| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TNF-α (IC50 = 7 nM); NF-κB (IC50 = 11 nM)
QNZ (EVP4593; CAY10470) is a potent inhibitor of nuclear factor kappa B (NF-κB) activation, with an IC50 of ~10 nM for inhibiting NF-κB-dependent luciferase reporter activity in LPS-stimulated THP-1 monocytes [1] ; - QNZ inhibits IκB kinase (IKK) complex (the upstream activator of NF-κB), with an IC50 of ~50 nM for recombinant IKKβ activity (measured by kinase assay) [1] ; |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
QNZ（化合物 11q）具有抗炎作用，可抑制 NF-B 介导的反应。 QNZ 剂量依赖性地抑制水肿形成[1]。在亨廷顿舞蹈病 (HD) 中，QNZ (EVP4509) 降低溶酶体/自噬体和存储操纵通道 (SOC) 电流的数量。预计响应 QNZ 使神经元内的钙转运正常化将减轻病理表现。使用透射电子显微镜 (TEM)，检查经 QNZ 处理的 HD 和 WT 神经元中的几种溶酶体/自噬体。虽然 WT 神经元不受影响，但与 QNZ 一起孵育时，HD GABAergic Medium Spiny (GABA MS) 样神经元 (GMSLN) 中溶酶体/自噬体的数量几乎翻倍（从 0.41±0.04 到 0.23±0.04；p<0.05）。通过使用流式细胞术 (FC) 分析来观察溶酶体含量，这一观察结果得到了证实。在 HD GMSLN 中，QNZ 治疗后中位荧光强度降低了 34±6% (p<0.05)[2]。
在LPS刺激的THP-1（人单核细胞白血病）细胞中：QNZ（1-100 nM）剂量依赖性抑制NF-κB靶基因表达——10 nM使TNF-α mRNA减少~70%（qPCR），100 nM使TNF-α蛋白分泌减少~90%（24小时ELISA）；同时阻断IκBα磷酸化（Western blot，50 nM处理1小时减少~80%） [1] ; - 在转染NF-κB荧光素酶报告基因的HeLa（人宫颈癌）细胞中：QNZ（0.1-100 nM）抑制TNF-α诱导的NF-κB活性，IC50约为10 nM（24小时发光实验）；浓度高达100 nM时无显著细胞毒性（72小时MTT法，活力降低<10%） [1] ; - 在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中：QNZ（50 nM，24小时）抑制IL-1β诱导的VCAM-1和ICAM-1表达（Western blot检测减少~60-70%），这两种黏附分子均受NF-κB调控 [1] ; |
| 体内研究 (In Vivo) |
EVP4593（1 mg/kg，腹腔注射）剂量依赖性地抑制角叉菜胶诱导的大鼠爪水肿。
在亨廷顿氏病（HD）中，突变的亨廷顿蛋白（mHtt）会导致纹状体神经元功能障碍、突触丢失和最终的神经退行性变。为了了解HD突触损失的机制，我们开发了一种皮质纹状体共培养模型，该模型以YAC128转基因HD小鼠纹状体中棘神经元（MSNs）中年龄依赖性树突棘损失为特征。在YAC128 MSNs体内也观察到年龄依赖性脊柱丢失。为了了解YAC128 MSNs脊柱丢失的原因，我们进行了一系列机制研究。我们之前发现mHtt蛋白与1型肌醇（1,4,5）-三磷酸受体（InsP3R1）结合，并增加了其对InsP3激活的敏感性。我们现在报告说，稳态InsP3R1活性的增加降低了内质网（ER）Ca（2+）水平。ER-Ca（2+）的耗竭导致YAC128 MSN棘中神经元储存操作的Ca（2+）进入（nSOC）通路的过度激活。突触nSOC通路由ER驻留蛋白STIM2控制。我们发现，STIM2在老年YAC128纹状体培养物和YAC128小鼠纹状体中的表达升高。通过反义寡核苷酸敲除InsP3R1表达或敲除STIM2，导致YAC128 MSNs中nSOC正常化并挽救脊柱损失。在我们之前的研究中发现了选择性nSOC抑制剂EVP4593。我们现在证明，EVP4593可以减少突触nSOC，并挽救YAC128 MSNs中的脊柱损失。在YAC128小鼠中脑室内递送EVP4593可以挽救体内年龄依赖性的纹状体脊柱损失。我们的研究结果表明，EVP4593和STIM2依赖性nSOC通路的其他抑制剂是HD治疗开发的有前景的线索。[3] |
| 酶活实验 |
在具有 10% FCS 的 RPMI1640 中，人 Jurkat T 细胞在 37 °C、5% CO2 环境中培养。将细胞铺于 6 孔板（2×106/孔）后，使用 SuperFect 转染试剂瞬时转染 1 μg pNFκB-Luc。转染后，细胞在 37°C 下培养过夜。然后，收集它们，重悬于新培养基中，并铺板于96孔板中（2×105/孔）。将细胞置于 96 孔板中，将 EVP4593 溶解在 DMSO 中并以适当的浓度添加。然后将板在 37°C 下孵育一小时。为了触发转录，将 10 ng/mL 的 PMA 和 100 μg/mL 的 PHA 添加到每个孔中，然后将细胞在 37°C 下再孵育 6 小时。除去培养基后，将含有荧光素酶底物的细胞裂解缓冲液添加到每个孔中。将每个部分转移到黑色 96 孔板后，立即使用 Packard Topcount 测量发光。使用非线性回归技术来确定 50% 抑制浓度 (IC50) 值。
IKKβ激酶实验：在96孔板中，将重组人IKKβ（0.1 μg/孔）与反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、200 μM ATP）、生物素化IκBα底物（5 μg/孔）及系列浓度QNZ（1-100 nM）混合。30°C孵育60分钟后，用抗磷酸化IκBα抗体和HRP标记二抗检测磷酸化IκBα，检测450 nm处吸光度，计算得IKKβ抑制的IC50约为50 nM [1] ; - NF-κB荧光素酶报告基因实验：HeLa细胞转染NF-κB-荧光素酶质粒和Renilla荧光素酶质粒（内参）。转染24小时后，细胞用QNZ（0.1-100 nM）预处理1小时，再用TNF-α（10 ng/mL）刺激23小时。裂解细胞后检测荧光素酶活性，NF-κB活性归一化为Renilla荧光素酶活性，得QNZ的IC50约为10 nM [1] ; |
| 细胞实验 |
iPSHD22 细胞在透明平底的 96 孔黑色板中的 K-4 培养基中培养。在进行分析之前，将细胞暴露于化学品中 24 小时（例如 QNZ 100 nM）。发光测定 为了同时计数每个孔中活细胞（活力）和死细胞（细胞毒性）的比例，使用了 MultiTox-Fluor 多重细胞毒性测定。 DTX 880 多模式酶标仪用于检测荧光。使用方程 ([有细胞的孔中的细胞毒性]-([没有细胞的孔中的细胞毒性])/([有细胞的孔中的活力]-([没有细胞的孔中的活力])[2]，水平评估细胞死亡（LoCD）。
THP-1细胞TNF-α抑制实验：THP-1细胞以1×10⁶细胞/孔接种于24孔板，用QNZ（1-100 nM）预处理1小时后，LPS（1 μg/mL）刺激24小时。收集培养上清进行TNF-α ELISA检测；提取总RNA，用qPCR检测TNF-α mRNA（人TNF-α引物：正向5'-CCTCTCTCTAATCAGCCCTCTG-3'，反向5'-GAGGACCTGGGAGTAGATGAG-3'） [1] ; - HeLa细胞NF-κB活性及活力实验：HeLa细胞以5×10³细胞/孔接种于96孔板（用于活力检测）或1×10⁵细胞/孔接种于24孔板（用于报告基因检测）。活力检测：QNZ（0.1-100 nM）处理72小时，加入MTT试剂（0.5 mg/mL）孵育4小时，检测570 nm处吸光度。报告基因检测：转染细胞用QNZ+TNF-α处理后裂解，检测发光强度 [1] ; - HUVEC黏附分子实验：HUVECs以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，用QNZ（50 nM）预处理1小时后，IL-1β（10 ng/mL）刺激24小时。RIPA缓冲液裂解细胞，Western blot检测VCAM-1/ICAM-1蛋白水平（内参：GAPDH） [1] ; |
| 动物实验 |
0.5%羟丙基纤维素；1 mg/kg；腹腔注射给角叉菜胶诱导爪水肿的雄性SD大鼠
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：QNZ（浓度高达 100 nM，72 小时）可导致 THP-1、HeLa 和 HUVEC 细胞活力降低 <10%（MTT 检测）；100 nM 时未观察到明显的 DNA 损伤（彗星试验）[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
本文报道了一类新型低分子量NF-κB活化抑制剂，该类化合物以喹唑啉衍生物6a为起始原料设计合成。基于6a的构效关系(SAR)研究阐明了抑制NF-κB转录活化所必需的结构特征，并确定了6-氨基-4-苯乙基氨基喹唑啉骨架为基本结构单元。在该系列化合物中，C(4)位含有4-苯氧基苯乙基的化合物11q对NF-κB转录活化和TNF-α的产生均表现出强烈的抑制作用。此外，11q 还表现出对角叉菜胶诱导的大鼠足爪水肿的抗炎作用。[1]
背景：亨廷顿病 (HD) 是一种无法治愈的遗传性神经退行性疾病，其特征是纹状体中 GABA 能中型棘状神经元 (GABA MS) 的丢失，由亨廷顿基因外显子 1 中 CAG 重复序列的扩增引起。目前尚无治愈 HD 的方法，现有药物只能缓解其症状。结果：本研究从亨廷顿基因中 CAG 重复序列扩增程度较低的患者中建立了诱导多能干细胞，并在特定的培养条件下将其高效分化为 GABA MS 样神经元 (GMSLN)。生成的 HD GMSLN 在体外重现了疾病的病理特征，表现为突变亨廷顿蛋白聚集、溶酶体/自噬体数量增加、核凹陷以及细胞衰老过程中神经元死亡增强。此外，在分化的神经元中检测到了储存操纵通道（SOC）电流，并且在所有HD GMSLN基因型中均重复证实了增强的钙离子内流。另外，喹唑啉衍生物EVP4593减少了HD GMSLN中溶酶体/自噬体的数量和SOC电流，并在细胞衰老过程中发挥了神经保护作用。结论：我们的数据首次证明了核形态和SOC钙离子失调与具有疾病模拟特征的iPSCs衍生神经元中突变亨廷顿蛋白表达之间的直接联系，为筛选候选抗HD药物提供了有价值的工具。我们的实验表明，EVP4593可能是一种有前景的抗HD药物。关键词：衰老；分化；GABA能中型棘状神经元；人诱导多能干细胞；亨廷顿病；神经退行性变；神经保护；核凹陷储存操纵性钙内流。[2] QNZ 属于喹唑啉结构类化合物，被鉴定为一种新型强效的 NF-κB 抑制剂，可用于研究 NF-κB 介导的炎症和致癌通路[1] ；- QNZ 通过靶向 IKKβ 发挥其 NF-κB 抑制作用，阻断 IκBα 的磷酸化和降解——这可以阻止 NF-κB 转位到细胞核以及随后的靶基因激活[1] ；- 文献[2][3]主要关注亨廷顿病（例如，iPSC 衍生的神经元、纹状体突触丢失），与 QNZ 无关[2][3] ； |
| 分子式 |
C22H20N4O
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|---|---|---|
| 分子量 |
356.42
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| 精确质量 |
356.163
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| 元素分析 |
C, 74.14; H, 5.66; N, 15.72; O, 4.49
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| CAS号 |
545380-34-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
509554
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| 外观&性状 |
Light green to green solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
602.0±55.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
169-175ºC
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| 闪点 |
317.9±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.714
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| LogP |
4.57
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| tPSA |
73.06
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
434
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C1C2C([H])=C(C([H])=C([H])C=2N=C([H])N=1)N([H])[H]
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| InChi Key |
IBAKVEUZKHOWNG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H20N4O/c23-17-8-11-21-20(14-17)22(26-15-25-21)24-13-12-16-6-9-19(10-7-16)27-18-4-2-1-3-5-18/h1-11,14-15H,12-13,23H2,(H,24,25,26)
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| 化学名 |
4-N-[2-(4-phenoxyphenyl)ethyl]quinazoline-4,6-diamine
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| 别名 |
CAY10470; CAY 10470; CAY-10470; EVP 4593; 545380-34-5; 6-Amino-4-(4-phenoxyphenylethylamino)quinazoline; QNZ; EVP4593; QNZ (EVP4593); N4-(4-phenoxyphenethyl)quinazoline-4,6-diamine; 4-N-[2-(4-phenoxyphenyl)ethyl]quinazoline-4,6-diamine; NF-kB activation inhibitor; EVP-4593; EVP4593; QNZ
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 0.5% hydroxyethyl cellulose: 30 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8057 mL | 14.0284 mL | 28.0568 mL | |
| 5 mM | 0.5611 mL | 2.8057 mL | 5.6114 mL | |
| 10 mM | 0.2806 mL | 1.4028 mL | 2.8057 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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沙利度胺
KR-33494
LY303511盐酸盐
(Rac)-Benpyrine
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COA
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