| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
YL939 binds to prohibitin 2 (PHB2) with a Kd value of 3.43 μM as determined by surface plasmon resonance (SPR) assay. The binding induces a thermal shift (ΔTm) of 2.65°C in differential scanning fluorimetry (DSF) assay. Molecular docking predicted that YL939 forms two hydrogen bonds: one between the nitrogen atom of the pyrazole ring and residue D82, and another between the nitrogen atom of the piperidine ring and residue D127. The distal phenyl group forms hydrophobic interactions with residues V43 and I80. Mutation of D82A and D127A almost abolished the binding of YL939 to PHB2. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
YL939在erastin诱导的铁死亡模型中保护细胞，EC50值：ES-2细胞0.09 μM，HT1080细胞0.14 μM，Miapaca-2细胞0.25 μM，Calu-1细胞0.16 μM，HCT116细胞0.16 μM，SHSYSY细胞0.24 μM。[1]
YL939也能保护细胞免受其他铁死亡诱导剂（包括RSL3和ML210）的损伤。[1] YL939不挽救bortezomib诱导的细胞凋亡、TNFα/Smac-mimetic/zVAD-FMK诱导的坏死性凋亡、尼日利亚菌素诱导的细胞焦亡或elesclomol/CuCl2诱导的铜死亡，表明其对铁死亡具有特异性。[1] 透射电子显微镜显示YL939（5 μM，10小时）保护了erastin诱导的线粒体嵴消失和外膜破裂。[1] YL939处理不影响GSH水平，但显著降低了丙二醛水平。YL939处理显著降低了erastin诱导的胞质ROS、脂质ROS和线粒体ROS。[1] YL939处理剂量依赖性地上调铁蛋白及其mRNA表达，并剂量依赖性地降低erastin处理升高的细胞内铁水平。YL939处理以浓度依赖性方式增加erastin处理细胞中的NCOA4和铁蛋白水平，表明抑制了铁蛋白自噬。[1] YL939在低于3 μM的浓度下对六种正常细胞系未显示明显细胞毒性，但在高于3 μM的浓度下显示明显细胞毒性。[1] YL-939 (0.01-10 μM) 和 HT-1080、Miapaca-2、Calu-1、HCT116 和 SHSY5Y 细胞显着保护细胞免于铁死亡（IC50 值为 0.14 μM、0.25 μM、0.16 μM、0.16 μM）。每毫克 0.24 微克[1]。使用 YL-939 降低细胞质和膜脂质中的 ROS 水平（5 μM；10 小时；ES-2 细胞）[1]。 PHB2 是 YL-939 的生物靶标（5 μM；1-10 小时；ES-2 细胞）[1]。 YL-939（3 μM；10 小时；ES-2 细胞）通过改善铁蛋白表达及其阻断自噬体/溶酶体的能力，实现铁蛋白自噬的浓度依赖性抑制。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
YL939在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤模型中改善了肝脏损伤。雄性C57BL/6小鼠在对乙酰氨基酚注射前2小时用YL939（3 mg/kg，腹腔注射）预处理。对乙酰氨基酚注射后6小时，YL939处理组血清AST和ALT水平显著低于单独APAP组。YL939还降低了血清和肝脏MDA水平。YL939处理增加了肝脏铁蛋白蛋白和mRNA表达。组织学分析显示YL939改善了APAP诱导的肝脏损伤。[1]
在对乙酰氨基酚 (APAP) 诱导的急性肝损伤模型中，YL-939（3 mg/kg；腹腔注射；单次注射）可改善肝损伤 [1]。 |
| 酶活实验 |
YL939表面等离子体共振实验：将PHB2¹⁻¹⁹⁴蛋白固定在CM5传感器芯片上。将不同浓度的YL939流过芯片。流速为10 μL/min，接触时间120秒，解离时间100秒。YL939与PHB2结合的Kd值为3.43 μM。使用无活性的类似物YL447作为阴性对照，未显示结合。[1]
差示扫描荧光法实验：每孔加入9.8 μL蛋白和SYPRO Orange混合物，与0.2 μL化合物混合（终浓度200 μM化合物，10 μM蛋白，20 mM Hepes pH 7.5，150 mM NaCl）。热变性通过从25°C到95°C的升温实现（1°C/分钟）。YL939诱导的热位移为2.65°C。[1] DPPH自由基清除实验：YL939（50 μM）无抗氧化活性。[1] Ferrozine比色法铁螯合实验：YL939（50 μM）无铁螯合能力。[1] |
| 细胞实验 |
YL939细胞活力测定：将细胞接种在96孔板中，用化合物处理48小时，然后加入MTT或CCK-8试剂孵育2-4小时。在490 nm（MTT）或450 nm（CCK-8）处测量吸光度。使用GraphPad Prism计算EC50值。[1]
CytoCalcein Violet 450（活细胞）和7-AAD（死细胞）双染色：ES-2和HT1080细胞用或不用erastin（10 μM）和YL939处理10小时，然后染色并成像。[1] 透射电子显微镜：ES-2细胞用DMSO、erastin（10 μM）或erastin加YL939（5 μM）处理10小时，用3%戊二醛固定，然后用1%锇酸固定，环氧树脂包埋，切片（50 nm），醋酸铀和柠檬酸铅染色，然后观察。[1] 细胞内ROS检测：处理10小时后收集细胞，重悬于HBSS中，用H2DCFDA（5 μM）染色胞质ROS，C11-BODIPY（2 μM）染色脂质ROS，或MitoSOX（5 μM）染色线粒体ROS，37°C孵育10分钟，流式细胞术分析（≥10,000个细胞）。[1] 细胞内MDA检测：裂解细胞，与MDA工作液（0.37% TBA加抗氧化剂）混合，100°C加热15分钟，冷却，离心，在532 nm处测量吸光度。[1] 细胞内GSH检测：裂解细胞，使用GSH检测试剂盒按说明书测定GSH水平。[1] 蛋白质印迹分析：在含蛋白酶抑制剂混合物和PMSF的NP-40裂解缓冲液中裂解细胞。蛋白通过12% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用5%牛奶封闭，与一抗（1:1000）在4°C孵育过夜，然后与HRP标记的二抗（1:5000）在37°C孵育1小时，ECL显影。使用的抗体：PHB2、VDAC1、VDAC2、PHB1、α-Tublin、β-actin、SLC7A11、GPX4、TFR1、FPN、DMT1、Ferritin、NCOA4、FTH1、FTL。[1] RT-qPCR：提取总RNA，反转录为cDNA，使用SYBR Green进行qPCR。使用的引物：PHB2、FTH1、FTL、DMT1、TFR1、FSP1、DHODH、GCH1、GAPDH。表达以GAPDH为内参标准化。[1] siRNA转染：使用lipofectamine 2000将50 nM siPHB2转染ES-2细胞24小时。PHB2 siRNA#1序列：5'-CUACAGAUGGUAGAAUUCUTT-3'；siRNA#2：5'-CUUGAGAAGCCAAAACCAGUTT-3'；siRNA#3：5'-CACAGAAGCUGAUCUAUUCUTT-3'。[1] 慢病毒转染：shPHB2#1序列：5'-CCAGAATATCTCCAAGACGAT-3'；shPHB2#2序列：5'-AAGAACCCTGGCTACATAAA-3'。对于PHB2过表达，将PHB2序列插入pLVX-IRES-Zsgreen1载体。[1] Fe²⁺检测：使用Fe²⁺检测试剂盒或荧光成像探针按说明书检测细胞内铁。[1] 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： ES-2 细胞 测试浓度： 5 μM 孵育时间： > 1、5、7.5 和 10 小时 实验结果：通过探针拉下 PHB2 蛋白。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： ES- 2 细胞 测试浓度： 3 μM 孵育持续时间：10小时 实验结果：以剂量依赖性方式增加核受体共激活剂4(NCOA4)的表达。 |
| 动物实验 |
YL939对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤模型：使用雄性C57BL/6小鼠（4-5周龄）。YL939溶于溶媒（5% DMSO + 3% HS-15 Solutol + 92%生理盐水），通过腹腔注射给药，剂量为3 mg/kg。2小时后，腹腔注射对乙酰氨基酚（500 mg/kg，溶于生理盐水）。对乙酰氨基酚注射后6小时处死小鼠。分离血清，使用全自动生化分析仪检测AST和ALT。收集肝脏：一部分快速液氮冷冻用于蛋白和mRNA表达检测，另一部分固定在4%多聚甲醛中进行H&E染色和免疫组化。每组使用8只小鼠（血清AST/ALT检测n=4，MDA检测n=6，蛋白和mRNA表达n=2-3）。[1]
动物/疾病模型：对乙酰氨基酚（APAP）诱导的雄性C57BL/6J小鼠[1] 剂量：3 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；单次注射 实验结果：抑制了接受APAP的雄性C57BL/J6小鼠肝组织中的细胞死亡和炎症浸润。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
YL939在低于3 μM的浓度下对六种正常细胞系（L02、LX-2、Beas-2b、HUVEC、Arpe和hTERT-HPNE）未显示明显细胞毒性，但在高于3 μM的浓度下显示明显细胞毒性。[1]
在APAP诱导的急性肝损伤模型中，3 mg/kg腹腔注射剂量下未报告死亡率或显著不良事件。未具体报告体重变化。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
YL939是通过从先导化合物Cpd-015开始的逐步优化过程发现的。优化集中在三个亚基：4-甲氧基苯（R1）、3,6-二氢-2H-吡喃（R2）和1-甲基-4-苯基哌嗪（R3）。[1]
机制上，YL939与PHB2结合促进铁储存蛋白铁蛋白的表达，从而降低铁含量，进而降低对铁死亡的敏感性。PHB2敲低或YL939处理阻断了自噬体/溶酶体并抑制了铁蛋白自噬。[1] YL939不影响GPX4信号通路关键组分（SLC7A11、GPX4）的表达，也不影响FSP1、GCH1和DHODH的mRNA表达（其他三条铁死亡防御通路的核心组分）。[1] 四川大学已申请涵盖YL939及相关化合物的中国专利。[1] |
| 分子式 |
C25H26N6O
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|---|---|
| 分子量 |
426.513544559479
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| 精确质量 |
426.216809
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| 元素分析 |
C, 70.40; H, 6.14; N, 19.70; O, 3.75
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| CAS号 |
3023925-68-7
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| SMILES |
O1CC=C(CC1)C1C2=NC(C3C=CC=CC=3)=CN2C=C(C2C=NN(C=2)C2CCNCC2)N=1
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| 别名 |
YL-939; YL939; orb1744106; SCHEMBL31339950;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~234.46 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3446 mL | 11.7231 mL | 23.4461 mL | |
| 5 mM | 0.4689 mL | 2.3446 mL | 4.6892 mL | |
| 10 mM | 0.2345 mL | 1.1723 mL | 2.3446 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
(1R,3R)-RSL3
LIBX-A403
LIBX-A402
Diplacone
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