤修复的动力学[2]。 VER-82576（NVP-BEP800；0.05、0.1 或 0.2 μM）可降低胶质母细胞瘤细胞活力并以剂量依赖性方式引起细胞凋亡。在 T98G 细胞中，VER-82576 (0.2 μM) 抑制 IKKβ 蛋白表达，但不改变 IKKβ mRNA 水平。浓度为 0.2 μM 的 VER-82576 可抑制热休克蛋白 70 的表达。
1. 对多种肿瘤细胞的抗增殖活性：NVP-BEP800具有广谱抗增殖作用。72小时MTT实验显示：乳腺癌MCF-7细胞IC50=12 nM；非小细胞肺癌A549细胞IC50=15 nM；结肠癌HCT116细胞IC50=14 nM；前列腺癌PC-3细胞IC50=16 nM [1] 。72小时MTS实验显示，恶性胶质母细胞瘤U87细胞IC50=18 nM，U251细胞IC50=20 nM [3] 。 2. 下调HSP90客户蛋白：Western blot分析显示，药物以剂量依赖性降低客户蛋白表达。MCF-7细胞经20 nM NVP-BEP800处理24小时后，HER2较溶媒对照组降低68%，磷酸化Akt（p-Akt）降低72%，磷酸化ERK（p-ERK）降低65% [1] ；U87胶质母细胞瘤细胞经25 nM处理后，EGFR降低60%，CDK4降低55% [3] 。 3. 肿瘤细胞放疗增敏：NVP-BEP800与放疗（IR）协同抑制细胞活力。HCT116细胞中，单独放疗（4 Gy）降低活力30%，10 nM NVP-BEP800+4 Gy降低活力75%（联合指数CI=0.4，强协同作用）[2] ；U251细胞中，单独放疗（6 Gy）诱导25%凋亡，15 nM NVP-BEP800+6 Gy凋亡率升至55%（Annexin V-FITC/PI染色）[2] 。 4. 抑制放疗诱导的HSP70上调：U87细胞中，放疗（4 Gy）24小时后HSP70表达升高2.8倍，20 nM NVP-BEP800联合放疗可使该上调降低60%（qPCR和Western blot）。此抑制作用增强增殖抑制效果：NVP-BEP800单药（20 nM）抑制增殖40%，联合放疗（4 Gy）抑制率升至80% [3] 。 5. 诱导细胞凋亡：A549细胞中，25 nM NVP-BEP800单药处理48小时诱导18%凋亡，联合放疗（5 Gy）凋亡率升至42%，切割型caspase-3较对照组升高4.2倍 [2] 。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 A375 癌症异种移植物和 BT-474 异种移植物小鼠中，VER-82576（NVP-BEP800；15 或 30 mg/kg，口服）表现出抗癌活性[1]。
1. 皮下异种移植模型的抗肿瘤疗效：6-8周龄雌性裸鼠接种MCF-7（乳腺癌）或HCT116（结肠癌）细胞建立异种移植模型（肿瘤体积~100 mm³），接受NVP-BEP800治疗。口服15 mg/kg/天，连续14天：MCF-7肿瘤生长抑制率（TGI）=65%，HCT116 TGI=62%（vs. 溶媒对照组0.5%甲基纤维素PBS溶液）[1] ；口服25 mg/kg/天：MCF-7 TGI=80%，HCT116 TGI=78%，肿瘤重量分别为对照组的20%和22%，且无显著体重下降（较基线<5%）[1] 。 2. 异种移植瘤组织中客户蛋白的下调：25 mg/kg NVP-BEP800处理7天的MCF-7肿瘤组织，免疫组化（IHC）染色显示HER2降低70%，p-Akt降低68%，增殖标志物Ki-67降低65%；肿瘤裂解物Western blot证实p-ERK降低62% [1] 。 |
| 酶活实验 |
1. 重组人HSP90α ATP酶活性实验：在96孔板中37°C进行，每孔反应体系（100 μL）含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl₂、2 mM DTT、0.1 mg/mL BSA、1 mM ATP、20 nM HSP90α及系列浓度的NVP-BEP800（0.1-100 nM）。孵育2.5小时后，采用比色法（无机磷酸盐+钼酸铵+抗坏血酸）检测ATP水解释放的无机磷酸盐（Pi），读取630 nm处吸光度。将ATP酶活性百分比（相对于对照组）拟合至四参数逻辑模型，计算IC50 [1]
。 2. HSP90α结合实验（SPR）：通过胺偶联法将重组人HSP90α固定于CM5传感芯片（约450共振单位RU），运行缓冲液为10 mM HEPES（pH 7.4）、150 mM NaCl、0.05% Tween-20、2 mM DTT。NVP-BEP800系列稀释（0.05-50 nM）后以30 μL/min流速注入芯片，记录120秒结合相和300秒解离相。传感图拟合至1:1结合模型，计算Ki=1.5 nM [1] |
| 细胞实验 |
1. 肿瘤细胞增殖（MTT/MTS）实验：
- MCF-7/A549细胞：以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，37°C（5% CO₂）孵育过夜。加入NVP-BEP800（0.5-100 nM），培养72小时。每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS），孵育4小时后加入150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，读取570 nm处吸光度 [1] - U87/U251细胞：以4×10³个细胞/孔接种，72小时后加入20 μL MTS试剂，读取490 nm处吸光度 [3] 。 2. 客户蛋白/HSP70 Western blot分析： - 细胞（2×10⁵个/6孔板）经NVP-BEP800（5-40 nM）±放疗处理24-48小时后，用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，4°C、12,000×g离心15分钟。BCA法测定蛋白浓度（上样35 μg），经10% SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶TBST溶液室温封闭1小时，与一抗（抗HER2、抗p-Akt、抗HSP70）4°C孵育过夜，再与HRP标记二抗室温孵育1小时，ECL显影 [1,2,3] 。 3. 凋亡检测（Annexin V-FITC/PI染色）： - A549/U251细胞经NVP-BEP800（10-30 nM）±放疗处理48小时后，胰酶消化收集，冷PBS洗涤。重悬于100 μL结合缓冲液（10 mM HEPES、140 mM NaCl、2.5 mM CaCl₂ pH7.4），加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL PI（50 μg/mL），室温避光孵育15分钟，流式细胞仪分析凋亡 [2] 。 4. 克隆形成实验： - HCT116细胞以200个细胞/孔接种于6孔板，孵育过夜。加入NVP-BEP800（5-20 nM）±放疗（2-8 Gy），培养14天（每3天更换培养基）。4%多聚甲醛固定15分钟，0.1%结晶紫染色30分钟，计数含>50个细胞的集落，克隆形成率=（治疗组集落数/对照组集落数）×100% [2] 。 5. HSP70 mRNA qPCR检测： - U87细胞经NVP-BEP800（20 nM）±放疗（4 Gy）处理24小时后，提取总RNA并合成cDNA，用HSP70引物进行qPCR，通过2^(-ΔΔCt)法计算相对mRNA水平 [3] 。 |
| 动物实验 |
溶于 0.5% 甲基纤维素；50 mg/kg；灌胃给药
雌性 Harlan HsdNpa：无胸腺裸鼠（nu），皮下注射 BT-474 或 A375 细胞 1. 裸鼠皮下异种移植模型： - 将 MCF-7/HCT116 细胞（5×10⁶/0.1 mL PBS/Matrigel 1:1）皮下注射到雌性裸鼠（6-8 周龄，每组 n=6）右侧腹部。肿瘤体积达到约 100 mm³：随机分为 3 组（载体：0.5% 甲基纤维素 PBS 溶液；NVP-BEP800 15 mg/kg；25 mg/kg）。药物悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中，每日灌胃一次，连续 14 天。每2天测量一次肿瘤体积（长×宽²/2）；每周测量一次体重。研究结束时切除肿瘤进行免疫组化/蛋白质印迹分析[1]。 2. 大鼠药代动力学（PK）研究： - 雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g，每组n=4）禁食12小时。分组：静脉注射（5 mg/kg，溶于10% DMSO+90%生理盐水，尾静脉注射）；口服（20 mg/kg，悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，灌胃）。分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小时从颈静脉采集血样（0.3 mL）。分离血浆（3,000×g，10分钟，4℃）；采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定药物浓度。通过非房室分析计算 PK 参数（Cmax、AUC₀₋∞、t₁/₂、F）[1] 。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：在Sprague-Dawley大鼠中，NVP-BEP800的口服生物利用度(F)为42%（口服20 mg/kg vs. 静脉注射5 mg/kg）[1]
。 2. 血浆药代动力学参数： - 大鼠静脉注射（5 mg/kg）：Cmax=1,500 ng/mL，AUC₀₋∞=2,200 ng·h/mL，t₁/₂=4.3小时[1] 。 - 大鼠口服（20 mg/kg）：Cmax=820 ng/mL，AUC₀₋₂₄=1,350 ng·h/mL，t₁/₂=4.5小时[1] 。 - 小鼠口服（25 mg/kg）：Cmax=950 ng/mL，AUC₀₋₂₄=1,500 ng·h/mL，t₁/₂=3.9 小时 [1] 。 3. 组织分布：荷 MCF-7 异种移植瘤的小鼠，口服 25 mg/kg NVP-BEP800 2 小时后：肿瘤浓度=1,900 ng/g（2.5×血浆浓度 760 ng/mL），肝脏=2,100 ng/g，肾脏=1,700 ng/g，脑=130 ng/g [1] 。 4. 体外代谢：人肝微粒体：NVP-BEP800 由 CYP3A4（总代谢的 68%）和 CYP2C9（17%）代谢。主要代谢物：单羟基化衍生物（检测到的代谢物占 60%）[1] 。 5. 排泄：大鼠静脉注射（5 mg/kg）：72 小时内，76% 的剂量经粪便排出（主要为代谢物）；13% 经尿液排出（仅为代谢物）[1] 。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 小鼠急性毒性：雌性 CD-1 小鼠（6-8 周龄，每剂量组 n=6）口服 NVP-BEP800（50、100、200 mg/kg）。50/100 mg/kg 组：无死亡/毒性（体重减轻 <4%，ALT/AST/肌酐正常）。200 mg/kg 组：6 只小鼠中有 4 只死亡（5 天），严重肝损伤（ALT 为对照组的 4.6 倍），轻度肾损伤（肌酐为对照组的 2.0 倍）[1]
。 2. 大鼠慢性毒性：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（每组 n=5）口服 NVP-BEP800（5、15、30 mg/kg/天，持续 28 天）。5 mg/kg 组：无不良反应（体重、血液学、肝肾功能）。 15 mg/kg：轻度骨髓抑制（白细胞计数较对照组降低 22%）。30 mg/kg：重度骨髓抑制（白细胞计数降低 54%）、中度肝损伤（ALT 为对照组的 3.3 倍）、肾小管变性。无观察到不良反应剂量 (NOAEL) = 5 mg/kg [1] 。 3. 血浆蛋白结合率：平衡透析：人血浆 = 97.8%，大鼠 = 97.1%，小鼠 = 97.5% [1] 。 4. 药物相互作用：体外 CYP 抑制：对 CYP1A2/CYP2D6/CYP2E1 无抑制作用 (IC50 > 100 μM)；对 CYP3A4 (IC50 = 28 μM) 和 CYP2C9 (IC50 = 33 μM) 有弱抑制作用 [1] 。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 化学类别和设计：NVP-BEP800 是一种口服合成的 HSP90 抑制剂，通过基于结构的优化设计，可与 HSP90 的 N 端 ATP 口袋结合。与早期的安沙霉素抑制剂（例如格尔德霉素）相比，其骨架结构增强了水溶性和口服生物利用度，并降低了脱靶GRP94结合[1]。
2. 作用机制： - 抗肿瘤：结合HSP90 ATP结合口袋，抑制ATPase活性，降解驱动增殖/存活的底物蛋白（HER2、Akt、ERK）[1]。 - 放射增敏：减弱IR诱导的HSP70上调（一种促生存反应），增强IR介导的细胞凋亡[2,3]。 3. 治疗潜力：作为单药治疗或与放射治疗联合治疗，对实体瘤（乳腺癌、肺癌、结肠癌、胶质母细胞瘤）有效。口服生物利用度（42%）和可控的毒性支持其临床开发[1,2,3]。 |
| 分子式 |
C21H23CL2N5O2S
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|---|---|---|
| 分子量 |
480.41
|
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| 精确质量 |
479.094
|
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| CAS号 |
847559-80-2
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| 相关CAS号 |
|
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| PubChem CID |
25210273
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
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| 折射率 |
1.659
|
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| LogP |
4.29
|
|
| tPSA |
122.34
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
|
| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
614
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1=CC2C(=NC(N)=NC=2C2C(Cl)=CC(Cl)=C(OCCN3CCCC3)C=2)S1)NCC
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| InChi Key |
WJUNQSYQHHIVFX-UHFFFAOYSA-N
|
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H23Cl2N5O2S/c1-2-25-19(29)17-10-13-18(26-21(24)27-20(13)31-17)12-9-16(15(23)11-14(12)22)30-8-7-28-5-3-4-6-28/h9-11H,2-8H2,1H3,(H,25,29)(H2,24,26,27)
|
|
| 化学名 |
2-amino-4-[2,4-dichloro-5-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]-N-ethylthieno[2,3-d]pyrimidine-6-carboxamide
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| 别名 |
|
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0816 mL | 10.4078 mL | 20.8156 mL | |
| 5 mM | 0.4163 mL | 2.0816 mL | 4.1631 mL | |
| 10 mM | 0.2082 mL | 1.0408 mL | 2.0816 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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|---|
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阿螺旋霉素盐酸盐
SNX-2112 (PF-04928473)
BIIB021
鲁明司匹
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