| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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描述：TAE684（也称为 NVP-TAE684；TAE-684）是一种新型、高效且选择性的 ALK（间变性淋巴瘤激酶）酪氨酸激酶小分子抑制剂，具有潜在的抗癌活性。在无细胞实验中，它对 ALK 的抑制 IC50 为 3 nM。TAE 684 对 ALK 的抑制灵敏度比 InsR 高 100 倍。其 IC50 值介于 2 和 10 nM 之间，在体外对 ALK 依赖性和 ALCL 衍生细胞系表现出强大的抗增殖活性。
NVP-TAE684 (TAE684) 是一种从激酶靶向化合物库中筛选得到的 5-氯-2,4-二氨基苯基嘧啶类小分子抑制剂。它是一种高效且选择性的 NPM-ALK 融合激酶抑制剂，该激酶驱动间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL) 的发生。TAE684 能以低纳摩尔级的 IC50 值抑制 NPM-ALK 依赖性细胞系的增殖，诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞，并在体内抑制淋巴瘤的发生。它还能克服携带 L1196M 突变的 EML4-ALK 阳性非小细胞肺癌对克唑替尼的耐药性。[1][2]
| 靶点 |
ALK (IC50 = 2-10 nM)
NPM-ALK (IC50 for inhibition of NPM-ALK autophosphorylation in cells: <10 nM after 4h treatment in Karpas-299 and SU-DHL-1 cells)[1] ALK (in Ba/F3 cells expressing EML4-ALK L1196M mutant: IC50 = 2.7 nM for native EML4-ALK vs 1.2 nM for mutant; in vitro Ki against wild-type ALK = 0.7 nM, against L1196M ALK = 8.2 nM for crizotinib, but for NVP-TAE684 no direct Ki given; cellular potency against native EML4-ALK IC50 = 1.2 nM, against L1196M mutant IC50 = 2.7 nM)[2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TAE684 与其他激酶无明显交叉反应。在 3 nM 的有效浓度下，TAE684 可显著抑制 Ba/F3 NPM-ALK 细胞的生长，而在 1 μM 的浓度下，Ba/F3 细胞仍保持活性。TAE684 的 IC50 为 2-4 nM，也能抑制表达 NPM-ALK 的人类 ALCL 细胞系（如 Karpas-299 和 SU-DHL-1）的生长。分子建模显示，TAE684 的激酶选择性可能受到 L258 的显著影响。TAE684 可快速且持续地抑制 NPM-ALK 的磷酸化。在 ALCL 患者细胞系和表达 NPM-ALK 的 Ba/F3 细胞中，TAE684 可诱导细胞凋亡和 G1 期阻滞。在含有融合癌基因 EML4-ALK 的 H3122 CR 细胞中，TAE684 通过减少细胞生长、抑制 ALK 磷酸化和触发细胞凋亡，显著克服了克唑替尼耐药性。[2]浓度为 30 nM 的 TAE684 可完全抑制 mALK R1279Q 突变体诱导的神经突生长。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 Karpas-299 淋巴瘤模型中，以 3 和 10 mg/kg 的剂量连续 4 周使用 TAE684 治疗，可显著延缓淋巴瘤的进展，并使发光信号降低 100 至 1000 倍，且未观察到任何化合物或疾病相关的毒性。在已建立的 Karpas-299 淋巴瘤中，TAE684 治疗还能降低 CD30 的表达并导致疾病消退。[1] TAE684 对 H3122 CR 异种移植瘤表现出显著的抗肿瘤活性。[2] 此外，TAE684 治疗可改善两种 ALK 突变体（尤其是 ALKR1275Q）的粗糙眼表型，而克唑替尼对这两种表型的影响均可忽略不计。[3] NVP-TAE684 在体内显示出良好的生物利用度和半衰期。口服剂量为 20 mg/kg（配制于 10% 1-甲基-2-吡咯烷酮/90% PEG 300 中）后，血浆最大浓度 (Cmax) 为 800-1000 nM，生物利用度 (BAV) 为 60-70%，消除半衰期 (T1/2) 约为 12 小时。[1]
在 Karpas-299 荧光素化的静脉异种移植模型（SCID-beige 小鼠）中，从细胞注射后 72 小时开始，每天一次通过灌胃给予 3 和 10 mg/kg 的 TAE684 治疗，2 周后生物发光信号降低了 100 倍，4 周后降低了 100 至 1000 倍；1 mg/kg 无效。在 10 mg/kg 剂量下未观察到毒性迹象。[1] 在 Ba/F3 NPM-ALK 同种异体移植模型中，与载体相比，TAE684 (10 mg/kg) 可使生物发光信号降低 99% 以上，脾脏重量降低 80%，但对 Ba/F3 BCR-ABL 诱导的疾病无影响，表明其具有特异性。[1] 在已建立的 Karpas-299 淋巴瘤模型中（注射后 12 天开始治疗），每日口服 3、5 和 10 mg/kg 的 TAE684 可诱导剂量依赖性消退，2 周后生物发光降低 1000 倍。[1] 对已建立可触及的 Karpas-299 淋巴瘤的小鼠进行短期治疗（10 mg/kg，连续 3 天）可降低切除淋巴结中 NPM-ALK 和 STAT3 的磷酸化水平，并显著降低 CD30 的表达。免疫组织化学。[1] 体内，NVP-TAE684（10 mg/kg）对 H3122 CR 异种移植瘤（克唑替尼耐药，L1196M 突变）表现出显著的活性，而克唑替尼无效。[2] |
| 酶活实验 |
将 10 mM 的 GSK1904529A 溶解于 DMSO 中配制成储备液。IC50 的测定采用标记有谷胱甘肽 S-转移酶的蛋白质，这些蛋白质由细菌表达，编码 IGF-1R（氨基酸 957–1367）和 IR（氨基酸 979–1382）的胞内结构域。为了激活激酶，必须将酶在含有 50 mM HEPES（pH 7.5）、10 mM MgCl2、0.1 mg/mL 牛血清白蛋白和 2 mM ATP 的溶液中预孵育，使其最终浓度为 2.7 μM。将 100 nL/孔的稀释后的 GSK1904529A（用 DMSO 稀释）加入测定板中。激酶反应体系（10 μL）包含：0.5 nM 活化酶、500 nM 底物肽（生物素标记的氨基己基AEEEEYMMMMAKKKK-NH2；QPC）、3 mM DTT、0.1 mg/mL 牛血清白蛋白、1 mM CHAPS、10 mM MgCl2 和 10 μM ATP。室温反应 1 小时后，加入 33 μM EDTA 终止反应。使用 1 nM 铕标记的磷酸酪氨酸抗体和 7 nM 链霉亲和素 Surelight 别藻蓝蛋白，通过时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 技术测定肽的磷酸化水平。使用多标记阅读器读取微孔板。
由于胰岛素受体激酶 (InsR) 和 ALK 激酶结构域之间具有 45% 的序列同一性，因此以 InsR 结构 (PDB ID: 1IR3) 为模板进行 ALK 的同源建模。使用 GOLD (版本 1.3) 和标准默认设置将 NVP-TAE684 对接至 ALK 模型。所有原子类型和电荷均在 GOLD 中指定。对 TAE684 的柔性配体对接进行了 10 万次独立的遗传算法 (GA) 运行，搜索半径设置为 10 Å。[1] 在体外激酶活性测定中，比较了克唑替尼和 AP26113 对野生型和 L1196M ALK 的活性，测定了 ATP Km 值：野生型 ALK Km=30.7 μM，L1196M ALK Km=27.2 μM。克唑替尼对野生型ALK的Ki值为0.7 nM，对L1196M的Ki值为8.2 nM。AP26113对野生型ALK的Ki值为0.09 nM，对L1196M的Ki值为0.08 nM。（注：此处未直接检测TAE684，但引用TAE684进行结构比较。）[2] |
| 细胞实验 |
在384孔板中，每孔接种2.5×10⁴个细胞，然后用TAE684或DMSO系列稀释液孵育2-3天。使用Bright-Glo荧光素酶检测系统测量荧光素酶表达，荧光素酶表达可作为细胞增殖和存活的指标。使用XLFit软件生成IC50值。
细胞增殖实验。[1] 将表达荧光素酶的Karpas-299、SU-DHL-1和Ba/F3细胞以及稳定表达NPM-ALK、BCR-ABL或TEL激酶融合构建体的转化Ba/F3细胞接种于384孔板中（每孔25,000个细胞），并用TAE684或DMSO系列稀释液孵育2-3天。荧光素酶表达被用作细胞增殖/存活的指标，并使用 Bright-Glo 荧光素酶检测系统进行评估。IC50 值使用 XLFit 软件生成。 流式细胞术。[1] 在通过流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡之前，将 Ba/F3 NPM-ALK、Karpas-299 和 SU-DHL-1 细胞用 DMSO 或不同浓度的 TAE684 处理 24、48 和 72 小时。使用 Becton-Dickinson LSRII 流式细胞仪分析样品。 细胞增殖实验：将 Ba/F3 NPM-ALK、Karpas-299、SU-DHL-1 以及表达不同 TEL 激酶融合蛋白的转化 Ba/F3 细胞接种于 384 孔板（25,000 个细胞/孔），并用系列稀释的 NVP-TAE684 或 DMSO 处理 2-3 天。使用荧光素酶检测系统评估荧光素酶表达，以此作为细胞增殖/存活的指标。 IC50 值采用曲线拟合软件生成。[1] 蛋白质印迹分析：将细胞用 DMSO 或不同浓度的 TAE684 处理指定时间后裂解，并通过 SDS-PAGE 分离蛋白质，转移至膜上，并用针对 p-ALK (Y664)、总 ALK、p-STAT3、STAT3、p-STAT5、STAT5、p-ERK、ERK、p-Akt、Akt 和肌动蛋白的抗体进行免疫印迹分析。[1] 细胞凋亡和细胞周期的流式细胞术分析：将 Ba/F3 NPM-ALK、Karpas-299 和 SU-DHL-1 细胞用 DMSO 或 TAE684 处理 24、48 和 72 小时。通过 Annexin V 和 7-AAD 染色评估细胞凋亡；采用碘化丙啶 (PI) 染色法，通过流式细胞仪分析细胞周期分布。[1] siRNA 敲低：将 H3122 亲代细胞和 H3122 CR 细胞转染靶向 ALK 的 siRNA 或对照 siRNA。72 小时后检测细胞活力，并对蛋白裂解物进行 p-ALK 和总 ALK 的免疫印迹分析，以确认敲低效果。[2] 耐药性研究的细胞活力检测：将细胞接种于 96 孔板中，分别用克唑替尼、TAE684、AP26113 或 17-AAG 处理 72 小时，然后使用基于发光法的细胞活力检测试剂盒 (CellTiter-Glo) 分析细胞存活率。[2] |
| 动物实验 |
为了进行体内化合物疗效研究，将1×10⁶个表达Karpas-299、Ba/F3 NPM-ALK或BCR-ABL的细胞经尾静脉注射到雌性Fox Chase SCIDBeige小鼠体内，72小时后注射。将TAE684悬浮于10% 1-甲基-2-吡咯烷酮/90% PEG 300溶液中，分别以1、3和10 mg/kg的剂量每日一次给予小鼠（每组n=10），持续三周；或以相同给药方案给予赋形剂溶液。每周进行一次生物发光成像，以追踪疾病进展和化合物的疗效。在第12天通过生物发光成像确认疾病已扩散，此时开始给药，以评估TAE684对已扩散疾病的疗效。为分析体内下游分子效应，对已建立淋巴瘤模型的小鼠连续三天分别给予赋形剂溶液或TAE684（10 mg/kg）。治疗结束后，取出小鼠淋巴结，进行免疫印迹和组织学检查。
体内实验。[1] 为研究化合物的体内疗效，将1 × 10⁶个表达Karpas-299、Ba/F3 NPM-ALK或BCR-ABL的细胞尾静脉注射到雌性Fox Chase SCIDBeige小鼠体内，72小时后开始治疗。每组小鼠（n = 10）分别接受TAE684（溶于10% 1-甲基-2-吡咯烷酮/90% PEG 300溶液）或赋形剂溶液，每日一次，持续3周。TAE684的给药方案为1、3或10 mg/kg，每日一次。每周使用生物发光成像监测疾病进展和化合物疗效。为了确定TAE684对已确诊疾病的疗效，在第12天开始给药，此时生物发光成像证实疾病已广泛扩散。为了分析体内下游分子效应，将已确诊淋巴瘤的小鼠分别给予赋形剂或TAE684（10 mg/kg），持续3天。治疗结束后，处死小鼠，并提取淋巴结进行免疫印迹和组织学分析。 在体内疗效研究中，将1×10^6个Karpas-299-luc细胞、Ba/F3 NPM-ALK细胞或Ba/F3 BCR-ABL细胞静脉注射到6-8周龄的雌性SCID-beige小鼠体内。72小时后开始治疗。将NVP-TAE684重悬于10% 1-甲基-2-吡咯烷酮/90% PEG 300溶液中，并以1、3和10 mg/kg的剂量每日口服一次，持续3周。载体对照组接受相同的给药方案。每周通过生物发光成像监测疾病进展和疗效。[1] 为了评估对已形成疾病的疗效，在Karpas-299细胞注射后第12天开始给药，此时生物发光成像证实疾病已广泛扩散。小鼠每日口服TAE684，剂量分别为3、5和10 mg/kg。[1] 为了进行短期分子分析，对已形成可触及的Karpas-299淋巴瘤的小鼠给予载体或TAE684（10 mg/kg），持续3天。在第三次给药后 4 小时，处死小鼠，并提取淋巴结进行免疫印迹和组织学分析（CD30 免疫组织化学）。[1] 对于 H3122 CR 细胞的异种移植研究，荷瘤小鼠接受 TAE684 治疗（正文中未具体说明剂量），结果显示其对克唑替尼耐药肿瘤具有体内活性（参见 SI 附录，图 S9）。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服 20 mg/kg 的 NVP-TAE684（溶于 10% 1-甲基-2-吡咯烷酮/90% PEG 300 溶液）后，给药后 7 小时测得的最大血浆浓度 (Cmax) 为 800-1000 nM。生物利用度 (BAV) 为 60% 至 70%，消除半衰期 (T1/2) 约为 12 小时。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在每天一次以 10 mg/kg 的剂量用 NVP-TAE684 治疗小鼠长达 4 周后，未观察到明显的化合物或疾病相关毒性。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
5-氯-N2-[2-甲氧基-4-[4-(4-甲基-1-哌嗪基)-1-哌啶基]苯基]-N4-(2-丙基-2-基磺酰基苯基)嘧啶-2,4-二胺属于哌啶类化合物。
ALK抑制剂TAE684是一种小分子受体酪氨酸激酶(RTK)抑制剂，可抑制间变性淋巴瘤激酶(ALK)和核仁磷蛋白-间变性淋巴瘤激酶(NPM-ALK)，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，TAE684与ALK和NPM-ALK酪氨酸激酶结合并抑制其活性，从而阻断ALK和NPM-ALK介导的信号通路，最终抑制过表达ALK和NPM-ALK的肿瘤细胞的生长。 ALK属于胰岛素受体超家族，在神经系统发育中发挥重要作用。ALK失调和基因重排与多种肿瘤相关。NPM-ALK是一种致癌融合蛋白，与ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤相关。ALK突变也与获得性小分子酪氨酸激酶抑制剂耐药相关。 NVP-TAE684可诱导CD30表达下调，提示CD30可作为NPM-ALK激酶活性抑制的生物标志物。[1] NPM-ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤占所有病例的50-60%；TAE684靶向该致癌驱动因子。[1] 尽管序列同源性高，但TAE684在细胞实验中对胰岛素受体（InsR）具有高度选择性；这可能是由于三维结构或ATP浓度的差异造成的。[1] 在EML4-ALK阳性非小细胞肺癌中，克唑替尼耐药的情况下，NVP-TAE684能有效克服通过空间位阻产生耐药性的L1196M突变。这使得TAE684成为第二代ALK抑制剂。[2] |
| 分子式 |
C30H40CLN7O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
614.2
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| 精确质量 |
613.26
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| 元素分析 |
C, 58.66; H, 6.56; Cl, 5.77; N, 15.96; O, 7.81; S, 5.22
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| CAS号 |
761439-42-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
16038120
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| 外观&性状 |
Pale yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
791.0±70.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
432.2±35.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.622
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| LogP |
2.71
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| tPSA |
111.31
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
42
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| 分子复杂度/Complexity |
940
|
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| 定义原子立体中心数目 |
0
|
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| SMILES |
ClC1=C([H])N=C(N=C1N([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1S(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])(=O)=O)N([H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1OC([H])([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C1([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
QQWUGDVOUVUTOY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H40ClN7O3S/c1-21(2)42(39,40)28-8-6-5-7-26(28)33-29-24(31)20-32-30(35-29)34-25-10-9-23(19-27(25)41-4)37-13-11-22(12-14-37)38-17-15-36(3)16-18-38/h5-10,19-22H,11-18H2,1-4H3,(H2,32,33,34,35)
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| 化学名 |
5-chloro-2-N-[2-methoxy-4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)piperidin-1-yl]phenyl]-4-N-(2-propan-2-ylsulfonylphenyl)pyrimidine-2,4-diamine
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| 别名 |
NVP-TAE684; TAE 684; TAE684; NVP-TAE 684; 5-chloro-N4-(2-(isopropylsulfonyl)phenyl)-N2-(2-methoxy-4-(4-(4-methylpiperazin-1-yl)piperidin-1-yl)phenyl)pyrimidine-2,4-diamine; TAE684 (NVP-TAE684); NVP-TAE-684; TAE-684
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.77 mg/mL (1.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 7.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.77 mg/mL (1.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 7.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol, pH 4: 10mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6281 mL | 8.1407 mL | 16.2813 mL | |
| 5 mM | 0.3256 mL | 1.6281 mL | 3.2563 mL | |
| 10 mM | 0.1628 mL | 0.8141 mL | 1.6281 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CEP-28122 mesylate salt
Brigatinib-13C6 (AP-26113-13C6)
贝扎替尼
劳拉替尼
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