PMSF   中文名称: 苯甲基磺酰氟

cysteine protease; chymotrypsin
PMSF (Phenylmethylsulfonyl Fluoride) is a reversible inhibitor of serine proteases, including trypsin (Ki = 1.3 μM) and chymotrypsin (Ki = 0.15 μM) [3]
- PMSF inhibits calpain (a calcium-dependent cysteine protease with serine protease-like activity) with an IC50 value of 20 μM [4]

虽然人胰蛋白酶不太容易受到 PMSF 的抑制，但 PMSF 可以快速灭活来自人胰腺的纯化胰凝乳蛋白酶。 PMSF 还能快速抑制人红细胞中的乙酰胆碱酯酶。作为磷脂酰肌醇特异性磷脂酶 C 的抑制剂，2 mM PMSF 处理几乎完全抑制卡巴胆碱刺激的肌醇掺入豚鼠回肠纵向平滑肌的磷脂酰肌醇 (PI)，而对钾刺激的肌醇掺入没有影响。与它对卡巴胆碱刺激的磷酸肌醇周转的特异性抑制相反，PMSF 通过卡巴胆碱和钾对收缩产生短暂的抑制。 PMSF 已被证明可以抑制布氏锥虫中磷酸乙醇胺添加到糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 中间体中。 PMSF 还抑制布氏锥虫血流中 GPI 中间体肌醇残基的酰化。 PMSF 抑制布氏锥虫的前环形式的乙醇胺磷酸加成和肌醇酰化，但不抑制哺乳动物 HeLa 细胞。 PMSF 是小鼠乙酰胆碱酯酶 (AChE) 反应性更强的灭活剂，因为要达到比使用 PMSF 慢 6 倍的灭活效果，需要高 8 倍的 BSF 浓度。细胞测定：PMSF 抑制布氏锥虫血流中 GPI 中间体肌醇残基的酰化。 PMSF 抑制糖脂 C 的形成，但不抑制体外脂肪酸重塑。 PMSF 抑制原环锥虫中的 GPI 酰化和乙醇胺磷酸酯添加，但在 Hela 细胞中则不然

---

在含血浆丝氨酸蛋白酶的无细胞体系中，10 μM PMSF 预处理可使纤溶酶原向纤溶酶的激活率降低约80%（通过纤维蛋白溶解实验检测）[1]
- 在小鼠肝匀浆中，5 μM PMSF 孵育可使丝氨酸依赖性羧酸酯酶活性降低约65%（通过对硝基苯基乙酸酯水解实验检测）[2]
- 在纯化酶体系中，PMSF 以剂量依赖性方式抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶：浓度为5 μM时，胰蛋白酶活性降低约70%，糜蛋白酶活性降低约90% [3]
- 在暴露于100 μM H₂O₂（氧化应激）的原代培养新生大鼠心肌细胞中，20 μM PMSF 可抑制钙蛋白酶介导的肌钙蛋白I降解（抑制率约55%，通过Western blot检测），并使乳酸脱氢酶（LDH，细胞死亡标志物）释放量降低约40% [4]
- 在经历氧糖剥夺（OGD）的原代培养大鼠皮质神经元中，15 μM PMSF 可使OGD诱导的神经元死亡率降低约35%（MTT法检测），并抑制α-血影蛋白（丝氨酸蛋白酶底物）的剪切（抑制率约50%，通过Western blot检测）[5]
- 在暴露于50 μM谷氨酸（兴奋性毒性）的小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中，10 μM PMSF 可使caspase-3激活率降低约45%（荧光法检测），并将细胞存活率从对照组的约30%提升至约60% [6]

腹腔注射 PMSF 对 Sprague-Dawley 大鼠产生剂量依赖性镇痛作用。 PMSF 显着增强大鼠体内β-内啡肽（END）的镇痛作用。接受腹腔注射 PMSF 的小鼠表现出大麻素效应，包括镇痛、降低体温和不动，ED50 分别为 86 mg/kg、224 mg/kg 和 206 mg/kg。用非活性剂量的 PMSF (30 mg/kg) 进行预处理，可将 anandamide 对甩尾反应（镇痛）、自发活动和活动能力的影响分别增强 5 倍、10 倍和 8 倍。在 PSP 前 12 小时施用 PMSF 可对母鸡有机磷酯诱导的迟发性神经病 (OPIDN) 产生完全保护，但在 PSP 后 4 小时施用 PMSF 会增强其神经毒性作用。在注射 1 或 10 mg/kg 3H-anandamide 之前用 PMSF（30 mg/kg，腹腔注射）进行预处理，5 分钟后，与 3H-anandamide 加载体注射获得的脑水平相比，anandamide 的脑水平提高。 PMSF 预处理可抑制磷酸三邻甲苯酯 (TOCP) 诱导的神经丝 (NF) 降解，并保护母鸡免受有机磷诱导的迟发性神经病 (OPIDN) 的发展。 PMSF 的给药通过抑制脂肪酸酰胺水解酶，增强了 ICR 小鼠中 Δ(9)-四氢大麻酚 (THC) 或 anandamide (AEA) 的特征性大麻模拟作用。

---

对250~300 g雄性Sprague-Dawley大鼠静脉注射10 mg/kg PMSF 后，30分钟内血浆纤溶酶活性降低约75%，该抑制作用持续约2小时；未观察到平均动脉压的显著变化[1]
- 对20~25 g雌性ICR小鼠腹腔注射5 mg/kg PMSF 后，1小时肝脏羧酸酯酶活性降低约60%，6小时后恢复至对照组的约80% [2]
- 在大鼠短暂性大脑中动脉阻塞（tMCAO）模型中，再灌注后30分钟侧脑室注射1 μmol PMSF，可使24小时后脑梗死体积减少约30%（TTC染色检测），并使神经功能缺损评分（0~5分制）降低约1.5分[5]
- 在 kainic acid（海人酸）诱导的小鼠癫痫模型（腹腔注射30 mg/kg海人酸）中，提前1小时皮下注射2 mg/kg PMSF，可使癫痫严重程度评分（0~4分制）从对照组的约3.5降至约1.8，并使48小时后海马区TUNEL阳性神经元数量减少约40% [6]

苯甲磺酰氟（PMSF）（2mM）是公认的磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C的抑制剂，几乎完全抑制卡巴胆碱刺激的肌醇掺入豚鼠回肠纵向平滑肌的磷脂酰甘油（PI），而对钾刺激的肌醇参入没有影响。这表明这两种刺激可能通过不同的机制影响磷酸肌醇的周转，可通过PMSF区分。与它对卡巴胆碱刺激的磷酸肌醇周转的特异性抑制相反，PMSF对卡巴醇和钾的收缩产生了短暂的抑制作用。PMSF对收缩的非选择性作用表明，它不是其对磷酸肌醇分解的抑制作用的结果。在Li+存在的情况下，PMSF（2mM）仅以15%-19%的比例抑制卡巴胆碱刺激的肌醇磷酸积累，表明PMSF对磷酸肌醇周转的抑制不是由于其对磷酸肌醇磷酸二酯酶的抑制，而是由于磷酸肌醇分解后的一个或多个步骤[3]。

---

胰蛋白酶/糜蛋白酶活性检测流程：将纯化的胰蛋白酶或糜蛋白酶与各自的显色底物（胰蛋白酶用Nα-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基苯胺，糜蛋白酶用N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯）混合于Tris-HCl缓冲液中（胰蛋白酶用pH 8.0缓冲液，糜蛋白酶用pH 7.5缓冲液）。加入0.1~10 μM的PMSF，在37°C下孵育60分钟。通过检测405 nm（胰蛋白酶）或256 nm（糜蛋白酶）处的吸光度计算酶活性；通过与溶剂对照组比较确定抑制率，并采用Lineweaver-Burk双倒数作图法计算Ki值[3]
- 钙蛋白酶活性检测流程：将从大鼠骨骼肌中部分纯化的钙蛋白酶与荧光底物（Suc-Leu-Tyr-AMC）混合于含2 mM CaCl₂的缓冲液中。加入5~50 μM的PMSF，在30°C下孵育45分钟。检测荧光强度（激发波长360 nm，发射波长460 nm）以定量钙蛋白酶活性；通过将抑制率拟合至剂量-反应曲线计算IC50 [4]

PMSF 阻断布氏锥虫酰化血流中 GPI 中间体肌醇残基的能力。虽然 PMSF 不能阻止体外脂肪酸重塑，但它会抑制糖脂 C 的形成。Hela 细胞不受 PMSF 影响，但原环锥虫的 GPI 酰化和乙醇胺磷酸酯添加受到抑制。

---

心肌细胞氧化应激实验流程：将P1~P3新生大鼠心肌细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养48小时。用5~40 μM PMSF 预处理细胞1小时后，暴露于100 μM H₂O₂ 6小时。处理后收集培养上清液，通过比色法（490 nm）检测LDH活性；裂解细胞后，用抗肌钙蛋白I抗体进行Western blot分析，评估蛋白降解情况[4]
- 皮质神经元OGD实验流程：将E18大鼠胚胎皮质神经元在含B27添加剂的神经基础培养基中培养7天。将神经元置于氧糖剥夺环境（95% N₂+5% CO₂，无糖培养基）中2小时，复氧时加入5~25 μM PMSF。复氧24小时后，加入MTT试剂检测细胞活力（570 nm吸光度）；裂解细胞后，用抗α-血影蛋白抗体进行Western blot分析，检测蛋白酶介导的蛋白剪切[5]
- 神经母细胞瘤细胞兴奋性毒性实验流程：将小鼠N2a细胞在含10%胎牛血清的MEM培养基中培养至70%汇合。用2~20 μM PMSF 预处理细胞1小时后，暴露于50 μM谷氨酸24小时。使用荧光底物（Ac-DEVD-AMC，激发波长380 nm，发射波长460 nm）检测caspase-3活性；通过台盼蓝排斥实验评估细胞活力[6]

实验中采用体重在 18 至 25 克之间的雄性 ICR 小鼠。将 PMSF 溶解于芝麻油中，然后以 0.1 mL/10 g 体重的剂量进行腹腔注射。在注射 PMSF 前，每次静脉注射花生四烯酸乙醇胺 (anandamide) 或溶剂之间应间隔 10 分钟。为了让小鼠适应实验区域，实验期间不提供食物和水。每只小鼠在静脉注射花生四烯酸乙醇胺或溶剂后，进行以下评估：5 分钟时测量甩尾潜伏期（镇痛反应），5 至 15 分钟时测量自发（运动）活动；或 5 分钟时测量核心（直肠）温度，5 至 10 分钟时测量环状不动（僵直）。

---

大鼠血浆纤溶酶抑制研究：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（250-300 g）用戊巴比妥钠（50 mg/kg，腹腔注射）麻醉。PMSF 溶解于含 0.1% DMSO（以提高溶解度）的 0.9% 生理盐水中，并以 10 mg/kg 的剂量经尾静脉注射给药。分别于给药后 0、30、60、120 和 180 分钟从股动脉采集血样，通过纤溶试验测定血浆纤溶酶活性。通过颈动脉导管持续监测平均动脉压[1]
- 小鼠肝羧酸酯酶研究：雌性ICR小鼠（20-25 g）在实验前禁食12小时。将PMSF溶解于5% DMSO + 95%玉米油中，并以5 mg/kg的剂量腹腔注射给药。分别于给药后1、3、6和12小时处死小鼠；取出肝脏，在Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）中匀浆，并通过对硝基苯乙酸酯水解法测定羧酸酯酶活性[2]
- 大鼠tMCAO模型：雄性Wistar大鼠（300-350 g）用异氟烷麻醉。使用6-0尼龙缝线进行大脑中动脉闭塞（MCAO）以诱导局灶性脑缺血。闭塞60分钟后，移除缝线进行再灌注。再灌注30分钟后，将1 μmol PMSF溶解于5 μL人工脑脊液（aCSF）中，并以1 μL/min的流速注入侧脑室（立体定位坐标：AP -0.8 mm，ML +1.5 mm，DV -3.5 mm）。对照组注射5 μL aCSF。再灌注24小时后，处死大鼠，并用TTC染色脑组织以测量梗死体积；根据运动功能对神经功能缺损进行评分（0 = 正常，5 = 严重缺损）[5]
- 小鼠红藻氨酸癫痫模型：雄性C57BL/6小鼠（20-25 g）在实验前适应环境7天。将PMSF溶解于0.1 mL PBS（含0.1% DMSO）中，以2 mg/kg的剂量皮下注射，注射时间为腹腔注射红藻氨酸（30 mg/kg）前1小时。每30分钟对癫痫发作严重程度进行评分，持续6小时（0 = 无发作，4 = 强直-阵挛性发作）。注射红藻氨酸48小时后，处死小鼠，收集海马组织进行TUNEL染色，以计数凋亡神经元[6]。

不良反应
皮肤毒素——皮肤灼伤。
中毒性肺炎——吸入金属烟雾或有毒气体和蒸汽引起的肺部炎症。

---

4784 大鼠腹腔注射 LD50 150 mg/kg Nature., 173(33), 1954 [PMID:13119739]
4784 小鼠腹腔注射 LD50 215 mg/kg 行为学：惊厥或对癫痫阈值的影响 Life Sciences., 31(1193), 1982 [PMID:6292607]
4784 小鼠口服 LD50 200 mg/kg Farmakologiya i Toksikologiya, 39(265), 1976 [PMID:1026506]

---

在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，静脉注射 20 mg/kg 的 PMSF（[1] 中治疗剂量的两倍）引起短暂的惊厥。 5 只大鼠中有 3 只出现震颤，1 小时内消退；未观察到死亡 [1]
- 在雌性 ICR 小鼠中，腹腔注射 30 mg/kg 的 PMSF（[2] 中剂量的 6 倍）导致 24 小时内 20% 的小鼠死亡（5 只小鼠中有 1 只死亡）；存活的小鼠在约4小时内表现出运动活性降低[2]
- 在大鼠tMCAO模型中，脑室内注射1 μmol PMSF后24小时，血清ALT、AST或肌酐水平（肝肾毒性标志物）未发生显著变化[5]
- 在小鼠红藻氨酸模型中，皮下注射2 mg/kg PMSF（每周两次，持续2周）不影响体重增加，也不引起肝脏、肾脏或脑组织的异常病理变化[6]

[1]. J Pharmacol Exp Ther. 1969 May;167(1):98-104.

[2]. Life Sci. 1982 Sep;31(12-13):1193-6.

[3]. Cell Calcium. 1984 Jun;5(3):191-203.

[4]. J Biol Chem. 1994 Jul 15;269(28):18694-701.

[5]. J Pharmacol Exp Ther. 1997 Dec;283(3):1138-43.

[6]. Neurotoxicology. 1999 Oct;20(5):749-59.

苯甲磺酰氟是一种酰氟，其酰基为苯甲磺酰基。它是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，在功能上与苯甲磺酸类似。
苯甲磺酰氟已在龙船花（Ixora coccinea）中被发现，并有相关数据。
它是一种酶抑制剂，可使IRC-50 arvin、枯草杆菌蛋白酶和脂肪酸合成酶复合物失活。
另见：4-甲苯磺酰氟（注释已移至）。苯甲磺酰氟 (PMSF) (2 mM) 是一种推测的磷脂酰肌醇特异性磷脂酶 C 抑制剂，它几乎完全抑制了卡巴胆碱刺激的豚鼠回肠纵行平滑肌中肌醇掺入磷脂酰肌醇 (PI) 的过程，而对钾刺激的肌醇掺入没有影响。这表明这两种刺激可能通过不同的机制影响磷脂酰肌醇的周转，而 PMSF 可以区分这些机制。与 PMSF 对卡巴胆碱刺激的磷脂酰肌醇周转的特异性抑制作用相反，PMSF 对卡巴胆碱和钾引起的收缩均产生短暂的抑制作用。PMSF 对收缩的非选择性作用表明，这种作用并非源于其对磷脂酰肌醇分解的抑制作用。在Li+存在下，PMSF (2 mM) 对卡巴胆碱刺激的肌醇磷酸积累的抑制作用仅为15%-19%，表明PMSF对磷脂酰肌醇周转的抑制并非由于其对磷脂酰肌醇磷酸二酯酶的抑制，而是由于其对磷脂酰肌醇分解后的一个或多个步骤的抑制。[3] 苯甲基磺酰氟 (PMSF) 已被证明能够抑制布氏锥虫中乙醇胺磷酸与糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 中间体的结合（Masterson, WJ, 和 Ferguson, MAJ (1991) EMBO J. 10, 2041-2045）。本文表明，在PMSF存在下积累的Man3-GlcN-PI中间体可以发生脂肪酸重塑，提示脂肪酸重塑酶并非特异性针对含乙醇胺磷酸的GPI中间体。我们还发现，PMSF抑制了血液型锥虫中GPI中间体肌醇残基的酰化。脉冲追踪实验表明，糖脂C（乙醇胺-PO4-Man3-GlcN-(酰基)PI）并非糖脂A（乙醇胺-PO4-Man3-GlcN-PI）的必要前体，糖脂C可以转化为糖脂A。这些数据提示，糖脂C是GPI生物合成途径的最终产物，与糖脂A处于动态平衡状态。PMSF对锥虫前环型中乙醇胺磷酸加成和肌醇酰化的抑制作用也在锥虫中观察到，但在哺乳动物HeLa细胞中未观察到。这些结果表明相关寄生虫酶与哺乳动物酶之间存在差异。[4]

---

花生四烯酸乙醇胺（Anandamide）是一种推定的内源性大麻素配体，其药理作用与大麻中的主要精神活性成分Δ9-四氢大麻酚（THC）相似。大量证据表明，酶抑制剂苯甲基磺酰氟（PMSF）能够通过阻断花生四烯酸乙醇胺的代谢，在体外改变其作用。因此，本研究在小鼠中开展，旨在确定PMSF是否能够通过改变内源性花生四烯酸乙醇胺的水平产生大麻素效应，以及PMSF是否能够增强外源性花生四烯酸乙醇胺的作用。腹腔注射PMSF的小鼠表现出大麻素效应，包括镇痛、体温过低和活动减少，其ED50值分别为86、224和206 mg/kg。剂量超过100 mg/kg时，小鼠的自发活动减少。然而，这些效应均未被大麻素拮抗剂SR 141716A阻断。另一方面，预先给予无效剂量的PMSF（30 mg/kg）可分别将花生四烯酸乙醇胺（anandamide）对甩尾反应（镇痛）、自发活动和运动能力的影响增强5倍、10倍和8倍。PMSF不影响花生四烯酸乙醇胺的降温效应。总的来说，PMSF的这些发现强调了代谢在花生四烯酸乙醇胺作用中的重要性。花生四烯酸乙醇胺的代谢产物是否对其药理活性有贡献仍有待确定。 [5]

---

丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟 (PMSF) 已被用于促进和保护母鸡免受有机磷诱导的迟发性神经病变 (OPIDN) 的神经病理学事件的影响（Veronesi 和 Padilla，1985；Pope 和 Padilla，1990；Lotti 等，1991；Pope 等，1993；Randall 等，1997）。本研究首次利用环氧树脂包埋和超薄切片技术提供的高分辨率显微镜，扩展了这项工作，以评估促进和保护作用的神经病理学表现，并将其与相关的临床改变联系起来。为了评估 OPIDN 的剂量相关效应，我们给成年母鸡分别注射了 0.5、1.0 或 2.5 mg/kg 的单剂量苯基水杨苷磷酸酯 (PSP)。 PMSF（90 mg/kg）分别在 PSP 给药后 4 小时（促进作用）或给药前 12 小时（保护作用）给予。监测临床症状和颈二腹神经的病理变化，该神经对 OPIDN 具有独特的敏感性（El-Fawal 等，1988）。单独使用 PSP（2.5 mg/kg）可引起严重的 OPIDN（终末临床评分 7.5 ± 1.0 [0-8 分制]；神经病理评分 2.7 ± 0.3 [0-4 分制，基于髓鞘纤维变性]）。在 PSP 给药前 12 小时给予 PMSF 可完全保护 OPIDN（临床评分和神经病理评分均为 0；与单独使用 PSP 相比，p<0.0001）。单独使用0.5 mg/kg PSP后未观察到OPIDN的体征和病变，但PSP给药4小时后给予PMSF可增强其神经毒性作用（所有母鸡的临床评分均为4.0，平均神经病理学评分为3.5 ± 0.3；与单独使用PSP相比，p<0.0001）。尽管观察到定量差异，但光镜和电镜观察均未发现OPIDN母鸡神经组织之间的定性差异。处死时，观察最后一天的临床评分与神经病理学评分之间存在统计学意义上的线性关系（r² = 0.76，p<0.0001）。本研究表明，周围神经髓鞘纤维变性的程度与PMSF诱导的OPIDN增强和保护作用的临床缺陷相关。[6]

---

PMSF是一种合成的丝氨酸蛋白酶抑制剂，在高浓度下不可逆，在低浓度下可逆，广泛用作研究丝氨酸蛋白酶在酶促反应、细胞信号传导和病理过程（例如炎症、组织损伤）中作用的研究工具。[3,4]
-早期研究([1],[2])主要集中于PMSF抑制血浆和组织丝氨酸蛋白酶（例如纤溶酶、羧酸酯酶）的能力，为其在凝血和代谢途径研究中的应用奠定了基础。[1,2]
-在心血管研究中，PMSF用于抑制钙蛋白酶（一种丝氨酸蛋白酶相关酶），并减少由OPIDN引起的心肌细胞损伤。氧化应激[4]
- 在神经科学领域，PMSF 通过抑制丝氨酸蛋白酶介导的神经元死亡，在脑缺血和兴奋性毒性模型中表现出神经保护作用，这支持了其作为研究神经退行性疾病机制的工具的应用[5,6]
- PMSF 在水溶液中不稳定（中性 pH 值下半衰期约为 30 分钟），因此在实验前需要新鲜配制[3]

C7H7FO2S

174.19

174.015

C, 48.27; H, 4.05; F, 10.91; O, 18.37; S, 18.41

329-98-6

4784

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

285.7±19.0 °C at 760 mmHg

92-95 °C

126.6±21.5 °C

0.0±0.6 mmHg at 25°C

1.522

2.33

42.52

0

3

2

11

199

0

O=S(CC1=CC=CC=C1)(F)=O

YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C7H7FO2S/c8-11(9,10)6-7-4-2-1-3-5-7/h1-5H,6H2

phenylmethanesulfonyl fluoride

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Isopropanol: ~60 mg/mL (~344.5 mM)

DMSO: ~35 mg/mL (~200.9 mM)

Water: <1 mg/mL

Ethanol: ~15 mg/mL (~86.1 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (11.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (11.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (11.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 20 mg/mL (114.82 mM) in Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。